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公开(公告)号：CN118207213A
公开(公告)日：2024-06-18
申请号：CN202410536537.3
申请日：2024-04-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用内源启动子表达胶原蛋白的重组菌及其应用，属于分子生物学领域。本发明在内源启动子Cgl1342的基础上，对序列进行翻译起始速率的预测，通过截短启动子序列中的5’UTR区域，构建得到翻译起始速率更高的启动子P117，并以启动子P117构建谷氨酸棒杆菌重组菌，进一步提高了胶原蛋白表达量。本发明构建得到的携带启动子P117的重组谷氨酸棒杆菌胶原蛋白产量达到118mg/L，产量较携带内源启动子Cgl1342的重组谷氨酸棒杆菌提高了55.3％。
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公开(公告)号：CN117186210A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202311135222.X
申请日：2023-09-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了胶原域、胶原蛋白、重组胶原蛋白表达菌及应用，属于基因工程领域。本发明对人源胶原蛋白进行稳定性预测和序列设计，获得与天然人员胶原蛋白同源性高的胶原蛋白结构域，并在大肠杆菌中直接表达出带有三股螺旋结构的重组人源胶原蛋白。本发明设计的高热稳定性胶原蛋白片段均能正确折叠形成三股螺旋结构，而低热稳定性片段无法正确折叠，且设计的高热稳定性重组人源I型胶原蛋白可以自组装形成类似于天然I型胶原的周期性明暗条纹。本发明的胶原域、胶原蛋白还能够用于对有结构功能的仿生重组胶原蛋白的生物医学和组织工程领域，可用于组织培养、牙组织修复等。
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公开(公告)号：CN111704663B
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN202010610348.8
申请日：2020-06-29
Applicant: 江南大学
IPC: C07K14/78 , C07K19/00 , C12N15/12 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , C08J3/075 , C12R1/19 , C08L89/00
Abstract: 本发明公开了一种胶原蛋白水凝胶的制备方法，属于基因工程技术领域。本发明以N和C端E3和K3异源α‑螺旋为基础，在中间插入连续的Gly‑Xaa‑Yaa三联体的胶原蛋白序列，形成三段式的嵌合胶原蛋白E3‑collagen‑K3模式。通过N和C端的E3和K3异源α‑螺旋的相互作用驱动自组装，形成首尾相连的网状疏松多孔的胶原蛋白水凝胶。本发明的方法可制备得到清洁来源的胶原蛋白，其能自发组装形成胶原蛋白水凝胶，制备工艺简单，能够大规模生产成本低的胶原蛋白水凝胶，在生物材料领域有着广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN111073876B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN202010058127.4
申请日：2020-01-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了热稳定性提高的枯草芽孢杆菌脂肪酶A，属于酶工程技术领域。本发明对现有的枯草芽孢杆菌脂肪酶A进行改造，基于结构分析和定点突变，利用多重计算设计策略，有效提高枯草芽孢杆菌脂肪酶A的热稳定性，如六位点突变体F17A/V74I/L114P/I135V/M137A/I157L的解折叠温度升高了7.43℃，T50升高了8.4℃，t1/2升高了18.2min；四位点突变体F17A/L114P/M137A/I157L的解折叠温度升高了7.30℃，T50升高了5.9℃，t1/2升高了14.8min。
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公开(公告)号：CN112521491A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011491036.6
申请日：2020-12-17
Applicant: 江南大学 , 江苏省血吸虫病防治研究所
Abstract: 本发明涉及一种用于制备水凝胶的胶原蛋白及其制备方法，设计了含有生物活性结构GFPGER区域的胶原蛋白序列，并在胶原蛋白序列的若干位点引入具有氧化交联特性的半胱氨酸，通过大肠杆菌异源表达获得四种纯度较高的含半胱氨酸胶原蛋白。采用双氧水为交联剂对胶原蛋白进行交联制备得到水凝胶。本发明制备得到的胶原蛋白具有较好的温敏性，在氧化环境中能够形成稳定的水凝胶构筑，并对细胞无毒性，为药物控释载体的应用提供了较好的基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105671025A
公开(公告)日：2016-06-15
申请号：CN201610123619.0
申请日：2016-03-04
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/485
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体地，一种D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶dacB基因及应用。本发明提供了一种来源于大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)的D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶dacB，其氨基酸序列如序列1所示，且本发明提供了编码上述dacB的编码基因dacB。本发明的D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶能够从肽聚糖五肽上移除最后一个末端D-丙氨酸(D-Ala)，导致转肽反应中供体不可用，从而控制肽聚糖的网状交联水平，可以提高E.coli蛋白胞外分泌水平。
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公开(公告)号：CN118359702A
公开(公告)日：2024-07-19
申请号：CN202410562809.7
申请日：2024-05-08
Applicant: 江南大学
IPC: C07K14/78 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/12 , C07K1/34 , C12N15/70 , C12N1/21 , C08J3/075 , C08L89/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种成胶性能提高的胶原蛋白及其应用，属于基因工程技术领域。本发明通过对胶原蛋白的序列进行改进，通过序列设计将序列中的细菌胶原蛋白替换为人源II型胶原蛋白，并筛选得到性能更好的α螺旋序列，进一步提高了重组胶原蛋白的产量、可溶性、成胶性能和生物相容性，并提高重组胶原蛋白水凝胶的机械强度。
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公开(公告)号：CN114480409B
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202210178585.0
申请日：2022-02-25
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/77 , C12N1/21 , C07K14/78 , C07K19/00 , C12P21/02 , A61K8/65 , A61L27/24 , A61Q19/00 , C12R1/15
Abstract: 本发明公开了一种信号肽及促进胶原蛋白在谷氨酸棒杆菌中分泌表达的方法，属于基因工程技术领域。本发明提供了编码胶原蛋白的核苷酸序列，并搭建了谷氨酸棒杆菌分泌表达具有三股螺旋结构的重组胶原蛋白的平台，并通过引入6种不同信号肽(CspB、PorB、Cg1514、CgR0949、Cg2052或TorA)构建重组表达载体，及通过对培养基、起始诱导菌浓、诱导时长、IPTG浓度、溶氧等条件的优化，使胶原蛋白的产量达75mg/L，胶原域产量约30mg/L。本研究为重组胶原蛋白在谷氨酸棒杆菌中的高效分泌表达奠定了基础。
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公开(公告)号：CN114480409A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202210178585.0
申请日：2022-02-25
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/77 , C12N1/21 , C07K14/78 , C07K19/00 , C12P21/02 , A61K8/65 , A61L27/24 , A61Q19/00 , C12R1/15
Abstract: 本发明公开了一种信号肽及促进胶原蛋白在谷氨酸棒杆菌中分泌表达的方法，属于基因工程技术领域。本发明提供了编码胶原蛋白的核苷酸序列，并搭建了谷氨酸棒杆菌分泌表达具有三股螺旋结构的重组胶原蛋白的平台，并通过引入6种不同信号肽(CspB、PorB、Cg1514、CgR0949、Cg2052或TorA)构建重组表达载体，及通过对培养基、起始诱导菌浓、诱导时长、IPTG浓度、溶氧等条件的优化，使胶原蛋白的产量达75mg/L，胶原域产量约30mg/L。本研究为重组胶原蛋白在谷氨酸棒杆菌中的高效分泌表达奠定了基础。
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公开(公告)号：CN111499729B
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202010325899.X
申请日：2020-04-23
Abstract: 本发明公开了一种调控类I型胶原蛋白纤维条纹周期长度的方法，属于基因工程技术领域。本发明以N和C端(PPG)n序列为基础，在中间插入连续的具有不同数量Gly‑Xaa‑Yaa三联体的胶原蛋白序列，形成三段式的嵌合胶原蛋白P‑CL‑P模式，通过N和C端的(PPG)n三股螺旋间的相互作用驱动自组装，形成具有不同暗条纹长度的周期性明暗相间条纹的带状纤维。本发明的方法制备工艺简单，能够大规模生产成本低的胶原蛋白纤维，在生物材料领域有着广阔的应用前景。
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