一种竹子种胚培养的消毒方法

    公开(公告)号:CN101444188B

    公开(公告)日:2012-11-28

    申请号:CN200910116054.3

    申请日:2009-01-13

    Abstract: 一种竹子种胚培养的消毒方法,以竹子当年生健康种子为外植体,将剥壳后的籽粒于医用酒精中浸泡4~6min,然后再于0.1wt.%升汞溶液中搅拌25~35min或者0.2~0.3wt.%次氯酸钠溶液中搅拌10~20min,最后用医用酒精浸泡4~6min。本消毒方法简单,可有效去除表面细菌和内生细菌,为建立无菌体系、促进继代培养和生根奠定基础,为开发利用优良竹种提供技术特征。

    一种高通量农杆菌介导的玉米基因原位转化方法

    公开(公告)号:CN102533851A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201210021996.5

    申请日:2012-01-31

    Abstract: 本发明公开了一种高通量农杆菌介导的玉米基因原位转化方法,其主要步骤包括:1、含有外源目的基因的农杆菌转化液的培养;2、转化液添加表面活性剂SilwetL-77后用电动注射仪将该转化液注入到玉米雌穗最内层苞叶的空隙处,使其浸泡雌花序,然后进行授粉;3、将收获种子播种后,对玉米幼苗除草剂抗性筛选,对除草剂抗性植株进行PCR检测,获得转基因植株。本方法避免了组织培养过程中对外植体基因型要求严格的缺陷和植株再生的过程,缩短了玉米转基因周期,利用电动注射仪每人每天可完成6000-8000株玉米的转化,可获得大量的转化体,进行玉米转基因研究。

    玉米愈伤组织特异性启动子及其克隆方法与应用

    公开(公告)号:CN102094021A

    公开(公告)日:2011-06-15

    申请号:CN201010587043.6

    申请日:2010-12-14

    Abstract: 本发明公开了一种玉米愈伤组织特异性启动子及其克隆方法与应用。本发明利用生物信息学分析获得一个WRKY基因,通过与基因组进行序列比较,设计引物进行PCR获得该基因5′上有的启动子区域,该启动子长2880bp,具有序列表中 1项下的序列,通过对启动子的分析,其含有多个顺式作用元件,把该启动子亚克隆到含GUS基因载体,启动GUS基因表达,把载体转化到水稻中去,对水稻的各个组织进行染色检测,发现该启动子特异性的在愈伤组织中表达,该启动子在基因工程以及基因功能研究中具有重要的应用价值。

    用RNA干涉降低杨树木质素含量的方法

    公开(公告)号:CN101603052B

    公开(公告)日:2011-04-06

    申请号:CN200910032943.1

    申请日:2009-06-09

    Abstract: 本发明公开了一种生物技术领域的利用RNA干涉降低杨树中木质素的含量的方法。本发明从杨树中克隆CCR基因片段作为RNA干扰片段,以组成型启动子CaMV35S启动表达,构建含CCR基因正反片段的表达载体,用根癌农杆菌介导,将CCR基因的正反结构转入杨树中,通过抗性植株PCR检测和对转基因杨树进行木质素和综纤维素含量检测,转基因植株木质素含量较非转基因株木质素含量平均降低为9.7%,转基因植株中的综纤维素含量较非转基因株综纤维素含量平均提高3.17%,从而提供了一种降低杨树中木质素的含量的方法,为利用转基因杨树大规模提供造纸原料奠定了基础。

    大白菜几丁质酶CHB4基因及其克隆方法

    公开(公告)号:CN1974773A

    公开(公告)日:2007-06-06

    申请号:CN200610096152.1

    申请日:2006-09-22

    Abstract: 大白菜几丁质酶CHB4基因及其克隆方法,其特征是利用已知的十字花科植物几丁质酶基因序列,通过比较设计引物,从大白菜基因组DNA中克隆特异性DNA片段,以及5′端序列片段;利用水杨酸诱导并以酶活力最高的处理植株的叶片RNA为模板,通过RACE反应得到3′端序列片段,在大白菜几丁质酶基因片段已经克隆的基础上,重新设计引物通过PCR反应从基因组DNA中扩增出该几丁质酶CHB4基因的全长1517bp。本发明为更进一步利用生物工程技术将外源几丁质酶基因转入各种植物中,从而提高植物抗真菌能力,培育抗病品种提供基础。

    PagVQ13基因及其在抗杨树真菌感染中的应用

    公开(公告)号:CN117535301A

    公开(公告)日:2024-02-09

    申请号:CN202311274693.9

    申请日:2023-09-28

    Abstract: 本发明属于植物生物技术领域,尤其涉及一种VQ13基因及其在抗杨树真菌感染中的应用,本发明通过生物信息学分析,发现PtMAPK3‑1基因是杨树MAPK级联基因家族成员,MAP K3‑1基因在杨树的抗逆、抗病过程中扮演了重要的角色,通过蛋白互作数据库和表达模式分析预测了PagMAPK3‑1的互作蛋白PagVQ13,通过酵母双杂交和BiFC实验验证了pagMAPK 3‑1和VQ13的互作关系。本发明通过构建表达载体以及根癌农杆菌转基因过表达VQ13,过表达VQ13的杨树在S.musiva侵染后体内ROS积累,为病原真菌在植株体内的进一步侵染和繁殖提供了营养,本发明发现K8杨中的PagVQ13在杨树抗病反应中起着负调控作用。本发明为筛选抗病的杨树品种提供了一种分子标记,同时也为提高杨树的抗病能力提供了一种调控手段。

    一种基于Zmend1a基因调节水稻籽粒大小和淀粉含量的方法

    公开(公告)号:CN107058345A

    公开(公告)日:2017-08-18

    申请号:CN201710533248.8

    申请日:2017-07-03

    Abstract: 本发明公开了一种基于Zmend1a基因调节水稻籽粒大小和淀粉含量的方法,所述Zmend1a基因为核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的DNA分子,所述方法为:构建Zmend1a基因过量表达载体,并将过量表达载体导入目的水稻基因组中,得到籽粒直链淀粉含量以及直链淀粉/总淀粉比例均低于目的水稻的Zmend1a基因过量表达植株。该方法利用Zmend1a基因对植物籽粒淀粉合成相关基因的负调控作用,通过基因工程的方法改变水稻籽粒中直链淀粉含量和直链淀粉/总淀粉比例,获得具有高支链淀粉的转基因水稻新品种,对利用基因工程技术开发具有特定功能的转基因水稻新品种具有重要的实践意义。

    一种以柠檬提取液为防褐化培养基的蝴蝶兰防褐化组培方法

    公开(公告)号:CN104686324B

    公开(公告)日:2016-09-14

    申请号:CN201510064734.0

    申请日:2013-04-28

    Abstract: 本发明公开了一种以柠檬提取液为防褐化培养基的蝴蝶兰防褐化组培方法,所述培养基包括初代培养基和增殖分化培养基,所述初代培养基和增殖分化培养基分别含有一定量的天然柠檬提取液,本发明组培方法包括外植体消毒、初代培养和增殖分化培养,生根培养、炼苗和移栽等步骤。本发明使用了含有天然添加物的培养基对蝴蝶兰常见的褐化问题起到防治的作用,同时采用不同的切取方式辅助防治分化阶段的褐化问题,形成了一种复合防褐化的方法。本发明方法稳定性高,成功率大,绿色环保,可周年重复生产。解决现有方法中成功率不高且不环保的问题,具有极大的现实应用意义。

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