公开(公告)号：CN104651493B

公开(公告)日：2017-02-22

申请号：CN201510009121.7

申请日：2015-01-09

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘西莉 ,  苗建强 ,  林东 ,  董雪 ,  蔡萌 ,  庞智黎 ,  刘鹏飞 ,  李健强 ,  罗来鑫

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12N15/31 ,  C07K14/37

Abstract: 本发明涉及辣椒疫霉氧化固醇结合蛋白相关基因PcORP1核苷酸点突变的鉴定及其在杀菌剂氟噻唑吡乙酮抗性监测中的应用，具体公开了两种鉴定辣椒疫霉PcORP1基因2379位核苷酸突变对氟噻唑吡乙酮产生抗药性的分子检测方法及其专用引物。所述突变位点指辣椒疫霉菌中PcORP1基因的自5’末端起第2379位核苷酸为G和T杂合或T纯合。由此导致PcORP1蛋白的自N端起第769位氨基酸为甘氨酸与色氨酸杂合或纯合的色氨酸。本发明提供的分子检测方法，灵敏度高、稳定性好、检测周期短，可用于高通量地监测田间辣椒疫霉对杀菌剂氟噻唑吡乙酮的抗性基因频率以及抗性发生和发展情况，实现抗性病害的早期预警，指导及时调整辣椒疫霉防治策略，合理用药，延缓抗药性的发生和发展，并在病害的可持续管理系统中发挥重要的作用。

公开(公告)号：CN102876773A

公开(公告)日：2013-01-16

申请号：CN201210291639.0

申请日：2012-08-16

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘西莉 ,  陈磊 ,  朱书生 ,  卢晓红 ,  庞智黎 ,  蔡萌 ,  毕扬

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明涉及一种快速鉴定瓜类疫霉对CAA类杀菌剂产生抗药性的核苷酸点突变方法及专用引物。属于分子生物技术领域。该特异性引物对由SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：3所示的DNA分子组成。本发明提供的检测瓜类疫霉对CAA类杀菌剂产生抗药性的分子检测方法，简单快速、敏度度高、稳定性好，可以有效地监测和早期预警田间瓜类疫霉对CAA类杀菌剂的抗性发生发展动态，指导制定科学的病害管理策略，以延缓和控制抗药性的进一步发展。

公开(公告)号：CN105886481B

公开(公告)日：2019-10-01

申请号：CN201610321982.3

申请日：2016-05-16

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘西莉 ,  张灿 ,  王为镇 ,  牟文君 ,  蔡萌 ,  刁永朝 ,  刘利 ,  刘鹏飞 ,  李健强

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/6895 ,  A01P3/00

Abstract: 本发明涉及几丁质合酶，特别涉及卵菌门中的几丁质合酶，其氨基酸序列为与如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列在相似性在75％以上，优选在80％以上，更优选在90％以上，最优选在95％以上且具有与如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列相同功能的氨基酸序列。所述几丁质合酶的活性水平能够调节卵菌的活性孢子囊和活性游动孢子的产量从而影响卵菌的致病力或寄主的发病程度。

公开(公告)号：CN107937418A

公开(公告)日：2018-04-20

申请号：CN201711085065.0

申请日：2017-11-07

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘西莉 ,  王为镇 ,  薛昭霖 ,  蔡萌 ,  张灿 ,  苗建强 ,  彭钦 ,  黄中乔

IPC: C12N15/31 ,  C12N15/80 ,  C12N15/65 ,  C12N15/90

CPC classification number: C07K14/37 ,  C12N15/65 ,  C12N15/80 ,  C12N15/902 ,  C12N2810/10

Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体公开了氟噻唑吡乙酮抗性基因作为卵菌转化筛选标记的应用。本发明通过将可引起卵菌对氟噻唑吡乙酮产生300倍以上抗性的突变蛋白的编码基因作为筛选标记，用于卵菌转化时转化子的筛选，且经实验验证，转化子筛选的阳性率可达100％。将该氟噻唑吡乙酮抗性基因作为筛选标记用于卵菌的遗传转化实验，以氟噻唑吡乙酮作为筛选药剂，具有筛选效率高、筛选阳性率高、应用范围广、成本低等显著优点，同时，该筛选标记的开发解决了卵菌转化时筛选标记单一、筛选效率低等问题，为卵菌转化时基因回补、基因多敲除等方面的工作提供了有力保障。

公开(公告)号：CN104651493A

公开(公告)日：2015-05-27

申请号：CN201510009121.7

申请日：2015-01-09

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘西莉 ,  苗建强 ,  林东 ,  董雪 ,  蔡萌 ,  庞智黎 ,  刘鹏飞 ,  李健强 ,  罗来鑫

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12N15/31 ,  C07K14/37

CPC classification number: C12Q1/6858 ,  C07K14/37 ,  C12Q2521/301

Abstract: 本发明涉及辣椒疫霉氧化固醇结合蛋白相关基因PcORP1核苷酸点突变的鉴定及其在杀菌剂氟噻唑吡乙酮抗性监测中的应用，具体公开了两种鉴定辣椒疫霉PcORP1基因2379位核苷酸突变对氟噻唑吡乙酮产生抗药性的分子检测方法及其专用引物。所述突变位点指辣椒疫霉菌中PcORP1基因的自5’末端起第2379位核苷酸为G和T杂合或T纯合。由此导致PcORP1蛋白的自N端起第769位氨基酸为甘氨酸与色氨酸杂合或纯合的色氨酸。本发明提供的分子检测方法，灵敏度高、稳定性好、检测周期短，可用于高通量地监测田间辣椒疫霉对杀菌剂氟噻唑吡乙酮的抗性基因频率以及抗性发生和发展情况，实现抗性病害的早期预警，指导及时调整辣椒疫霉防治策略，合理用药，延缓抗药性的发生和发展，并在病害的可持续管理系统中发挥重要的作用。

公开(公告)号：CN103789409B

公开(公告)日：2015-05-27

申请号：CN201310572376.5

申请日：2013-11-15

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘西莉 ,  蔡萌 ,  林东 ,  陈磊 ,  毕扬 ,  宋晰 ,  李健强 ,  刘鹏飞

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12N15/31 ,  C07K14/37

Abstract: 本发明涉及灰霉病菌(Botrytis cinerea)β-微管蛋白基因的克隆及其在苯酰菌胺(zoxamide)抗性监测中的应用，具体公开了一种快速鉴定灰霉病菌抗药性的分子检测方法及专用引物。属于分子生物技术领域。该特异性引物对SEQ ID NO:2(或SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3)和SEQ ID NO:5所示的DNA分子组成。本发明提供的检测灰霉病菌对苯酰菌胺产生抗药性的点突变的方法，具有高灵敏度、简单快速、稳定性好的特点，可以快速、灵敏地检测田间灰霉病菌对苯酰菌胺的抗性发生发展动态，及时调整病害防治策略，以延缓和控制抗药性的进一步发展。