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公开(公告)号：CN119193532A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411383493.1
申请日：2024-09-30
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N9/18 , B09B3/60 , C08J11/10 , B09B101/75
Abstract: 本发明公开一种疏水性增强的LCCICCG突变蛋白及其应用，将LCCICCG蛋白氨基酸序列的第53、81、179、197、228、229、266或278位氨基酸残基突变为苯丙氨酸，获取突变体D53F、G81F、P179F、N197F、S228F、T229F、N266F或N278F，即所述突变蛋白。本发明的突变蛋白相比野生型蛋白疏水性显著增强，且经PET解聚实验验证，突变蛋白在低酶载量的情况下，对PET解聚的效率相比野生型蛋白显著提高，具经济可行性，且具有产物选择性。
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公开(公告)号：CN112480472B
公开(公告)日：2022-12-02
申请号：CN202011348049.8
申请日：2020-11-26
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一种提高废弃PET瓶酶降解效率的方法，包括：将洁净、干燥的PET于260~300℃进行熔融；将熔融状态的PET迅速转入液氮中快速淬火处理；将步骤（2）处理后的PET在可控温的球磨机（0‑5℃）中粉碎；将PET加入到含有PET降解酶LCC的酶催化体系中，于pH=8，温度67℃条件下进行PET的酶降解。采用本发明的方法，能将PET废塑料瓶的结晶度从约30%降低到约10%，PET降解率能达到75%以上。与现有的技术相比，本方法具有绿色环保、降解率高、经济高效的特点。
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公开(公告)号：CN115181169A
公开(公告)日：2022-10-14
申请号：CN202210730738.8
申请日：2022-06-24
Applicant: 南京工业大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/70 , C12N15/12 , C12N1/21 , C07K1/22 , A61L24/10 , G16C10/00 , G16B20/50 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种提高重组贻贝蛋白黏附力的方法，该方法通过生物信息学和分子动力学模拟，计算蛋白质分子氨基酸残基的溶剂可及性，对残基位点进行定点突变。本发明中分别将野生型厚壳贻贝3型蛋白Mcofp‑3A的N33、N46、N62位点、野生型地中海贻贝3A型蛋白Mgfp‑3A的G41、N44位点和野生型地中海贻贝3B型蛋白Mgfp‑3B的G33、N43、N76位点的氨基酸突变成对贻贝蛋白起黏附作用的酪氨酸后，突变蛋白的表达无明显变化，具有SEQ ID NO.1～8中的任意一项所示的氨基酸序列，其黏附性能均有所提升，在水溶液、盐溶液中搭接18h后分别较本体蛋白的黏附力提高16‑38％、12‑82％。
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公开(公告)号：CN110564807B
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN201910728324.X
申请日：2019-08-08
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及生物传感器的技术领域，更具体地，本发明提供了一种基于氧化石墨烯蔗糖生物传感器的传感电极制备方法。本发明第一方提供了一种基于氧化石墨烯蔗糖生物传感器的传感电极制备方法，包括杂化纳米片的制备、镜面玻碳电极的制备以及镜面玻碳电极的后处理；其中，杂化纳米片的制备原料包括氧化石墨烯与石墨烯量子点；同时采用壳聚糖将蔗糖酶、变旋酶及葡萄糖氧化酶固定在氧化石墨烯修饰后的电极表面。采用本方法制备的蔗糖生物传感电极及含有该电极的传感器线性检测上限较高，弥补了发酵生产中高浓度蔗糖无法直接检测的缺陷，也为后续开发蔗糖在线检测设备奠定了理论与应用基础。
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公开(公告)号：CN119464252A
公开(公告)日：2025-02-18
申请号：CN202411671542.1
申请日：2024-11-21
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N9/18
Abstract: 本发明公开LCCICCG突变蛋白及其应用，包括：对如SEQ ID NO：1所示的LCCICCG蛋白氨基酸序列进行下述a、b、c中任一种突变，或a、b、c中的两种或三种组合突变：a.将第208、238、283位氨基酸残基中的任两个进行组合突变；b.将第218、222位氨基酸残基进行组合突变；c.将第278、239、68、158位氨基酸残基中的一个或多个进行突变。本发明通过对LCCICCG进行突变改造，获得提高热稳定性和/或催化活性的突变蛋白，获得的突变蛋白M3对PET底物的亲和力、催化速率显著提高，其对于Gf‑PET和PCW‑PET的水解活性都明显高于LCCICCG。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116042502A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202310168298.6
申请日：2023-02-27
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种胞外分泌贻贝蛋白的基因工程菌及其构建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明通过信号肽筛选，将信号肽与贻贝蛋白的基因进行连接并转入质粒pET‑Duet进行融合表达。进一步的，本发明将角质酶Tfu‑0883基因转入质粒pET‑Duet，与信号肽‑贻贝蛋白融合蛋白进行共表达，最终实现贻贝蛋白的胞外分泌。此外本发明通过添加表面活性剂的方式优化了发酵培养基，从而提高胞外分泌水平。纯化后的发酵液中的贻贝蛋白产量可达20‑40mg/L。本发明实现了在大肠杆菌中胞外分泌具有生物活性的可溶性贻贝蛋白，减弱了产物积累造成的细胞毒性作用，促进了贻贝蛋白的持续合成，并且避免了后续破碎细胞操作，优化了工艺。
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公开(公告)号：CN110672686B
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN201910922212.8
申请日：2019-09-27
Applicant: 南京工业大学
IPC: G01N27/30 , G01N27/327
Abstract: 本发明涉及谷氨酸传感电极制备领域，更具体地，本发明涉及一种制备具有宽检测线性范围谷氨酸传感电极的方法，所述制备具有宽检测线性范围谷氨酸传感电极的方法包括：(1)将FeCl3、K3[Fe(CN)6]溶于50mL含有HCl与KCl的溶液中；(2)步骤(1)获得的溶液通氩气8～12min；(3)直径为2mm的裸玻碳电极经氧化铝粉末打磨抛光处理，得到镜面的玻碳电极；(4)+400mV条件下，将步骤(3)获得的电极置于步骤(2)获得的溶液中；(5)以含有HCl与KCl的溶液为电解液，将步骤(4)获得的电极进行活化；(6)将步骤(5)获得的电极在100～110℃干燥55～65min并冷却至室温；(7)将谷氨酸氧化酶与戊二醛溶液混合得到混合液，将混合液滴定于步骤(6)获得的电极上。
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公开(公告)号：CN110144318B
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN201910323921.4
申请日：2019-04-22
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了无色素低分子量威兰胶生产菌株，以Sphingomonas sp.HT‑1(保藏号CCTCC NO：M2012062)为出发菌株，分别构建了色素缺陷型并解除包囊结构的鞘氨醇单胞菌基因工程菌WG‑1，色素和降解酶基因缺陷型的鞘氨醇单胞菌基因工程菌WG‑2，以及色素和降解酶基因缺陷型并解除包囊结构的鞘氨醇单胞菌基因工程菌WG‑3。本发明中鞘氨醇单胞菌WG‑2菌株威兰胶产量较出发菌株提高10％～30％，达到35～45g/L，且分子量无明显变化(Mn：10000～20000kDa)；本发明中鞘氨醇单胞菌WG‑1、WG‑3菌株发酵生产低分子量威兰胶(Mn：500～1000kDa)，且解除包囊结构的WG‑3产量较WG‑1菌株提高了20～30％，达到20～25g/L。本发明所构建菌株，能够获得不同分子量范围的威兰胶产品，且显著提升了威兰胶的发酵水平。
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公开(公告)号：CN112480472A
公开(公告)日：2021-03-12
申请号：CN202011348049.8
申请日：2020-11-26
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一种提高废弃PET瓶酶降解效率的方法，包括：将洁净、干燥的PET于260~300℃进行熔融；将熔融状态的PET迅速转入液氮中快速淬火处理；将步骤（2）处理后的PET在可控温的球磨机（0‑5℃）中粉碎；将PET加入到含有PET降解酶LCC的酶催化体系中，于pH=8，温度67℃条件下进行PET的酶降解。采用本发明的方法，能将PET废塑料瓶的结晶度从约30%降低到约10%，PET降解率能达到75%以上。与现有的技术相比，本方法具有绿色环保、降解率高、经济高效的特点。
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公开(公告)号：CN109180746A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811071939.1
申请日：2018-09-14
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及到一种分离纯化鼠李糖脂的方法，采用离心的方法去除菌体，收集上清液，然后将收集的上清液，加入发酵液体积10%乙醇沉淀蛋白，采用离心的方法去除沉淀的蛋白，收集上清液，加入磷酸调节pH使鼠李糖脂析出，产生沉淀；之后经过离心收集鼠李糖脂沉淀。最后向石油醚中打撒鼠李糖脂沉淀，让鼠李糖脂均匀的分散于石油醚中，溶解鼠李糖脂中的杂质，离心收集沉淀得到提纯的鼠李糖脂。采用本发明的方法最终鼠李糖脂回收率为91.82%，鼠李糖脂纯度为85%。与现有的技术相比，本发明的方法具有操作简单，回收率高，无毒安全的特点，是一种工艺简单，适合工业化的批量生产的简便，经济，高效的方法。
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