通过改造糖多孢红霉菌SACE_1558基因提高红霉素产量的方法及应用

    公开(公告)号:CN114457101A

    公开(公告)日:2022-05-10

    申请号:CN202210033346.6

    申请日:2022-01-12

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 本发明提供了一种通过改造糖多孢红霉菌SACE_1558基因提高红霉素产量的方法,其通过基因工程方法使糖多孢红霉菌中SACE_1558‑L1257基因过表达,继而获得红霉素高产工程菌株,利用所得的红霉素高产工程菌株发酵生产红霉素即可;其中,SACE_1558‑L1257的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,包括SEQ ID NO.2的SACE_1558基因及上游930位基因。本发明还提供了上述方法的应用。本发明的优点在于:用所获得的红霉素高产工程菌株发酵生产红霉素,可以大幅度提高产量,为工业生产提高红霉素产量提供新的技术支持。

    一种用于林可链霉基因工程菌的种子培养基及培养发酵生产林可霉素的方法

    公开(公告)号:CN114317390A

    公开(公告)日:2022-04-12

    申请号:CN202111596469.2

    申请日:2021-12-24

    Abstract: 本发明公开了一种用于林可链霉基因工程菌的种子培养基及培养发酵生产林可霉素的方法。该种子培养基,按质量浓度,原料包括:玉米浆30~40g/L、黄豆饼粉10~15g/L、淀粉15~25g/L、葡萄糖5~15g/L、硫酸铵1~3g/L、碳酸钙3~5g/L,水余量。本发明从优化培养基种子质量着手,建立适配于林可霉素基因工程菌种子培养基,解决了现有的发酵工艺与基因工程改造的新菌种之间存在的匹配性较低的问题,本发明优化后的种子液进行发酵,在摇瓶水平林可霉素的产量为3.862g/L,比原始培养基(3.009g/L)发酵生产林可霉素产量提高了28%以上。本发明利用优化后的种子液进行发酵,在15L发酵罐水平林可霉素的最高产量为6.56g/L,比原始培养基(5.17g/L)发酵生产林可霉素产量提高了25%以上。

    一种SACE_1409基因被改造的糖多孢红霉菌及其应用

    公开(公告)号:CN112458136A

    公开(公告)日:2021-03-09

    申请号:CN202011452772.0

    申请日:2020-12-11

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 本发明公开了一种SACE_1409基因被改造的糖多孢红霉菌及其应用,SACE_1409基因被改造的糖多孢红霉菌的构建方法包括以下步骤:S1,以1409‑P1、1409‑P2、1409‑P3和1409‑P4为引物,糖多孢红霉菌基因组为模板,扩增SACE_1409基因的上、下游各约1.5kb的同源片段;S2,将扩增后的SACE_1409上下游片段分别连接到pUCTSR载体上,构建质粒pUCTSRΔ1409,以此质粒为模板,通过扩增获得用于基因敲除的大片段tsr‑Δ1409;S3,将tsr‑Δ1409大片段转化到糖多孢红霉菌原生质体中,同源重组后,筛选SACE_1409基因被tsr替换的基因工程菌株,即SACE_1409基因被改造的糖多孢红霉菌。本发明克服了现有技术的不足,通过基因工程途径缺失糖多孢红霉菌染色体上SACE_1409基因,能够大幅度提高红霉素产量。

    一株重组细胞及其在制备抗人表皮生长因子受体治疗药物中的应用

    公开(公告)号:CN105505882B

    公开(公告)日:2019-07-19

    申请号:CN201610021187.2

    申请日:2016-01-11

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 本发明公开了一株重组细胞及其在制备抗人表皮生长因子受体治疗药物中的应用。本发明提供的重组细胞CHO‑K1‑EGFR‑7gRNA是将CHO‑K1‑EGFR细胞的基因组中序列表的序列6所示的DNA分子取代为序列表的序列7所示的DNA分子得到的重组细胞;CHO‑K1‑EGFR细胞的制备方法如下:将产品甲和产品乙共同导入CHO‑K1细胞;产品甲为如下(a)或(b):DNA分子甲;(b)含有DNA分子甲的重组表达载体甲;DNA分子甲为编码序列表的序列1所示的轻链L4的DNA分子;产品乙为如下(c)或(d):DNA分子乙;(b)含有DNA分子乙的重组表达载体乙;DNA分子乙为编码序列表的序列3所示的重链H3的DNA分子。本发明对于癌症的治疗具有重大的应用价值。

    一种通过糖多孢红霉菌SACE_5717基因提高红霉素产量的方法

    公开(公告)号:CN109321618A

    公开(公告)日:2019-02-12

    申请号:CN201811346513.2

    申请日:2018-11-13

    Abstract: 本发明提供了一种通过糖多孢红霉菌SACE_5717基因提高红霉素产量的方法,先通过基因工程途径在糖多孢红霉菌中失活SACE_5717基因,以获得糖多孢红霉菌红霉素高产菌株,再将获得的相应糖多孢红霉菌红霉素高产工程菌株用于发酵生产红霉素;其中,SACE_5717基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,核苷酸序列编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的优点在于:通过基因工程途径失活糖多孢红霉菌中SACE_5717基因,能够获得红霉素高产菌株,用所得的菌株发酵生产红霉素,可以提高红霉素产量,为工业生产提高红霉素产量提供新的技术支持。

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