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公开(公告)号：CN109517809B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN201811449640.5
申请日：2018-11-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明将野生型传染性支气管炎病毒的E蛋白的第26位氨基酸由丙氨酸突变为苯丙氨酸，得到的缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒。本发明通过构建缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒，以及获得了回复突变体，对突变后的病毒进行分离纯化方法及其特性分析，有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗，对冠状病毒的研究具有重大的公共卫生和经济意义。
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公开(公告)号：CN111926025A
公开(公告)日：2020-11-13
申请号：CN202010346610.2
申请日：2020-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及反向遗传操作技术领域，公开了一株经过密码子替换的基因Ⅶ型新城疫病毒的拯救方法。分别将新城疫病毒的NP、P和L基因以及表达T7 RNA聚合酶的DE3基因克隆进pXJ40载体，获得质粒pXJ40-NP、pXJ40-P、pXJ40-L和pXJ40-DE3；将新城疫病毒的全基因组cDNA克隆进pBR322质粒中得到pBR322-DHN3；将NP基因编码区部分密码子统一替换成使用频率最高的密码子，替换到pBR322-DHN3质粒上，形成新质粒pBR322-mNPDHN3；采用上述5种质粒共转染BHK-21细胞，得到拯救病毒rDHN3-mNP。本发明方法更利于病毒的拯救和病毒致病机制的研究。
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公开(公告)号：CN108635574A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810461794.X
申请日：2018-05-15
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC: A61K39/145 , A61P31/16 , A61K39/12 , A61P31/14 , C12N7/00
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/5252 , A61K2039/552 , A61K2039/70 , A61P31/14 , A61P31/16 , C12N7/00 , C12N2760/16134 , C12N2760/16151 , C12N2770/24034 , C12N2770/24051 , A61K2300/00
Abstract: 本发明公开一种生产鸭坦布苏、禽流感二联灭活疫苗的方法及其产品，该方法包括以下步骤：用EB66传代细胞分别接种鸭坦布苏、禽流感病毒株；在病毒ELD50或EID50效价达到最高时分别收获鸭坦布苏、禽流感病毒并保存；分别灭活鸭坦布苏、禽流感病毒；将灭活后的鸭坦布苏和禽流感病毒在吐温-80中完全混合，得到病毒混合液，在病毒混合液中加入已灭菌的油相佐剂，混合乳化，配制成鸭坦布苏、禽流感二联灭活疫苗。本发明通过采用EB66传代细胞系分别进行鸭坦布苏和禽流感病毒的培养，然后制备成的鸭坦布苏、禽流感二联疫苗具有生产工艺稳定、批间差异小、质量可控、产量和质量显著提高等优点。
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公开(公告)号：CN107058243A
公开(公告)日：2017-08-18
申请号：CN201710179331.X
申请日：2017-03-23
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
CPC classification number: C12N7/00 , C12N2710/16351
Abstract: 本发明公开了一种马立克氏病毒的悬浮培养方法，包括步骤：1)鸡胚源DF‑1细胞系的传代与培养；2)细胞毒种的繁殖：用稀释液将马立克氏病毒种稀释，将病毒和DF‑1细胞一起接入含细胞培养液的培养瓶中培养，收获病毒作为毒种；3)制苗用病毒的吸附培养：将毒种稀释为病毒液，和新的鸡胚源DF‑1细胞一起接入含有微载体和悬浮培养液的培养瓶中，进行悬浮吸附培养；4)病毒的增殖培养及收获：弃去悬浮培养液，加入病毒增殖培养液进行悬浮增殖培养；当接入的细胞病变率达80％以上时，收获病毒液并保存；该方法用微载体结合悬浮的方式对马立克氏病毒进行培养，克服了传统疫苗生产受制于鸡胚的供应的缺点，避免了感染外源病毒的风险。
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公开(公告)号：CN106868216A
公开(公告)日：2017-06-20
申请号：CN201710184042.9
申请日：2017-03-24
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明公开了一种禽白血病病毒PCR检测引物组及包括该检测引物组的试剂盒，禽白血病病毒PCR检测引物组包括：引物P1、P2、P3和P4；其中P1为上游通用检测引物；P2为检测ALV‑A亚型病毒的下游引物；P3为检测ALV‑B亚型病毒的下游引物；P4为检测ALV‑J亚型病毒的下游引物；该诊断试剂盒，包括：如上所述的禽白血病病毒PCR检测引物组、ALV‑A亚型病毒阳性对照质粒、ALV‑B亚型病毒阳性对照质粒、ALV‑J亚型病毒阳性对照质粒和阴性对照；禽白血病病毒PCR检测引物组能够快速、准确地检测禽类是否患有白血病该亚型病毒。
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公开(公告)号：CN118356484A
公开(公告)日：2024-07-19
申请号：CN202410472407.8
申请日：2024-04-19
Applicant: 华南农业大学 , 广东温氏大华农生物科技有限公司 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: A61K39/255 , C12N7/00 , C12N5/077 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本申请属于生物制药技术领域，公开了一种MD疫苗的制备方法，该方法先挑选鸡胚、消毒、取鸡胚细胞并培养，得到鸡胚成纤维细胞；再将病毒毒株接种至鸡胚成纤维细胞培养并收获感染细胞，随后将收获得到的感染细胞配苗、分装、冻存，其中冻存时使用程序降温仪冻存，所述程序降温仪的程序为：将箱体预冻至4℃，放入安瓿瓶预冷30min，以0.8～1.2℃/min的速率将苗温降至‑40℃；再以8～12℃/min的速率将苗温降至‑100℃，移入液氮保存，本申请通过上述设计得到了一种MD疫苗的制备方法，该方法具有制备速度快，疫苗数量大等优点，更加适合MD疫苗的大规模制备，此外，本申请还公开了一种MD疫苗。
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公开(公告)号：CN115050417B
公开(公告)日：2024-07-19
申请号：CN202210736148.6
申请日：2022-06-27
Applicant: 华南农业大学
IPC: G16B15/10
Abstract: 本发明公开一种基于染色质随机折叠过程预测染色质域结构TAD的方法，包括如下步骤：（1）为待研究的染色质区间构建携带染色质可及性信息的染色质高分子链模型集合；（2）模拟携带染色质可及性信息的染色质高分子链模型在微小球形空间中的随机折叠过程，计算得到染色质3D结构的集合；（3）基于层级优化法得到高精度的待研究的染色质区间的3D结构集合；（4）基于步骤（3）得到的染色质3D结构集合，构建平均接触矩阵以显示TAD结构。本发明采用层级优化法对携带染色质可及性信息的高分子链模型的随机折叠过程进行分子动力学模拟，在10kb精度下预测了哺乳动物全基因组3D结构中40%以上的TAD结构。
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公开(公告)号：CN112048484A
公开(公告)日：2020-12-08
申请号：CN202010730869.7
申请日：2020-07-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于兽用生物制品技术领域，公开了一株表达传染性法氏囊强毒株VP2蛋白的基因Ⅶ型新城疫重组病毒，所述重组病毒在病毒rDHN3mF的P基因和M基因之间插入VP2蛋白编码基因得到，所述VP2蛋白编码基因如序列表SEQ ID NO：2所述，所述病毒rDHN3‑mF的序列表如SEQ ID NO：1所述。该重组病毒为弱毒型、应用后具有较强烈的保护性免疫反应、是针对流行毒株的NDV/IBDV二联疫苗的具有实用性的潜在毒株，同时本发明还公开了该重组病毒的制备方法和疫苗。
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公开(公告)号：CN109517809A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811449640.5
申请日：2018-11-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明将野生型传染性支气管炎病毒的E蛋白的第26位氨基酸由丙氨酸突变为苯丙氨酸，得到的缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒。本发明通过构建缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒，以及获得了回复突变体，对突变后的病毒进行分离纯化方法及其特性分析，有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗，对冠状病毒的研究具有重大的公共卫生和经济意义。
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公开(公告)号：CN108300704A
公开(公告)日：2018-07-20
申请号：CN201810129825.1
申请日：2018-02-08
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种用传代细胞系悬浮培养传染性支气管炎病毒的方法，包括：步骤1：取EB66细胞进行复苏与传代培养；步骤2：对步骤1所得EB66细胞进行鸡传染性支气管炎病毒的接种培养；步骤3：接毒后的EB66细胞每隔6-12h进行取样，测定病毒的EID50，在病毒EID50达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的鸡传染性支气管炎病毒。本发明采用EB66细胞作为鸡传染性支气管炎病毒的培养基质，利用提供用全悬浮传代细胞系EB66细胞进行高效的病毒生产，有效提高支气管炎病毒的培育滴度，从而为实现鸡传染性支气管炎病毒疫苗的大规模培养，降低病毒的培育成本。
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