高效转化农作物秸秆的复合菌剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110358715A

    公开(公告)日:2019-10-22

    申请号:CN201910707779.3

    申请日:2019-08-01

    Inventor: 杨谦 林枞雨

    Abstract: 高效转化农作物秸秆的复合菌剂及其制备方法和应用,本发明属于生物农业技术领域,它要解决现有农作物秸秆资源化循环利用效率低、转化效果有待提高的问题。本发明高效转化农作物秸秆的复合菌剂由复合菌群和固定剂混合而成,所述的复合菌群按质量百分含量由37%~43%的灰略红链霉菌、27%~33%的黑曲霉和27%~33%的绿色木霉组成。应用是将复合菌剂溶于水中配置成复合菌液,复合菌液喷施在农作物秸秆表面进行转化。本发明所述的复合菌群在连续发酵过程中为满足自身的生长需要,通过产生纤维素酶和木质素酶转化农作物秸秆各组分生成葡萄糖和木糖等小分子还原糖。本发明所选用的复合菌群能够稳定的发挥其转化作用,效果优异。

    抗苯并咪唑类化学杀菌剂的木霉菌转化子的发酵工艺

    公开(公告)号:CN101906397A

    公开(公告)日:2010-12-08

    申请号:CN201010189030.3

    申请日:2010-06-02

    Abstract: 属于微生物农药技术领域。抗苯并咪唑类化学杀菌剂的木霉菌转化子的发酵工艺:以哈茨木霉转化子TS1为菌株;以筛选后的玉米秸粉、小麦麸皮为固体培养基,加水混合,高温高压灭菌;接种转化子菌种,锥形瓶发酵制备扩大培养用菌种。筛选玉米秸粉、小麦麸皮为原料,加水混合,高温高压灭菌,接种固体培养基与菌种混合物,转入无菌发酵袋,通风发酵制备木霉分生孢子发酵培养物,发酵5天即得。本发明发酵生产木霉分生孢子微生物新型农药及剂型对疫霉菌(马铃薯晚疫病、不同果树根腐病等)、镰刀菌(蕃茄萎焉病、不同植物的根腐病等)等土传病害防治效果达到80%以上。

    10亿/克高抗苯并咪唑类杀菌剂木霉分生孢子可湿性粉剂及制备方法

    公开(公告)号:CN101861879A

    公开(公告)日:2010-10-20

    申请号:CN201010205642.7

    申请日:2010-06-22

    Abstract: 10亿/克高抗苯并咪唑类杀菌剂木霉分生孢子可湿性粉剂及制备方法属于生物农药技术领域,10亿/克木霉分生孢子可湿性粉剂其组分为:木霉菌分生孢子、润湿剂DY-ETE301、分散剂木质素磺酸钠、紫外保护剂核黄素、残米粉、硅藻土等。本方法采用分离式加工技术,加工制成可湿性粉剂。可以与苯并咪唑类杀菌剂同时应用于多种大田作物及蔬菜的灰霉病、立枯病、猝倒病、枯萎病等植物病害的防治。其防治效果80%以上;对环境无污染、对人畜无害、使用方便、保质期一年其孢子萌发率80%以上。同时具有持效期长,并有明显的增产作用,使用量少,化学农药残留量低,有效地减少环境污染等特点。

    绿色木霉内切葡聚糖酶基因egⅦ及其编码的氨基酸序列和用于克隆该基因的引物

    公开(公告)号:CN101831453A

    公开(公告)日:2010-09-15

    申请号:CN201010173947.4

    申请日:2010-05-17

    Abstract: 绿色木霉内切葡聚糖酶基因egⅦ及其编码的氨基酸序列和用于克隆该基因的引物,它涉及涉及一种内切葡聚糖酶基因及其编码的氨基酸序列和用于克隆该基因的引物。它提供了绿色木霉内切葡聚糖酶基因egⅦ及其编码的氨基酸序列和用于克隆该基因的引物,为将来通过基因改造技术提高纤维素降解率提供了物质基础。绿色木霉内切葡聚糖酶基因egⅦ的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示,其编码的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。用于克隆的引物为P3和P4。将本发明绿色木霉内切葡聚糖酶基因egⅦ与真核表达载体pYES2连接,构建成pYES2-egⅦ重组表达载体,再经半乳糖诱导后表达,具有CMC酶活性,说明绿色木霉内切葡聚糖酶基因egⅦ具有表达功能。

    一种测定细菌产纤维素酶的胞内碳源诱导物的方法

    公开(公告)号:CN101398415A

    公开(公告)日:2009-04-01

    申请号:CN200810137484.9

    申请日:2008-11-07

    Inventor: 燕红 杨谦

    Abstract: 一种测定细菌产纤维素酶的胞内碳源诱导物的方法,它涉及了一种测定细菌产酶诱导物的方法。本发明解决了目前缺乏一个有效的测定细菌产纤维素酶的胞内碳源诱导物的方法。本发明测定细菌产纤维素酶的胞内碳源诱导物的方法按照如下步骤进行:一、各种碳源对纤维素酶产生的诱导作用;二、在菌株的对数生长期内获得菌体;三、细菌胞内酶和胞膜酶的制备;四、各酶制备物与底物的反应;五、高效液相色谱;与标准品的保留时间相同的即为细菌产纤维素酶的胞内碳源诱导物。本发明的方法可明确细菌胞内产纤维素酶的胞内碳源诱导物。

    一种葡聚糖酶及其分离纯化的方法

    公开(公告)号:CN101381714A

    公开(公告)日:2009-03-11

    申请号:CN200810137427.0

    申请日:2008-10-30

    Inventor: 燕红 杨谦

    Abstract: 一种葡聚糖酶及其分离纯化的方法,它涉及了一种纤维素酶及其分离纯化的方法。本发明解决了现有应用于棉织品水洗整理工艺中的纤维素酶存在应用时需要特定的酸性环境而影响产品的外观与质量的缺陷。本发明的葡聚糖酶用于降解羧甲基纤维素钠,它既具有内切酶的特性,也具有外切酶的特性,它的酶促反应最适pH值为8.0,酶促反应最适温度为55℃。本发明葡聚糖酶的分离纯化按照以下步骤进行:一、发酵粗酶液的预处理;二、柱层析;洗脱即得到葡聚糖酶。本发明的葡聚糖酶在中性或碱性的条件下保持着较高的酶活和良好的稳定性。

    一种利用纤维素发酵生产异丁醇工程菌的构建方法

    公开(公告)号:CN105463008B

    公开(公告)日:2019-01-08

    申请号:CN201511029576.1

    申请日:2015-12-31

    Abstract: 一种利用纤维素发酵生产异丁醇工程菌的构建方法,本发明涉及一种利用纤维素发酵生产异丁醇工程菌的构建方法。本发明是要提供一种利用纤维素发酵生产异丁醇工程菌的构建方法,本发明方法为:先PCR扩增苯丙酮酸脱羧酶基因aro10和乙醇脱氢酶基因adh2,通过双酶切与表达载体pMA5连接,在蜡样芽孢杆菌里构建了合成异丁醇的代谢途径,引入了外源基因adh2和aro10,过表达内源基因alsS,并敲除了竞争途径关键基因pflB与pta,本发明构建的利用纤维素发酵生产异丁醇工程菌能够高效生产异丁醇,最终产量可达到1.310g/L。本发明应用于生产异丁醇工程菌的构建领域。

    一种气升式发酵罐进气系统

    公开(公告)号:CN106701540A

    公开(公告)日:2017-05-24

    申请号:CN201710028812.0

    申请日:2017-01-16

    Inventor: 杨谦 刘冰南

    CPC classification number: C12M29/06

    Abstract: 一种气升式发酵罐进气系统,它涉及一种气升式发酵罐进气系统。本发明是为了解决气升式发酵罐需要非常大的空气注入量,导致巨大能源浪费问题。该系统包括进气装置、进气口、进气管和喷气装置,其中喷气装置通过进气管和进气口链接,进气装置通过进气口向喷气装置内送气。本发明由于采用喷气装置,使气泡分割更细碎,阻止气泡之间结合形成大气泡,增加气液接触面积,最终使通入的空气以最大化分散到发酵液中,从而达到提高供氧效率、节约进气量、减少能耗、节约成本的目的。采用该气升式发酵罐进气系统的气升式发酵罐的原料处理量为30t/h,仅需要5台螺杆空压机,其供氧效率是普通气升式发酵罐的11倍。本发明属于发酵罐的技术领域。

    利用木质纤维素生物质联产丁醇和氢气的方法

    公开(公告)号:CN104087622B

    公开(公告)日:2016-09-14

    申请号:CN201410317335.6

    申请日:2014-07-04

    CPC classification number: Y02P20/59

    Abstract: 利用木质纤维素生物质联产丁醇和氢气的方法,它涉及产丁醇和氢气的方法。本发明要解决现有发酵产丁醇过程中底物成本高,底物发酵不彻底及底物转化效率低的问题。本发明以廉价的可再生有机废弃物木质纤维素作为底物,经处理后得到的葡萄糖水解液用于产丁醇发酵,在此过程中收集氢气及丁醇,丁醇发酵后剩余的未被利用的碳水化合物及木质纤维素预处理过程中产生的半纤维素木糖液在产氢反应器中被继续利用转化为产物氢气。同时产氢发酵残夜中产生的乙酸丁酸又可回流到产丁醇发酵系统中强化丁醇产量。本发明不仅提高了底物的转化效率和系统的能源回收率,同时也大大降低单纯产丁醇或产氢后剩余废液带来的环境影响,在能源和环境领域具有重要意义。

    一种利用混合纤维素酶粗酶液水解木质纤维素发酵制备正丁醇的方法

    公开(公告)号:CN104004794A

    公开(公告)日:2014-08-27

    申请号:CN201410289117.6

    申请日:2014-06-24

    Abstract: 一种利用混合纤维素酶粗酶液水解木质纤维素发酵制备正丁醇的方法,它涉及一种制备正丁醇的方法。本发明要解决现有生物发酵生产正丁醇过程中底物成本高,木质纤维素水解过程中商品酶的应用造成成本上升,以及单一菌种纤维素酶系比例失衡造成的酶活降低等问题。方法:将预处理木质纤维素应用源于绿色木霉和黑曲霉纤维素酶混合粗酶液进行生物酶法水解,得到的糖液加入氮源、无机盐和维生素后通入氮气除氧,接种丙酮丁醇梭菌种子液进行厌氧发酵生产正丁醇。本发明提高了纤维素酶解过程中生物酶的活性,降低了生物发酵生产正丁醇过程中底物和酶法水解的成本消耗,减少了设备损耗和环境污染问题;本发明中混合粗酶液糖化水解效率达到75%。

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