公开(公告)号：CN117106944A

公开(公告)日：2023-11-24

申请号：CN202211679969.7

申请日：2022-12-26

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 柳李旺 ,  董俊辉 ,  徐良 ,  王燕 ,  何敏 ,  李翠 ,  张欣瑜

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于蔬菜作物遗传育种与生物技术领域，提供了一种萝卜基于VRN1基因的抽薹性状功能标记及其应用。在抽薹性极显著差异萝卜种质6号染色体上RsVRN1基因启动子中鉴定到InDel序列差异，进而开发出InDel标记引物对：Nau‑VF：5’‑GTCAAACATATATGATCTATCTAGACCTTGC‑3’；Nau‑VR：5’‑GTTGAGAGAGAAACAGTGATGAAGGA‑3’。本发明所开发的基于VRN1基因的功能标记能实现对萝卜植株抽薹性进行快速准确鉴定。该标记在萝卜基因组DNA中扩增所得的核苷酸片段于琼脂糖凝胶电泳后呈现特异性带型，能够快速准确鉴定萝卜种质抽薹性，有利于高效进行萝卜晚抽薹性状鉴定与标记辅助选择，加快萝卜晚抽薹优良新品种培育进程。

公开(公告)号：CN114958904B

公开(公告)日：2023-10-24

申请号：CN202210536365.0

申请日：2022-05-20

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 王燕 ,  王爽 ,  易小芳 ,  应佳丽 ,  董俊辉 ,  柳李旺 ,  徐良

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/06 ,  A01H6/20 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明涉及一种快速获得萝卜转基因材料的方法，包括：对萝卜种子进行消毒种植无菌苗；活化携带目的基因的发根农杆菌；制备侵染液；获取无根苗外植体并浸入菌液进行侵染；经过共培养和脱菌培养30d后，通过表型筛选、PCR检测和qRT‑PCR分析鉴定阳性毛状根；切取阳性毛状根放置于愈伤组织培养基上诱导愈伤组织，获得转基因愈伤组织。本发明提高了发根农杆菌诱导萝卜毛状根的效率，缩短了发根时间，成功诱导了转基因愈伤组织，能够进行萝卜部分本体基因功能验证。

公开(公告)号：CN114958904A

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN202210536365.0

申请日：2022-05-20

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 王燕 ,  王爽 ,  易小芳 ,  应佳丽 ,  董俊辉 ,  柳李旺 ,  徐良

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/06 ,  A01H6/20 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明涉及一种快速获得萝卜转基因材料的方法，包括：对萝卜种子进行消毒种植无菌苗；活化携带目的基因的发根农杆菌；制备侵染液；获取无根苗外植体并浸入菌液进行侵染；经过共培养和脱菌培养30d后，通过表型筛选、PCR检测和qRT‑PCR分析鉴定阳性毛状根；切取阳性毛状根放置于愈伤组织培养基上诱导愈伤组织，获得转基因愈伤组织。本发明提高了发根农杆菌诱导萝卜毛状根的效率，缩短了发根时间，成功诱导了转基因愈伤组织，能够进行萝卜部分本体基因功能验证。