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公开(公告)号：CN119639594A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202411727049.7
申请日：2024-11-28
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株表达塑料降解酶LCCICCG的重组毕赤酵母菌及其构建方法与应用。本发明以毕赤酵母为宿主细胞，异源表达了塑料降解酶的编码基因lccICCG，构建得到了单拷贝、多拷贝的重组毕赤酵母菌。并通过优化培养条件、显著提升了塑料降解酶蛋白的表达量和生物量；通过优化发酵策略，实现了在5L发酵罐中LCCICCG蛋白的高密度发酵生产，为实现该蛋白的大规模工业生产提供了技术基础。这些改进不仅提高了生产效率，降低了工业生产的成本，还为塑料解聚酶的商业化应用提供了强有力的支持。
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公开(公告)号：CN118755386A
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202410786224.3
申请日：2024-06-18
Applicant: 南京工业大学
IPC: C09D189/00 , C09D7/63
Abstract: 本发明属于蛋白材料领域，具体涉及一种贻贝蛋白自组装黏附涂层及其制备方法与应用。本发明中贻贝蛋白自组装黏附涂层是由贻贝蛋白与金属离子的混合溶液静置得到，具体制备步骤为：将贻贝蛋白溶于乙酸溶液中，得到贻贝蛋白溶液，再向贻贝蛋白溶液中加入含有金属离子的溶液，得到混合溶液，最后将混合溶液静置，得到贻贝蛋白自组装黏附涂层。本发明通过离子诱导蛋白直接实现自组装，制备工艺简单，易操作，制得的贻贝蛋白涂层不仅具有优异的耐湿性能，还具备良好的生物相容性和生物降解性，有作为理想的蛋白基粘性材料的潜能。
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公开(公告)号：CN118063852A
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202410234481.6
申请日：2024-03-01
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一种PET塑料解聚方法，将角质酶ICCG与蛋白标签连接，获得融合蛋白酶；将融合蛋白酶的酶液与PET塑料混合，在4‑30℃下孵育2‑5h，之后在40‑60℃下反应，完成PET塑料解聚；其中，所述蛋白标签为来源于Hypocrea jecorina的碳水化合物结合模块，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明利用融合蛋白ICCG‑CBM进行PET塑料降解，并利用低温预结合过程有效提高了PET塑料的解聚效率，从而实现在较低的解聚温度下获得更好的降解效果，显著降低了塑料闭环回收的成本。
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公开(公告)号：CN112853764A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110250290.5
申请日：2021-03-08
Applicant: 南京工业大学
IPC: D06M16/00 , D06M101/32
Abstract: 本发明公开一种提高废弃涤纶布料酶降解效率的化学预处理方法，包括：将洁净、干燥的废弃涤纶布料溶于有机溶剂中，得到涤纶溶液，之后倒入水中，使得涤纶析出，后加入到含有涤纶降解酶LCC的酶催化体系中，于pH=8，温度67℃条件下进行涤纶的酶降解。采用本发明的方法，能将涤纶废弃布料的结晶度从45%降低到约40%，能将原本不可直接生物降解的废弃涤纶的酶降解效率提高到56%。与现有的技术相比，本方法具有绿色无污染、可操作性强、降解率大幅提高的特点。
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公开(公告)号：CN110672686A
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201910922212.8
申请日：2019-09-27
Applicant: 南京工业大学
IPC: G01N27/30 , G01N27/327
Abstract: 本发明涉及谷氨酸传感电极制备领域，更具体地，本发明涉及一种制备具有宽检测线性范围谷氨酸传感电极的方法，所述制备具有宽检测线性范围谷氨酸传感电极的方法包括：(1)将FeCl3、K3[Fe(CN)6]溶于50mL含有HCl与KCl的溶液中；(2)步骤(1)获得的溶液通氩气8～12min；(3)直径为2mm的裸玻碳电极经氧化铝粉末打磨抛光处理，得到镜面的玻碳电极；(4)+400mV条件下，将步骤(3)获得的电极置于步骤(2)获得的溶液中；(5)以含有HCl与KCl的溶液为电解液，将步骤(4)获得的电极进行活化；(6)将步骤(5)获得的电极在100～110℃干燥55～65min并冷却至室温；(7)将谷氨酸氧化酶与戊二醛溶液混合得到混合液，将混合液滴定于步骤(6)获得的电极上。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110144318A
公开(公告)日：2019-08-20
申请号：CN201910323921.4
申请日：2019-04-22
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了无色素低分子量威兰胶生产菌株，以Sphingomonas sp.HT-1(保藏号CCTCC NO：M2012062)为出发菌株，分别构建了色素缺陷型并解除包囊结构的鞘氨醇单胞菌基因工程菌WG-1，色素和降解酶基因缺陷型的鞘氨醇单胞菌基因工程菌WG-2，以及色素和降解酶基因缺陷型并解除包囊结构的鞘氨醇单胞菌基因工程菌WG-3。本发明中鞘氨醇单胞菌WG-2菌株威兰胶产量较出发菌株提高10％～30％，达到35～45g/L，且分子量无明显变化(Mn：10000～20000kDa)；本发明中鞘氨醇单胞菌WG-1、WG-3菌株发酵生产低分子量威兰胶(Mn：500～1000kDa)，且解除包囊结构的WG-3产量较WG-1菌株提高了20～30％，达到20～25g/L。本发明所构建菌株，能够获得不同分子量范围的威兰胶产品，且显著提升了威兰胶的发酵水平。
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公开(公告)号：CN109251228A
公开(公告)日：2019-01-22
申请号：CN201811071940.4
申请日：2018-09-14
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一种去除鼠李糖脂发酵液中蛋白质的方法，采用离心的方法去除菌体，收集上清液，加入无水乙醇，在磁力搅拌器搅拌，离心去除沉淀的蛋白，收集上清液，本方法利用考马斯亮蓝法检测蛋白质含量变化，利用蒽酮硫酸法检测鼠李糖脂含量的变化。与现有的技术相比，本方法首次将乙醇沉淀蛋白法应用于鼠李糖脂发酵液中蛋白的去除，克服了现有技术的缺陷，具有操作简单，能耗低，操作安全，效率高的特点，是一种工艺简单，适合工业化的批量生产的简便，经济，高效的方法。
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公开(公告)号：CN119241722A
公开(公告)日：2025-01-03
申请号：CN202411368130.0
申请日：2024-09-29
Applicant: 南京工业大学
IPC: C07K19/00 , C09J189/00 , C09D189/00 , A61L24/10 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K8/64 , A61Q19/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于基因工程与蛋白材料领域，具体涉及一种杂合贻贝蛋白的构建方法与发酵制备方法。本发明在大肠杆菌中成功表达了3型、5型贻贝蛋白，基于此设计并构建了系列的双片段和三片段杂合贻贝蛋白，最终筛选出制备高粘性贻贝蛋白的大肠杆菌基因工程菌。对该基因工程菌进行发酵工艺优化，该基因工程菌在5L的发酵罐中发酵12～14h的OD600达到55～65，产量可达到1.5～2.0g/L，是摇瓶发酵的18～25倍。本发明提供的方法具有通用性强、时间短、成本低、表达效率高等优点，为工业化生产贻贝蛋白奠定了基础。
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公开(公告)号：CN118063626A
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202410234493.9
申请日：2024-03-01
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开利用角质酶融合蛋白实现PET塑料解聚的方法，将几丁质结合模块与角质酶ICCG连接，获得融合蛋白；将融合蛋白的酶液与PET塑料混合，完成PET塑料解聚；其中，所述几丁质结合模块的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明的融合蛋白性能优良，显著增强了与底物的结合能力，具有高效的塑料降解能力，对于结晶度为40%的PET薄膜显示出可测量的活性。
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公开(公告)号：CN115181169B
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202210730738.8
申请日：2022-06-24
Applicant: 南京工业大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/70 , C12N15/12 , C12N1/21 , C07K1/22 , A61L24/10 , G16C10/00 , G16B20/50 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种提高重组贻贝蛋白黏附力的方法，该方法通过生物信息学和分子动力学模拟，计算蛋白质分子氨基酸残基的溶剂可及性，对残基位点进行定点突变。本发明中分别将野生型厚壳贻贝3型蛋白Mcofp‑3A的N33、N46、N62位点、野生型地中海贻贝3A型蛋白Mgfp‑3A的G41、N44位点和野生型地中海贻贝3B型蛋白Mgfp‑3B的G33、N43、N76位点的氨基酸突变成对贻贝蛋白起黏附作用的酪氨酸后，突变蛋白的表达无明显变化，具有SEQ ID NO.1～8中的任意一项所示的氨基酸序列，其黏附性能均有所提升，在水溶液、盐溶液中搭接18h后分别较本体蛋白的黏附力提高16‑38％、12‑82％。(56)对比文件Qingye Lu等.Adhesion of mussel footproteins to different substrate surfaces.《J R Soc Interface》.2013,第10卷(第79期),第1-11页.
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