利用实时荧光定量PCR法检测绵羊多胎基因FecB多态性的方法

    公开(公告)号:CN116179659A

    公开(公告)日:2023-05-30

    申请号:CN202310399053.4

    申请日:2023-04-14

    Abstract: 本发明公开了利用实时荧光定量PCR法检测绵羊多胎基因FecB多态性的方法。所述方法包括以待检测绵羊的基因组DNA为模板,使用PCR引物对进行实时荧光定量PCR扩增,根据所述实时荧光定量PCR的熔解曲线的熔解温度检测绵羊基因组中FecB基因SNP位点的基因型或多态性;所述SNP位点是绵羊基因组中对应序列表中序列1的第746位核苷酸,其为A或G。实验证明,熔解温度为79.9℃和/或79.2℃,对应的SNP位点基因型为GG和/或AG的绵羊为具有或候选具有多胎性状绵羊;否则为不具有多胎性状绵羊。本发明的方法可为绵羊早期选种、分子育种提供了一种效率高、操作简便的检测方法,具有广发应用价值。

    获取miRNA候选靶基因的方法及其专用反转录引物

    公开(公告)号:CN103194441B

    公开(公告)日:2014-08-27

    申请号:CN201310134586.6

    申请日:2013-04-17

    Abstract: 本发明公开了获取miRNA的候选靶基因的方法及其专用反转录引物。该方法包括:1)以带茎环结构和目的miRNA种子序列的DNA为反转录引物,获取与目的miRNA种子序列互补的mRNA对应的cDNA第一条链,得到A库;2)以带特异接头和14-20个脱氧胸腺嘧啶核苷酸的DNA为反转录引物,获取真核生物目的组织的mRNA对应的cDNA第一条链,得到B库;所述反转录引物B的结构是特异接头-T14-20;3)将所述A库和所述B库合成双链cDNA后进行杂交得到杂交DNA分子,扩增所述杂交DNA分子上所述目的miRNA种子序列和所述特异接头之间的DNA片段,根据所述扩增产物得到目的miRNA的候选靶基因。

    砸碰锤
    16.
    发明授权

    公开(公告)号:CN103740580B

    公开(公告)日:2015-11-18

    申请号:CN201310060725.5

    申请日:2013-02-26

    Abstract: 本发明公开了一种砸碰锤。该砸碰锤是分子生物学实验中使用的一种震荡装置,由锤体和与所述锤体固定连接的手柄组成,所述锤体由一可开关的密闭盒体和与所述密闭盒体一端固定连接的弹性部件组成。所述密闭盒体可由相互配合的盖体和杯体组成。所述弹性部件可为橡胶块。使用本发明所提供的砸碰锤在距离桌面高30cm处向下敲击5-6次,细菌沉淀即可全部悬浮;在脂肪RNA提取实验的脂肪样品均质化和相分离两个步骤中使用本发明所提供的砸碰锤,最终提取的总RNA量为10.5ug/100mg样品。本发明的砸碰锤对目标物质的分散效果明显,且操作简便,具有广阔的应用前景。

    一种单细胞克隆培养方法
    17.
    发明公开

    公开(公告)号:CN103923876A

    公开(公告)日:2014-07-16

    申请号:CN201410166605.8

    申请日:2014-04-23

    Abstract: 本发明公开了一种单细胞克隆培养方法,包括:步骤1,制备培养液微滴;步骤2,准备显微操作系统;步骤3,筛选单克隆细胞;步骤4,利用步骤2所述的显微操作系统将操作针内的目标细胞以每个液滴放一枚细胞逐一放入步骤1的培养液微滴内,然后进行细胞培养;步骤5,将步骤4培养的细胞在培养2天后进行半量换液;步骤6,扩大培养,获得单细胞克隆。利用本发明的方法,培养液微滴之间的石蜡油隔绝了微滴之间的接触,保证了细胞克隆的单一性;同时由于培养液微滴的体积为5μl以下,所培养细胞分泌的生物因子不被过度稀释,为细胞的生长提供了一个很好的微环境。

    获取miRNA候选靶基因的方法及其专用反转录引物

    公开(公告)号:CN103194441A

    公开(公告)日:2013-07-10

    申请号:CN201310134586.6

    申请日:2013-04-17

    Abstract: 本发明公开了获取miRNA的候选靶基因的方法及其专用反转录引物。该方法包括:1)以带茎环结构和目的miRNA种子序列的DNA为反转录引物,获取与目的miRNA种子序列互补的mRNA对应的cDNA第一条链,得到A库;2)以带特异接头和14-20个脱氧胸腺嘧啶核苷酸的DNA为反转录引物,获取真核生物目的组织的mRNA对应的cDNA第一条链,得到B库;所述反转录引物B的结构是特异接头-T14-20;3)将所述A库和所述B库合成双链cDNA后进行杂交得到杂交DNA分子,扩增所述杂交DNA分子上所述目的miRNA种子序列和所述特异接头之间的DNA片段,根据所述扩增产物得到目的miRNA的候选靶基因。

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