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公开(公告)号：CN109679905A
公开(公告)日：2019-04-26
申请号：CN201811579164.9
申请日：2018-12-24
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N5/0784 , C12N5/078 , A01N1/02
CPC classification number: C12N5/0639 , A01N1/0221 , C12N5/0634 , C12N2500/80 , C12N2501/22 , C12N2501/2304 , C12N2501/998 , C12N2509/00
Abstract: 本发明公开了一种鸡树突状细胞的制备方法及鸡树突状细胞，属于兽医免疫学技术领域，从鸡骨髓或其外周血中分离出单个核细胞，用基础培养基培养12-14h，弃去不贴壁细胞加入诱导培养基继续培养，培养2天后用增强型诱导培养基进行2/3量换液，培养5天后再用增强型诱导培养基进行半量换液，第7天获得未成熟树突状细胞，对其进行表型检测，进行实验或冻存。本发明用鸡血清代替了牛血清，避免异种血清对于鸡细胞的有害刺激；用诱导培养基和增强型培养基分两个阶段对单个核细胞进行诱导培养，增强型培养基中添加了水解乳蛋白和鸡胚尿囊液，不仅满足了后期细胞增殖对于营养的要求，同时也促进了细胞的增殖和分化。
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公开(公告)号：CN115894638A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202210987699.X
申请日：2022-08-17
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C07K14/18 , C12N15/40 , C12N15/81 , C12N1/19 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/532 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种重组鸭坦布苏病毒E蛋白结构域III蛋白的制备方法。本发明首先提供一株用于制备鸭坦布苏病毒E蛋白结构域III的毕赤酵母GS115菌株。该重组菌株是通过截取鸭坦布苏病毒囊膜蛋白EDIII抗原区域，经密码子优化获得鸭坦布苏病毒EDIII蛋白的编码序列，然后将其克隆到酵母表达载体pPIC9K上并转化到酵母宿主菌株GS115中。在甲醇的作用下，鸭坦布苏病毒EDIII蛋白获得高效表达。同时，将该蛋白作为包被抗原用于鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA诊断试剂盒，试剂盒具有较高的特异性、重复性及稳定性，可用于坦布苏病毒引起的相关疾病的诊断。
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公开(公告)号：CN110386965B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN201810350513.3
申请日：2018-04-18
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种坦布苏病毒E蛋白B细胞表位及其编码基因和应用。一种坦布苏病毒E蛋白B细胞表位，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述的坦布苏病毒E蛋白B细胞表位在制备坦布苏病毒疫苗中的应用。本发明用大肠杆菌表达的上述表位蛋白免疫雏鸭，可在雏鸭体内诱导产生高水平特异性抗体，该抗体对坦布苏病毒具有中和作用，并保护宿主免受病毒攻击。B细胞表位具有良好的抗原性，为非全病毒抗原，安全性好，不含无关杂蛋白。此外，还可与其他类型的表位共同构建新型多表位疫苗。因此，B细胞表位具有良好和广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN109679905B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN201811579164.9
申请日：2018-12-24
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N5/0784 , C12N5/078 , A01N1/02
Abstract: 本发明公开了一种鸡树突状细胞的制备方法及鸡树突状细胞，属于兽医免疫学技术领域，从鸡骨髓或其外周血中分离出单个核细胞，用基础培养基培养12‑14h，弃去不贴壁细胞加入诱导培养基继续培养，培养2天后用增强型诱导培养基进行2/3量换液，培养5天后再用增强型诱导培养基进行半量换液，第7天获得未成熟树突状细胞，对其进行表型检测，进行实验或冻存。本发明用鸡血清代替了牛血清，避免异种血清对于鸡细胞的有害刺激；用诱导培养基和增强型培养基分两个阶段对单个核细胞进行诱导培养，增强型培养基中添加了水解乳蛋白和鸡胚尿囊液，不仅满足了后期细胞增殖对于营养的要求，同时也促进了细胞的增殖和分化。
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公开(公告)号：CN113616785A
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN202110743194.4
申请日：2021-07-01
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: A61K39/235 , A61P31/20 , A61P1/16 , C12N15/62 , C12N15/70
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种同时表达FAdV‑4纤突蛋白1与纤突蛋白2基因的DNA疫苗及其构建方法和应用。本发明设计特异性引物，利用重叠PCR扩增技术，将FAdV‑4的纤突蛋白1与纤突蛋白2基因通过2A肽基因连接形成融合基因fibers2A，然后将融合基因fibers2A插入pCDNA3.1真核表达载体，构建重组质粒pC‑fibers2A，将重组质粒pC‑fibers2A转化至大肠杆菌DH5α，扩大培养后提取重组质粒即为DNA疫苗。将该重组质粒用于免疫试验，结果表明该DNA疫苗可以免疫SPF鸡产生抗体，减小发病率和死亡率，提高免疫预防效果。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108676078A
公开(公告)日：2018-10-19
申请号：CN201810499820.8
申请日：2018-05-23
Applicant: 江苏省农业科学院
CPC classification number: C07K14/005 , A61K39/12 , A61K2039/552 , A61P31/14 , C12N2770/24122 , C12N2770/24134 , C12Q1/686 , C12Q1/701 , G01N33/56983 , G01N2333/185
Abstract: 本发明公开了引起坦布苏病毒抗体依赖增强作用的抗原的应用。所述的引起坦布苏病毒抗体依赖增强作用的抗原，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述的引起坦布苏病毒抗体依赖增强作用的抗原在制备坦布苏病毒疫苗中的应用。本发明用大肠杆菌表达的上述表位蛋白免疫雏鸭，可在雏鸭体内诱导产生高水平特异性抗体，该抗体可促进病毒增殖，提高病毒在雏鸭体内的滴度。在未来坦布苏病毒疫苗研发中，可通过分子设计去除该类抗原，避免疫苗引起抗体依赖增强作用，保证保护效果，因此，鉴定引起坦布苏病毒抗体依赖增强作用的抗原对研制有效、安全的疫苗和防控坦布苏病毒的流行具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN115894638B
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202210987699.X
申请日：2022-08-17
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C07K14/18 , C12N15/40 , C12N15/81 , C12N1/19 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/532 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种重组鸭坦布苏病毒E蛋白结构域III蛋白的制备方法。本发明首先提供一株用于制备鸭坦布苏病毒E蛋白结构域III的毕赤酵母GS115菌株。该重组菌株是通过截取鸭坦布苏病毒囊膜蛋白EDIII抗原区域，经密码子优化获得鸭坦布苏病毒EDIII蛋白的编码序列，然后将其克隆到酵母表达载体pPIC9K上并转化到酵母宿主菌株GS115中。在甲醇的作用下，鸭坦布苏病毒EDIII蛋白获得高效表达。同时，将该蛋白作为包被抗原用于鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA诊断试剂盒，试剂盒具有较高的特异性、重复性及稳定性，可用于坦布苏病毒引起的相关疾病的诊断。
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公开(公告)号：CN116891913A
公开(公告)日：2023-10-17
申请号：CN202311104039.3
申请日：2023-08-30
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种基于RT‑RPA和CRISPR/Cas12a的坦布苏病毒核酸检测组合物、试剂盒及检测方法，所述坦布苏病毒核酸检测组合物包括RT‑RPA恒温扩增体系和CRISPR/Cas12a检测体系；所述RT‑RPA恒温扩增体系包括针对坦布苏病毒的RT‑RPA扩增引物；所述CRISPR/Cas12a检测体系包括靶向坦布苏病毒的特异性CrRNA、CRISPR/Cas12a蛋白和检测探针。本发明首次基于RT‑RPA和CRISPR/Cas12a系统检测坦布苏病毒核酸，具有特异性强、灵敏度高、简单快速、不依赖复杂大型仪器等优点，利于基层普及应用。
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公开(公告)号：CN108676078B
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN201810499820.8
申请日：2018-05-23
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明公开了引起坦布苏病毒抗体依赖增强作用的抗原的应用。所述的引起坦布苏病毒抗体依赖增强作用的抗原，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述的引起坦布苏病毒抗体依赖增强作用的抗原在制备坦布苏病毒疫苗中的应用。本发明用大肠杆菌表达的上述表位蛋白免疫雏鸭，可在雏鸭体内诱导产生高水平特异性抗体，该抗体可促进病毒增殖，提高病毒在雏鸭体内的滴度。在未来坦布苏病毒疫苗研发中，可通过分子设计去除该类抗原，避免疫苗引起抗体依赖增强作用，保证保护效果，因此，鉴定引起坦布苏病毒抗体依赖增强作用的抗原对研制有效、安全的疫苗和防控坦布苏病毒的流行具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN110386965A
公开(公告)日：2019-10-29
申请号：CN201810350513.3
申请日：2018-04-18
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种坦布苏病毒E蛋白B细胞表位及其编码基因和应用。一种坦布苏病毒E蛋白B细胞表位，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述的坦布苏病毒E蛋白B细胞表位在制备坦布苏病毒疫苗中的应用。本发明用大肠杆菌表达的上述表位蛋白免疫雏鸭，可在雏鸭体内诱导产生高水平特异性抗体，该抗体对坦布苏病毒具有中和作用，并保护宿主免受病毒攻击。B细胞表位具有良好的抗原性，为非全病毒抗原，安全性好，不含无关杂蛋白。此外，还可与其他类型的表位共同构建新型多表位疫苗。因此，B细胞表位具有良好和广阔的应用前景。
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