一种基因免疫方法
    11.
    发明公开

    公开(公告)号:CN101279097A

    公开(公告)日:2008-10-08

    申请号:CN200810123602.0

    申请日:2008-05-22

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种基因免疫方法。所说的方法是以常规方法克隆目标基因cDNA,然后构建含目标抗原cDNA的真核表达载体重组质粒,以转座酶质粒作为免疫佐剂;将真核表达载体重组质粒和转座酶质粒按4∶1混匀,然后用基因包裹剂PEI按PEI∶质粒=2∶1包裹,按每克体重注射1微克质粒的剂量为进行动物免疫。该方法能显著促进抗体效价的提高,建立了一种简单、经济、实用、高效的抗体制备方法,可以进行多种商业化抗体的生产。

    一种Buster转座子系统及其应用
    12.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118879694A

    公开(公告)日:2024-11-01

    申请号:CN202410752509.5

    申请日:2024-06-12

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种Buster转座子系统及其应用,所述系统包括AnBT、CrBT、HvBT、LcBT和LlBT转座子以及相应的转座酶,AnBT、CrBT、HvBT、LcBT和LlBT转座子的核苷酸序列分别如SEQ ID No.1~5所示,转座酶为野生型或者增强型。本发明通过分子重构获得AnBT、CrBT、HvBT、LcBT和LlBT转座子的靶位点重复序列(TSD)和末端反向重复序列(TIR)等关键元件以及相应的转座酶序列,并构建一套基因转移载体系统,经细胞验证,此AnBT、CrBT、HvBT、LcBT和LlBT载体系统能够有效介导基因转移,在转基因动物制备和基因治疗中具有很大应用潜力。

    一个与猪背膘厚关联的ZNF2基因内SINE转座子多态分子标记及其检测方法

    公开(公告)号:CN111705144B

    公开(公告)日:2022-11-18

    申请号:CN202010690558.2

    申请日:2020-07-17

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于动物遗传育种领域和分子标记选育领域,具体涉及一个与猪背膘厚关联的ZNF2基因内的SINE转座子多态分子标记及其检测方法,含有该分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其来自ZNF2基因,SEQ ID NO:1序列的251到564位点存在一个正向SINE转座子的插入多态。本发明的ZNF2基因内的SINE转座子多态分子标记可用于猪个体的选育(背膘厚性状),也可在配种时提供分子依据。该新的分子标记将有力的辅助背膘厚性状的选育,加快育种进度,减少育种成本,提高经济效益。本发明的ZNF2基因内SINE转座子插入多态为筛选猪的背膘厚提供了一个新的分子标记。

    一种利用猪TLR6基因ERV插入多态提高仔猪天然免疫力的分子标记及其育种方法

    公开(公告)号:CN112522424A

    公开(公告)日:2021-03-19

    申请号:CN202011502063.9

    申请日:2020-12-18

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供一种利用猪TLR6基因ERV插入多态提高仔猪天然免疫力的分子标记及其育种方法,涉及分子遗传学领域。192bp的ERV插入后TLR6基因的启动子活性显著升高,且天然免疫相关的TLR信号通路中的TLR6、TLR1、下游的MyD88,Rac1,TOLLip,TIRAP及细胞因子IL‑6,IL‑8和TNFα基因在30日龄仔猪重要免疫器官中的表达及血液中IL‑6和TNFα因子水平升高。可见通过检测猪TLR6基因的192bpERV插入多态可以作为提高仔猪天然免疫力的分子标记,不仅方法简便快速,而且不受环境影响,可实现早期选种选配。

    一种与猪生长速度关联的SINE转座子多态分子标记及其检测方法和应用

    公开(公告)号:CN112094923A

    公开(公告)日:2020-12-18

    申请号:CN202011057170.5

    申请日:2020-09-30

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于动物遗传育种领域和分子标记选育领域,公开了一个与猪生长速度关联的LEPROT基因内的SINE转座子多态分子标记检测方法及应用。本发明的方法是检测待测猪的LEPROT基因的第一内含子区是否存在一个276bp的SINE转座子反向插入多态标记,该分子标记显著影响猪的100kg体重日龄的性状。本发明还提供了一种用于鉴定该分子标记位点的引物对,利用该分子标记和引物对可建立高效准确的分子标记辅助育种技术,将其应用于种猪生长速度性状遗传改良中,可以提高生产效益。

    一种基于猪ERV 转座子插入多态性研发新型分子标记的方法

    公开(公告)号:CN107523634A

    公开(公告)日:2017-12-29

    申请号:CN201710928987.7

    申请日:2017-10-09

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及分子生物学和生物信息学领域,具体涉及一种基于猪ERV转座子插入多态性研发新型分子标记的方法。该方法是利用ERV的LTR序列作为查询序列,在猪公开的基因组寻找插入位点;每个插入位点分别向上游和下游延伸300-500个核苷酸序列,下载每条序列;将获得的序列去除冗余并进行多序列比对,每条插入位点序列保留300-500个ERV插入位点侧翼区核苷酸序列和LTR序列;再根据获得的序列信息设计检测引物,作为待验证分子标记引物;利用所得的待验证分子标记引物PCR扩增不同品种,或同一品种不同个体基因组样品,选取能清晰扩出条带且有多态性的引物组合,获得分子标记。本发明可以为猪的品系鉴定,育种中的标记辅助选择提供有用的分子标记。

    一种肌肉特异表达猪IGF1基因的过表达载体

    公开(公告)号:CN102978202A

    公开(公告)日:2013-03-20

    申请号:CN201210383179.4

    申请日:2012-10-10

    Abstract: 本发明为一种猪骨骼肌中特异过表达猪内源IGF1(C1:Ea)基因的安全型表达载体。该载体包含猪内源性序列sk-α-actinPromoter/IGF1(C1:Ea)/sk-α-actin3’UTR/SV40增强子串联组成的表达盒。本发明的表达载体在细胞水平上验证了骨骼肌特异sk-α-actin启动子在成肌细胞中能高效表达,在具有成肌分化潜能的PEF细胞中仅低水平表达而在其他类型细胞中不表达。本发明中构建的载体制备转基因小鼠,通过定量PCR和WesternBlot检测出转基因小鼠骨骼肌中IGF1基因的mRNA和蛋白表达水平分别为野生型小鼠的15倍和3.5倍,并且仅在骨骼肌中高效表达。

    一种基因免疫方法
    19.
    发明授权

    公开(公告)号:CN101279097B

    公开(公告)日:2010-08-18

    申请号:CN200810123602.0

    申请日:2008-05-22

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种基因免疫方法。所说的方法是以常规方法克隆目标基因cDNA,然后构建含目标抗原cDNA的真核表达载体重组质粒,以转座酶质粒作为免疫佐剂;将真核表达载体重组质粒和转座酶质粒按4∶1混匀,然后用基因包裹剂PEI按PEI∶质粒=2∶1包裹,按每克体重注射1微克质粒的剂量为进行动物免疫。该方法能显著促进抗体效价的提高,建立了一种简单、经济、实用、高效的抗体制备方法,可以进行多种商业化抗体的生产。

    猪精囊腺生物反应器及利用其生产重组蛋白或多肽的方法

    公开(公告)号:CN101294166A

    公开(公告)日:2008-10-29

    申请号:CN200710134099.4

    申请日:2007-10-29

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种猪精囊腺生物反应器及利用其生产重组蛋白或多肽的方法,在公猪精囊腺中特异表达的基因表达载体,该表达载体含启动子、信号肽和多聚腺苷酸化信号的DNA序列等调控元件,当该表达载体通过转基因技术整合入猪基因组中后,重组蛋白或多肽能在转基因成年公猪精囊腺组织中特异表达,并分泌至精液中。本发明的特点是所生产的重组蛋白或多肽可以从精液中直接收获,方法先进简单,成本低。与其它动物相比,在维持成本、生产周期等方面具有明显优势。

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