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公开(公告)号：CN112961941A
公开(公告)日：2021-06-15
申请号：CN202110281107.8
申请日：2021-03-16
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及PCV3病毒检测技术领域，且公开了一种基于MIRA荧光法快速检测PCV3病毒的引物和探针，包括四对引物和一个探针，四对引物和一个探针的基因序列具体如下：第一对引物：PCV3‑MIRA‑F1：5'‑GTACCAGATCGGATCTTCAAGCAGCAGCT‑3'；PCV3‑MIRA‑R1：5'‑GCAATTCATCAAATGGAACCCACCCATAA‑3'；本发明解决了聚合酶链式反应最后需要核酸胶电泳呈现结果，耗时较长，实时荧光定量PCR需要昂贵的热循环仪，对精密仪器依赖度高，需要专业的技术人员操作和判读结果，在基层和现场的检测应用受到很大限制，等温核酸技术中的LAMP方法需要多对引物，对靶基因的要求高，容易出现假阳性的问题。
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公开(公告)号：CN111663005A
公开(公告)日：2020-09-15
申请号：CN201910670449.1
申请日：2019-07-24
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明公开了一种用于检测猪细小病毒6型的荧光定量PCR方法，包括如下步骤：S1、制备特异性引物；根据GenBank PPV6的Cap基因序列，登录号：KU563733.1，应用Primer Premier5.0软件设计一对特异性引物如下：F：5’-GAAAAAGAACAGGCGCAGAC-3’，R：5’-GGGATTATGAAGCCAGACG-3’；S2、重组质粒标准品制备并提取DNA；取适量采集的淋巴结、脾、肺等组织加入含青霉素和链霉素各1000IU/ml的PBS匀浆用研钵充分碾磨；反复冻融3次，6000r/min离心10min，取上清液，置于-80℃冰箱待用；将制备好的样品按照DNA/RNA提取试剂盒使用说明书提取DNA；本发明提供一种能够快速、简便、灵敏地检测猪细小病毒6型的方法；本发明根据Cap基因设计特异性引物，建立了一种基于SYBR Green I的real-time荧光定量PCR检测方法。
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公开(公告)号：CN108902538A
公开(公告)日：2018-11-30
申请号：CN201811081897.X
申请日：2018-09-17
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明属于家禽养殖技术，具体涉及一种抗肉鸡应激的富硒中草药添加剂、制备方法及使用方法，本发明的富硒中草药添加剂由中草药提取物和磨成粉末的酵母硒片按照1000：1-1.5的质量比例混合而成；所述中草药提取物由如下重量份的中药原料制备而成：构树叶20-35份、青蒿10-20份、柴胡10-15份、小地松12-15份、银杏叶15-35份、刺五加5-8份、霍香6-12份、山楂8-15份。本发明的抗肉鸡应激的富硒中草药添加剂能够有效降低应激的不良影响，提高调节的免疫功能，改善肉鸡的消化吸收功能和生长性能，发挥了营养物质和药物的双重作用。
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公开(公告)号：CN107805628A
公开(公告)日：2018-03-16
申请号：CN201711015432.X
申请日：2017-10-26
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867
CPC classification number: C07K14/70503 , C12N15/86 , C12N2740/15043
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达小反刍兽疫病毒受体Nectin-4的细胞系及其构建方法，本发明采用合成的Nectin-4基因，利用慢病毒载体系统，构建重组质粒pLOV-eGFP-Nectin-4。将该重组质粒与pSPAX2和pMD2.G质粒共转染293T细胞，获得逆转录病毒样颗粒。将含有逆转录病毒样颗粒的细胞培养上清液感染MDBK细胞，利用嘌呤霉素筛选、纯化，获得了稳定表达Nectin-4蛋白的MDBK细胞，将其命名为MDBK-Nectin-4。该细胞系的建立为深入研究PPRV与受体Nectin-4的相互作用，以及临床快速分离PPRV提供了实验材料。
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