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公开(公告)号：CN116926106A
公开(公告)日：2023-10-24
申请号：CN202211523455.2
申请日：2022-11-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9系统的萝卜基因编辑技术及其应用，首次在萝卜‘NAU‑067’中通过根癌农杆菌介导的遗传转化实现萝卜RsPDS基因编辑。将培养4～5d无菌苗切取带柄子叶后置于MS固体培养基上预培养3d，根癌农杆菌侵染萝卜带柄子叶后在MS固体培养基上共培养3d，之后置于MS+0.75mg/L TDZ+0.35mg/L NAA+300mg/L Carb的固体培养基上诱导不定芽。以RsPDS基因为例，出芽后采用GUS染色初步分析是否为转基因阳性愈伤组织，采用改良CTAB法提取白化苗DNA，PCR扩增发现1株新叶全白化苗在靶位点2存在3个碱基缺失和单个碱基替换，1株白化嵌合株在靶位点1存在3个碱基插入和单个碱基替换。本发明建立起一种基于CRISPR/Cas9系统的萝卜功能基因编辑技术体系，为创制突变体、高效验证基因的生物学功能以及创制萝卜优异种质提供了重要技术支撑。
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公开(公告)号：CN114958904B
公开(公告)日：2023-10-24
申请号：CN202210536365.0
申请日：2022-05-20
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种快速获得萝卜转基因材料的方法，包括：对萝卜种子进行消毒种植无菌苗；活化携带目的基因的发根农杆菌；制备侵染液；获取无根苗外植体并浸入菌液进行侵染；经过共培养和脱菌培养30d后，通过表型筛选、PCR检测和qRT‑PCR分析鉴定阳性毛状根；切取阳性毛状根放置于愈伤组织培养基上诱导愈伤组织，获得转基因愈伤组织。本发明提高了发根农杆菌诱导萝卜毛状根的效率，缩短了发根时间，成功诱导了转基因愈伤组织，能够进行萝卜部分本体基因功能验证。
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公开(公告)号：CN116790782A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202211442705.X
申请日：2022-11-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种基于非组培、快速验证萝卜盐胁迫响应基因功能的方法，包括：对萝卜种子进行催芽播种；活化携带目的基因的发根农杆菌；制备侵染液；在非组培条件下切除实生根，获得无根苗并浸入侵染液进行侵染；侵染后的无根苗移栽至营养土并诱导毛状根；通过表型筛选和PCR检测鉴定阳性复合植株；对复合植株进行盐处理，通过表型和超氧阴离子自由基含量(O2‑)测定来评价阳性复合植株的耐盐性。本发明不仅提高了发根农杆菌诱导萝卜毛状根的效率，缩短发根时间，而且避免了无菌操作。成功验证了萝卜盐胁迫响应基因的功能，为萝卜本体基因功能验证提供技术参考。
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公开(公告)号：CN116003548A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202210916942.9
申请日：2022-08-01
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种植物免疫诱抗蛋白PsCAP1及其应用，该蛋白能够诱导植物抗性，可以作为一种植物免疫激活因子应用到植物病害的防治领域。该蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。利用工程菌株表达可以获得高浓度的蛋白，使用该蛋白处理植物可以提高植物对疫霉菌的抗病性，并且所需浓度低、见效快、作用时间长。PsCAP1为提高植物抗病性、防治植物病害提供了新途径。
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公开(公告)号：CN114958904A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210536365.0
申请日：2022-05-20
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种快速获得萝卜转基因材料的方法，包括：对萝卜种子进行消毒种植无菌苗；活化携带目的基因的发根农杆菌；制备侵染液；获取无根苗外植体并浸入菌液进行侵染；经过共培养和脱菌培养30d后，通过表型筛选、PCR检测和qRT‑PCR分析鉴定阳性毛状根；切取阳性毛状根放置于愈伤组织培养基上诱导愈伤组织，获得转基因愈伤组织。本发明提高了发根农杆菌诱导萝卜毛状根的效率，缩短了发根时间，成功诱导了转基因愈伤组织，能够进行萝卜部分本体基因功能验证。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108588087B
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN201810465038.4
申请日：2018-05-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种提高植物抗病性的基因及其应用，属于植物分子生物学与植物遗传工程领域，本发明涉及一种植物源抗病基因GmLecRK‑R及其重组表达载体和应用。该基因来源于大豆，具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其编码的产物氨基酸序列为SEQ ID NO.2。本发明还提供一种基因沉默和重组表达载体，包括本发明所述的基因GmLecRK‑R。该基因对植物抗病性特别是疫霉菌抗性具有关键作用。过表达该基因显著性促进大豆和烟草对不同疫霉菌的抗病性，是一种理想的增强植物抗病性的基因。通过遗传转化的方法使该基因在烟草中表达使其获得对多种病原菌的抗性能力，还可以运用在作物育种抗病性改良方面。
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公开(公告)号：CN111424111A
公开(公告)日：2020-07-17
申请号：CN202010484886.7
申请日：2020-06-01
Applicant: 南京农业大学 , 南京莱福佳农业科技有限公司
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种萝卜根肿病抗性鉴定的方法。萝卜根肿病抗性功能标记RsNBS135C,由上游引物RsNBS135C-F和下游引物RsNBS135C-R扩增萝卜基因组DNA得到。该标记在萝卜基因组DNA中扩增所得的核苷酸序列于琼脂糖凝胶电泳后呈现特异性带型，能够快速、直接鉴定萝卜种质中目标抗性基因位点，有利于高效可靠地利用抗根肿病目标基因、加快根肿病抗性遗传改良进程。
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公开(公告)号：CN111088260A
公开(公告)日：2020-05-01
申请号：CN202010046089.0
申请日：2020-01-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于植物生物技术与分子育种领域，涉及萝卜盐胁迫响应过程中显著变化基因RsNHX1，具体涉及萝卜耐盐基因RsNHX1及应用，萝卜耐盐基因RsNHX1的核苷酸序列如SEQ ID N O.1所示，含有所述的耐盐基因RsNHX1的转运蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明填补萝卜耐盐基因RsNHX1的空白，提供萝卜耐盐基因RsNHX1的cDNA序列，采用RT-qPCR技术分析盐胁迫下不同时间RsNHX1基因的表达特性，进一步设计克隆引物构建pCAMBIA2301-RsNHX1过表达载体和抑制表达载体，转化拟南芥后kan+筛选，以及盐处理表型鉴定。
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公开(公告)号：CN107699579A
公开(公告)日：2018-02-16
申请号：CN201711067417.X
申请日：2017-11-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种提高植物抗病性的基因及其应用，属于植物分子生物学与植物遗传工程领域，本发明涉及一种植物源抗病基因ReXEG1及其重组表达载体和应用。该基因来源于烟草，具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其编码的产物氨基酸序列为SEQ ID NO.3。本发明还提供一种基因沉默和重组表达载体，包括本发明所述的基因ReXEG1。该基因对烟草抗疫霉菌具有关键作用。过表达该基因显著性促进烟草对不同疫霉菌的抗病性，是一种理想的增强植物抗病性的基因。通过遗传转化的方法使该基因在烟草中表达使其获得对多种病原菌的抗性能力，从而可以提高作物田间抗病性。本发明可以运用在作物育种抗病性改良方面。
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公开(公告)号：CN119423108A
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202510045277.4
申请日：2025-01-13
Applicant: 南京农业大学三亚研究院
Abstract: 本发明属于农业微生物技术领域，公开了RNA酶抑制剂5'‑单磷酸鸟苷（5’‑GMP）在提高植物抗病能力中的应用。本发明公开了RNA酶抑制剂5’‑GMP在防治大豆对禾谷镰刀菌及立枯丝核菌导致的根腐病、大豆对尖孢镰刀菌导致的枯萎病、苜蓿对尖孢镰刀菌导致的根腐病中的应用。本发明通过实验证明5’‑GMP可以显著提高大豆对禾谷镰刀菌、尖孢镰刀菌、立枯丝核菌以及紫花苜蓿对尖孢镰刀菌的抗病能力；另外，本申请的RNA酶抑制剂5’‑GMP还可以显著促进大豆、苜蓿、水稻的生长。
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