公开(公告)号：CN112899348A

公开(公告)日：2021-06-04

申请号：CN202110078844.8

申请日：2021-01-20

Applicant: 南方医科大学南方医院

Inventor： 郑磊 ,  张晔 ,  罗世华 ,  司徒博 ,  张晓荷

IPC: C12Q1/6825 ,  G01N27/26

Abstract: 本发明属于外泌体miRNA检测技术领域，具体公开了一种用于检测外泌体miRNA的MDTs‑CHA体系、电化学传感器及其应用。所述MDTs‑CHA体系包括N层相互叠加的T1结构和T2结构，T1结构包括一个DNA四面体DT1及两个发夹H1、H2，T2结构包括一个DNA四面体DT2及两个发夹H3、H4。本发明基于所述MDTs‑CHA体系构建了一种用于检测外泌体miRNA的电化学传感器，通过层叠、局域化的催化发夹组装反应，以MDTs作为电化学报告信号分子的载体，检测快速、灵敏且高效；MDTs‑CHA体系组装及合成方法简单，且稳定性好。本发明可以检测不同细胞系及血浆的外泌体miRNA，且由于MDTs‑CHA体系是由DNA链组装形成，具有较低的生物毒性和免疫原性，有利于其生物应用。

公开(公告)号：CN107860912B

公开(公告)日：2019-12-17

申请号：CN201711088994.7

申请日：2017-11-08

Applicant: 南方医科大学南方医院

Inventor： 郑磊 ,  刘菊梅 ,  张晔 ,  王前 ,  李文源 ,  罗世华 ,  司徒博 ,  李博

IPC: C07H21/04 ,  G01N33/533

Abstract: 本发明涉及一种双功能化核酸适体介导的A549肿瘤细胞检测方法，该方法制备适体—抑制链复合物、制备细胞悬液、制备发夹催化自组装反应液、采集荧光强度、建立标准品曲线方程和计算细胞浓度6个步骤。本发明所述检测方法能够在均相体系实现肿瘤细胞快速检测，且具有灵敏高、特异性好和可用于快速筛查的优点。

公开(公告)号：CN110095608A

公开(公告)日：2019-08-06

申请号：CN201910294220.2

申请日：2019-04-12

Applicant: 南方医科大学南方医院

Inventor： 郑磊 ,  李博 ,  刘春辰 ,  潘炜伦 ,  司徒博 ,  安泰学 ,  张晔 ,  张涵

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/574 ,  G01N33/543 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明提供一种基于磁性分离和DNA自组装的肿瘤外泌体纳米荧光传感器，包括偶联GPC-1抗体的功能化磁珠、触发链、三个茎环状核酸探针。本发明实现了乳腺癌GPC-1(+)外泌体亚群的定量检测，检测特异性高、灵敏度高、检测范围宽，通过对临床血浆来源标本中的乳腺癌GPC-1(+)外泌体亚型进行检测以评估该方法的临床应用价值，该方法具有普适性，可运用于其它已筛出特异核酸适体的生物标志物。可用于其它外泌体亚型、蛋白、细胞和金属离子等的检测。

公开(公告)号：CN107860912A

公开(公告)日：2018-03-30

申请号：CN201711088994.7

申请日：2017-11-08

Applicant: 南方医科大学南方医院

Inventor： 郑磊 ,  刘菊梅 ,  张晔 ,  王前 ,  李文源 ,  罗世华 ,  司徒博 ,  李博

IPC: G01N33/533 ,  C12Q1/02 ,  G01N33/574 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明涉及一种双功能化核酸适体介导的A549肿瘤细胞检测方法，该方法制备适体—抑制链复合物、制备细胞悬液、制备发夹催化自组装反应液、采集荧光强度、建立标准品曲线方程和计算细胞浓度6个步骤。本发明所述检测方法能够在均相体系实现肿瘤细胞快速检测，且具有灵敏高、特异性好和可用于快速筛查的优点。

公开(公告)号：CN119193836A

公开(公告)日：2024-12-27

申请号：CN202411453040.1

申请日：2024-10-17

Applicant: 南方医科大学南方医院

Inventor： 颜晓慧 ,  张晔 ,  朱一彤 ,  李文彬 ,  陈思婷 ,  张羽

IPC: C12Q1/6886 ,  C12Q1/6844 ,  G01N33/68 ,  C12N15/11 ,  G01N33/574

Abstract: 本申请涉及同步检测cEVs中蛋白和核酸的DNA四面体修饰的脂质体探针、试剂、试剂盒、方法及应用。该DNA四面体修饰的脂质体探针包括DNA四面体、适配体、第一发夹探针、第二发夹探针、封闭链、第三发夹探针和第四发夹探针，适配体、第一发夹探针、第二发夹探针、封闭链、第三发夹探针和第四发夹探针的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑6所示，DNA四面体由如SEQ ID NO.7‑10所示的核苷酸序列组成，适配体、第一发夹探针、第二发夹探针和封闭链修饰于DNA四面体的外表面并与DNA四面体相连接，第三发夹探针和第四发夹探针修饰于DNA四面体的内表面并与DNA四面体相连接。采用本申请的DNA四面体修饰的脂质体探针对cEVs中蛋白和核酸进行同步检测，灵敏度高，特异性强，重复性好。

公开(公告)号：CN118599971A

公开(公告)日：2024-09-06

申请号：CN202410700488.2

申请日：2024-05-31

Applicant: 南方医科大学南方医院

Inventor： 郑磊 ,  张晔 ,  司徒博 ,  李博 ,  刘春辰 ,  李文彬 ,  陈思婷 ,  朱一彤

IPC: C12Q1/6851 ,  C12Q1/6886 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种RNA定量检测试剂盒、方法及其应用，所述试剂盒包括吸水剂和至少一种荧光探针，所述荧光探针均包括能与目标RNA特异性结合的核苷酸片段，及荧光基团和淬灭基团。本发明针对不同目标RNA(如癌症相关miRNA)设计了不同的荧光探针，当探针上特异序列与目标RNA结合时，探针构型会由稳定态被打开，导致修饰在探针上的荧光基团和淬灭基团距离变远从而释放荧光；同时在吸水剂作用下产生动态相分离，促使探针和目标RNA聚集，从而缩短反应速度。因此，本发明提供的RNA定量检测技术具备反应快速、灵敏度高、特异度好、准确性高、操作简便、适用范围广泛等特点，有利于实现快速的癌症相关miRNA的早期诊断。

公开(公告)号：CN113388668A

公开(公告)日：2021-09-14

申请号：CN202110575085.6

申请日：2021-05-25

Applicant: 南方医科大学南方医院

Inventor： 郑磊 ,  张晔 ,  罗世华 ,  巫媛 ,  司徒博 ,  张晓荷

IPC: C12Q1/6841 ,  C12Q1/682 ,  C12Q1/6886 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种基于DNA纳米线的局域催化发夹自组装技术检测外泌体miRNA的方法，采用DNA纳米线‑CHA荧光探针，所述荧光探针包括Trigger、L1、L2及H1、H2，其中H1带有荧光基团和淬灭基团；靶标miRNA存在时启动CHA反应，打开DNA四面体上的H1发夹结构，H1暴露出来的“立足点”片段继续打开H2的发夹结构，在纳米线上形成H1/H2双链复合体并将H1上的荧光基团和淬灭基团分开，从而发出荧光信号，检测荧光值即可对靶标miRNA定量分析。本发明是一种能与外泌体进行快速、灵敏、特异、高效反应的信号放大技术，能够原位检测外泌体中特异miRNA。