一种马立克氏病毒的悬浮培养方法

    公开(公告)号:CN107058243A

    公开(公告)日:2017-08-18

    申请号:CN201710179331.X

    申请日:2017-03-23

    IPC分类号: C12N7/00 C12N7/02

    CPC分类号: C12N7/00 C12N2710/16351

    摘要: 本发明公开了一种马立克氏病毒的悬浮培养方法,包括步骤:1)鸡胚源DF‑1细胞系的传代与培养;2)细胞毒种的繁殖:用稀释液将马立克氏病毒种稀释,将病毒和DF‑1细胞一起接入含细胞培养液的培养瓶中培养,收获病毒作为毒种;3)制苗用病毒的吸附培养:将毒种稀释为病毒液,和新的鸡胚源DF‑1细胞一起接入含有微载体和悬浮培养液的培养瓶中,进行悬浮吸附培养;4)病毒的增殖培养及收获:弃去悬浮培养液,加入病毒增殖培养液进行悬浮增殖培养;当接入的细胞病变率达80%以上时,收获病毒液并保存;该方法用微载体结合悬浮的方式对马立克氏病毒进行培养,克服了传统疫苗生产受制于鸡胚的供应的缺点,避免了感染外源病毒的风险。

    生产疫苗的连续细胞系
    6.
    发明公开

    公开(公告)号:CN1688335A

    公开(公告)日:2005-10-26

    申请号:CN03807605.5

    申请日:2003-02-05

    摘要: 本发明提供了一种用于生产可以支持马立克氏病病毒株的连续细胞系的方法,包括用包含马立克氏病病毒株的核酸或其片段的载体感染或转染一种细胞并在适于表达所述核酸及繁殖所述细胞或其子代的条件下培养所述感染的或转染的细胞或其子代。优选地,所述核酸或其片段包含马立克氏病病毒糖蛋白gE基因或其功能性片段。本发明进一步提供了一种用于产生和/或分离和/或维持一种极超强毒型和/或超强毒型、和/或超超强毒型、和/或强毒型和/或无毒型马立克氏病病毒株的方法,包含用本发明的极超强毒型和/或超强毒型、和/或超超强毒型、和/或强毒型和/或无毒型马立克氏病病毒株感染一种细胞并在适于繁殖所述细胞及产生、维持和分离所述极超强毒型和/或超强毒型、和/或超超强毒型、和/或强毒型和/或无毒型马立克氏病病毒株的条件下培养所述细胞。本发明进一步提供了一种用于制备可以在禽类诱导抗疾病、优选抗马立克氏病病毒相关性疾病的保护作用的疫苗的方法,包括培养本发明的连续细胞系并从中收集细胞培养物组分。