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公开(公告)号：CN106520809A
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201610889152.0
申请日：2016-10-12
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N15/70 , C07K14/005 , C07K2319/00 , C12N2750/10022 , C12N2800/101
Abstract: 一种GyV3新型环形病毒VP3融合蛋白的制备方法，涉及GyV3新型环形病毒的诊断用融合蛋白的制备技术领域。本发明设计了扩增出pGEX-6p-1线性化载体以及GyV3病毒VP3基因片段的两对引物，利用商品化的重组酶ExnaseTM II，不经酶切连接反应，直接在体外快速重组取得阳性克隆体，并转化BL21细菌，经IPTG诱导下即获得GyV3新型环形病毒VP3融合蛋白。本发明简化了克隆过程，实现VP3基因快速克隆表达。
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公开(公告)号：CN106443015A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610837860.X
申请日：2016-09-21
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/535
CPC classification number: G01N33/6857 , G01N33/535 , G01N33/56983 , G01N2333/075
Abstract: 本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种基于hexon蛋白N端保守区的检测禽腺病毒抗体的间接ELISA试剂盒。该试剂盒包括包被有hexon蛋白N端保守区表达产物的ELISA酶标板，HRP标记的兔抗鸡抗体，样品稀释液，洗涤液；所述的hexon蛋白N端保守区序列如SEQ ID NO.5所示。本发明建立的禽腺病毒抗体的间接ELISA试剂盒能特异性的检测出抗禽腺病毒抗体，而不能检测出抗其它病原的抗体。因此，该试剂盒具有良好禽腺病毒的特异性，能用于禽腺病毒感染状况流行病学调查。
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公开(公告)号：CN117825704A
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202410020201.1
申请日：2024-01-07
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/535 , C07K14/075 , C12N15/70 , C12N5/20 , C12N15/34 , C07K16/08
Abstract: 本发明涉及一种基于Fiber‑2蛋白和抗Fiber‑2蛋白单克隆抗体的检测鸭3型腺病毒抗体的竞争ELISA方法，首次使用单克隆抗体进行鸭3型腺病毒抗体的检测，与间接ELISA技术相比，本发明的特异性高，能够有效提高检测的准确性，且不依赖于商品化的酶标二抗，可以应用于不同物种（鸡、鸭和鹅）血清中鸭3型腺病毒抗体检测，是一种简便、快速、稳定、特异的检测鸭3型腺病毒抗体的ELISA方法。使用本发明只需采集鸭群的血清，即可快速准确地检测血清中是否含有鸭3型腺病毒抗体，本发明适合应用于基层鸭群的大批量检测。本发明为鸭3型腺病毒的感染检测以及免疫效果监测提供了技术支持，具有一定的市场应用价值。
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公开(公告)号：CN108752434B
公开(公告)日：2020-07-21
申请号：CN201810724849.1
申请日：2018-07-04
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/075 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种抗原多肽，属于生物技术检测技术领域。本发明提供的抗原多肽能够检测血清中的非结构蛋白22K抗体，进而能够检测FAdV‑4病毒感染，而且能够区别自然感染以及灭活疫苗免疫鸡群。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109957575A
公开(公告)日：2019-07-02
申请号：CN201910278888.8
申请日：2019-04-09
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种山羊痘病毒p32可溶性蛋白的制备方法，利用双酶切获得pGEX‑6p‑1线性化载体以及通过设计扩增山羊痘病毒p32基因片段的引物，利用T4连接酶连接，直接在体外快速重组，获得重组质粒pGEX‑6p‑1‑P32，并将其转化至大肠杆菌BL21中，经IPTG诱导表达、实现山羊痘病毒的p32蛋白与GST的融合可溶性表达，并获得纯化的可溶性蛋白GST‑P32；本发明设计的引物及基于T4连接酶的克隆策略，可快速构建山羊痘病毒p32基因的原核可溶性表达载体。本发明获得的山羊痘病毒p32可溶性表达及纯化的蛋白，可直接提供p32可溶性蛋白作为山羊痘病毒诊断抗原；作为免疫原获得抗p32蛋白多克隆抗体；为开展山羊痘病毒流行病学调查提供有效诊断试剂；并为进一步探究p32蛋白的生物学功能具有重要意义。
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公开(公告)号：CN108752434A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810724849.1
申请日：2018-07-04
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/075 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种抗原多肽，属于生物技术检测技术领域。本发明提供的抗原多肽能够检测血清中的非结构蛋白22K抗体，进而能够检测FAdV‑4病毒感染，而且能够区别自然感染以及灭活疫苗免疫鸡群。
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公开(公告)号：CN108414750A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810063994.X
申请日：2018-01-23
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/531 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供了一种血清4型禽腺病毒双单抗夹心ELISA抗原检测试剂盒，其中包括：包被抗FAdV-4纤突蛋白蛋白单克隆抗体（捕获抗原的抗体）的酶标板、酶标记抗FAdV-4纤突蛋白单克隆抗体（检测抗体）。捕获抗体和检测抗体分别针对FAdV-4纤突蛋白2种不同的抗原决定簇：包被在酶标板的抗FAdV-4纤突蛋白单克隆抗体和酶标记抗FAdV-4纤突蛋白单克隆抗体。本发明试剂盒操作简便、快速，能特异性检测出4型禽腺病毒，而与流感病毒（AIV）、马立克病毒（MDV）、血清8型禽腺病毒（FAdV-8）、禽网状内皮组织增生症病毒（REV）、禽白血病病毒（ALV）、传染性法氏囊病毒（IBDV）以及SPF鸡肝组织研磨液等均不反应。该方法所需成本低廉，经济效益显著、应用前景广泛。
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公开(公告)号：CN119019516A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202411439106.1
申请日：2024-10-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C12N15/50 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种用于鸡传染性支气管炎病毒抗体检测试剂盒的抗原及其间接ELISA检测试剂盒和应用，所述抗原为经过纯化的鸡传染性支气管炎病毒核蛋白的重组N蛋白，所述重组蛋白的编码基因如SEQ ID NO.1所示；所述间接ELISA检测试剂盒含有经过纯化的鸡传染性支气管炎病毒重组N蛋白的酶标板。本发明建立的检测传染性支气管炎病毒抗体的ELISA试剂盒与进口的IDEXX试剂盒符合率为91.3％。本试剂盒具有成本低廉、使用简单方便、敏感性高且特异性强的优点，且与不同血清型的IBV均有良好的反应性，具有一定的市场应用前景与价值。
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公开(公告)号：CN118638783A
公开(公告)日：2024-09-13
申请号：CN202410709230.9
申请日：2024-06-03
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种敲除14‑3‑3ε基因的LMH细胞系及其构建方法和应用，包括如下步骤：设计特异性靶向鸡源14‑3‑3ε基因的sgRNA；构建含有Cas9蛋白基因和特异性靶向鸡源14‑3‑3ε基因的sgRNA的敲除质粒；将构建的敲除质粒对LMH细胞进行转染，筛选培养后获得14‑3‑3ε基因敲除的LMH细胞系。本发明通过CRISPR/Cas9基因编辑，成功获得鸡源14‑3‑3ε基因敲除LMH细胞系，发现该细胞系能够有效促进血清4型禽腺病毒的感染复制，该细胞系生长活性与正常LMH细胞无明显差异。本发明为探究鸡源14‑3‑3ε生物学功能以及解析14‑3‑3ε在FAdV‑4的感染复制中的作用打下了基础。
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