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公开(公告)号:CN112500490B
公开(公告)日:2022-05-03
申请号:CN202011097526.8
申请日:2020-10-14
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗左旋氧氟沙星抗体的F(ab)2片段,所述F(ab)2片段具有通过二硫键连接在一起的两个Fab部分,每个Fab部分包含轻链和重链Fd部分,所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示,所述重链Fd部分如SEQ ID NO:4所示。本发明通过胃蛋白酶酶解,采用两步纯化法纯化酶解产物,首次获得抗左旋氧氟沙星抗体F(ab)2。本发明方法流程简洁,操作简单,高产出,所述抗左旋氧氟沙星抗体的F(ab)2片段对左旋氧氟沙星的半抑制浓度为0.33ng/mL,检测限为0.04ng/mL,检测范围为0.05~2.15ng/mL,具有较大的应用前景。
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公开(公告)号:CN114315835A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202111452370.5
申请日:2021-11-30
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D473/34 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/79 , C07K14/795 , C07K16/06 , C07K16/44 , G01N33/53 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明提供了一种6‑苯甲基腺嘌呤半抗原、人工抗原、抗体及其制备和应用,本发明制备得到了一种6‑苯甲基腺嘌半抗原6‑BA‑2C,应用半抗原6‑BA‑2C偶联载体蛋白BSA得到人工抗原6‑BA‑2C‑BSA,并进一步制备得到用于检测6‑苯甲基腺嘌呤的特异性抗体,应用人工抗原6‑BA‑2C‑OVA作为包被原,该抗体对6‑苯甲基腺嘌呤具有良好的灵敏度和特异性,半抑制浓度为1.18μg/Kg,最低检测限为0.056μg/Kg,定量检测范围为0.17~61.04μg/Kg,对玉米素、反玉米素、N6‑苯甲酰基腺嘌呤均无交叉反应,利用本发明的抗体建立了特异性和灵敏度更高的6‑苯甲基腺嘌呤的免疫分析方法。
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公开(公告)号:CN114276264A
公开(公告)日:2022-04-05
申请号:CN202111487292.2
申请日:2021-12-07
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07C229/14 , C07C227/18 , C07C227/08 , C07K14/765 , C07K14/795 , C07K14/77 , C07K14/79 , C07K16/44 , G01N33/577 , G01N33/53 , C07K16/06 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供了一种芬氟拉明半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用,本发明制备得到了两种半抗原,半抗原FB和半抗原FN,应用半抗原FB偶联载体蛋白LF得到人工抗原FB‑LF,并进一步制备得到用于检测芬氟拉明的特异性抗体,应用人工抗原FN‑OVA作为包被原,该抗体对芬氟拉明具有良好的灵敏度和特异性,半抑制浓度为10.22ng/mL,最低检测限为0.63ng/mL,定量检测范围为1.76~59.13ng/mL,对芬氟拉明类似物无交叉反应,可特异性检测芬氟拉明;本发明建立了芬氟拉明的免疫分析方法,实现了快速准确检测芬氟拉明的目的。
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公开(公告)号:CN110028581B
公开(公告)日:2022-02-11
申请号:CN201910251588.0
申请日:2019-03-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种微囊藻毒素抗体Fab片段的制备方法和应用。本发明首先提供了一种微囊藻毒素抗体Fab片段的氨基酸序列和核苷酸序列,依次如SEQ ID NO:1~4所示。本发明还提供了一种微囊藻毒素抗体Fab片段的制备方法,用蛋白酶酶切微囊藻毒素抗体IgG,酶切产物直接采用凝胶过滤层析进行纯化,即可得到Fab片段。该方法仅使用凝胶过滤层析便可获得生物活性高、纯度高的Fab片段,成功实现了一步法高效纯化Fab片段。另外,该方法步骤少,操作流程简易,使用的凝胶过滤层析介质可再生,大大降低了成本,是一种低成本、高产出的高效制备微囊藻毒素Fab片段的方法,为建立微囊藻毒素的免疫分析检测方法提供了核心材料,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN112409242A
公开(公告)日:2021-02-26
申请号:CN202011023925.X
申请日:2020-09-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D211/90 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/79 , C07K16/06 , C07K16/44 , G01N33/558 , G01N33/58 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种氨氯地平半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用,本发明先制备得到了氨氯地平半抗原AN‑SSA,应用该半抗原得到了氨氯地平人工完全抗原和氨氯地平多克隆抗体,该抗体对氨氯地平具有高灵敏度和高特异性的识别能力,半抑制浓度为0.31μg/kg,定量检测范围为0.04758~2.078μg/kg,检测限为0.085.μg/kg,对非洛地平、尼群地平的交叉反应率均低于1%。另外,本发明利用氨氯地平抗体建立了胶体金免疫层析技术,具有较宽的检测范围和较高的灵敏度,能够特异性识别氨氯地平的检测,可视检测线为20ng/mL,在保健食品中氨氯地平的免疫快速检测中具有较大应用前景。
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公开(公告)号:CN112129942A
公开(公告)日:2020-12-25
申请号:CN202010852145.X
申请日:2020-08-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/558 , G01N33/546
Abstract: 一种泰乐菌素及替米考星乳胶微球免疫层析试纸条及其制备和应用,本发明的乳胶微球免疫层析试纸条通过优化乳胶微球抗体探针的制备,有效提高其检测鸡蛋样品的灵敏度,在保证产品灵敏度的前提下减少抗原、抗体的使用量,缩减检测耗时;通过调节样品垫配方以适应鸡蛋样品的检测要求,精简样品前处理步骤,仅通过一次提取吹干并复溶的步骤,即可完成样品前处理的操作;采用本发明的免疫层析试纸条对鸡蛋样品中残留TYL及TIM的检测,Cut‑Off值均能够达到8ng/g,灵敏度高,检测时间为5min,省时高效。
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公开(公告)号:CN112094919A
公开(公告)日:2020-12-18
申请号:CN202010997172.6
申请日:2020-09-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴别牛猪鸡鸭动物源成分的多重PCR引物组及其方法和试剂盒。所述多重PCR引物组包括4对引物:牛源性成分检测引物对B‑F/R、猪源性成分检测引物对P‑F/R、鸡源性成分检测引物对C‑F/R和鸭源性成分检测引物对D‑F/R,其引物序列依次如SEQ ID NO:1~8所示。所述引物对仅对各自物种的目标片段进行特异性扩增,不会对其他物种进行非特异性扩增,检测时间短,其对牛肉制品中掺杂的猪、鸡、鸭源性成分检测限可达0.1%(w/w),适用于多种肉类加工产品中动物源成分鉴别检验,适用范围广、可靠性高。
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公开(公告)号:CN108727502A
公开(公告)日:2018-11-02
申请号:CN201810411301.1
申请日:2018-05-02
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种左旋氧氟沙星抗体Fab片段的制备方法。所述方法包括以下步骤:制备左氧氟沙星的单克隆抗体;用蛋白酶酶切获得的单克隆抗体;去除蛋白酶,终止酶切反应;采用两步纯化法纯化目的Fab片段。本发明设计了一种蛋白酶酶切制备左旋氧氟沙星抗体Fab片段的方法,所述操作简便,转化率高;本发明设计了一种新型抗体纯化工艺制备左旋氧氟沙星抗体Fab片段,所述纯化工艺简单,仅需两步纯化得到纯度达95%以上的抗体Fab片段;本发明运用所制备的左旋氧氟沙星抗体Fab片段建立的ELISA方法灵敏度高,对左旋氧氟沙星的半抑制浓度为0.13 ng/mL,线性检测范围为0.02-0.8 ng/mL,检测限为0.007 ng/mL。
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公开(公告)号:CN114878805B
公开(公告)日:2025-04-25
申请号:CN202210468845.8
申请日:2022-04-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/533 , G01N33/543 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种基于新型多量子点‑蛋白聚合物探针同时检测多种那非类物质的试剂盒制备方法和应用。本发明基于新型溶剂诱导效应策略,一步法制备多量子点‑蛋白质免疫探针,通过混合量子点、BSA与抗体,利用疏水作用和π‑π堆积,制备有大量荧光量子点的荧光免疫探针,提高了探针中量子点的载量,简化探针制备方法。以西地那非和他达拉非及其衍生物为检测对象,用西地那非和他达拉非抗体和抗原,结合上述方法制备了特异性检测西地那非和他达拉非及其衍生物的探针和侧流免疫层析试纸条,结合固相萃取微流控芯片,构建检测那非类物质的系统,实现了对12种那非类药物的定性定量检测,特异性强、灵敏度高、准确性好,检测结果可靠。
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公开(公告)号:CN114409604B
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202111536235.9
申请日:2021-12-15
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D239/94 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/795 , C07K14/79 , C07K16/44 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/53
Abstract: 本发明提供了一种盐酸特拉唑嗪半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法与应用,本发明制备得到了两种半抗原,半抗原T‑2C和半抗原T‑SG,应用半抗原T‑2C得到人工抗原T‑2C,并进一步制备得到用于检测盐酸特拉唑嗪的特异性抗体,应用人工抗原T‑SG‑OVA作为包被原,该抗体对盐酸特拉唑嗪具有良好的灵敏度和特异性,最低检测限为0.38ng/mL,半抑制浓度为5.72ng/mL,利用该抗体建立了盐酸特拉唑嗪的免疫分析方法,实现了盐酸特拉唑嗪快速、准确的检测。
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