公开(公告)号：CN105463008B

公开(公告)日：2019-01-08

申请号：CN201511029576.1

申请日：2015-12-31

Applicant: 哈尔滨工业大学

Inventor： 曹广丽 ,  王震宇 ,  杨谦 ,  傅德峰 ,  丛华

IPC: C12N15/75 ,  C12R1/085

Abstract: 一种利用纤维素发酵生产异丁醇工程菌的构建方法，本发明涉及一种利用纤维素发酵生产异丁醇工程菌的构建方法。本发明是要提供一种利用纤维素发酵生产异丁醇工程菌的构建方法，本发明方法为：先PCR扩增苯丙酮酸脱羧酶基因aro10和乙醇脱氢酶基因adh2，通过双酶切与表达载体pMA5连接，在蜡样芽孢杆菌里构建了合成异丁醇的代谢途径，引入了外源基因adh2和aro10，过表达内源基因alsS，并敲除了竞争途径关键基因pflB与pta，本发明构建的利用纤维素发酵生产异丁醇工程菌能够高效生产异丁醇，最终产量可达到1.310g/L。本发明应用于生产异丁醇工程菌的构建领域。

公开(公告)号：CN105463008A

公开(公告)日：2016-04-06

申请号：CN201511029576.1

申请日：2015-12-31

Applicant: 哈尔滨工业大学

Inventor： 曹广丽 ,  王震宇 ,  杨谦 ,  傅德峰 ,  丛华

IPC: C12N15/75 ,  C12R1/085

CPC classification number: C12N15/75 ,  C12N9/0006 ,  C12N9/1022 ,  C12N9/88 ,  C12N2800/101 ,  C12Y101/01001 ,  C12Y202/01006 ,  C12Y401/01043

Abstract: 一种利用纤维素发酵生产异丁醇工程菌的构建方法，本发明涉及一种利用纤维素发酵生产异丁醇工程菌的构建方法。本发明是要提供一种利用纤维素发酵生产异丁醇工程菌的构建方法，本发明方法为：先PCR扩增苯丙酮酸脱羧酶基因aro10和乙醇脱氢酶基因adh2，通过双酶切与表达载体pMA5连接，在蜡样芽孢杆菌里构建了合成异丁醇的代谢途径，引入了外源基因adh2和aro10，过表达内源基因alsS，并敲除了竞争途径关键基因pflB与pta，本发明构建的利用纤维素发酵生产异丁醇工程菌能够高效生产异丁醇，最终产量可达到1.310g/L。本发明应用于生产异丁醇工程菌的构建领域。