嗜铬细胞致病基因二代测序建库用PCR引物及建库方法

    公开(公告)号:CN107304443A

    公开(公告)日:2017-10-31

    申请号:CN201610248095.8

    申请日:2016-04-20

    Abstract: 本发明公开了一种嗜铬细胞致病基因二代测序建库用PCR引物及建库方法;引物选自SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:70所示核苷酸;嗜铬细胞致病基因为SDHB、SDHC、SDHD、MAX、VHL、TMEM127、RET。利用提取的人基因组DNA为模板,采用前述引物作为引物的特异扩增部分进行第一轮PCR扩增;将第一轮PCR产物,稀释,作为第二轮PCR扩增的模板;第二轮PCR扩增利用第一轮PCR扩增的通用引物再进行一轮扩增,同时加上测序机器需要的index、特异引物识别区用于测序机器识别的碱基序列;第二轮测序产物经核酸纯化,即可上机检测。本发明的建库方法属于自行设计开发,对比购买国外试剂盒成本极低。

    一种脂肪细胞中自噬的监测方法

    公开(公告)号:CN103060421B

    公开(公告)日:2014-06-18

    申请号:CN201310023764.8

    申请日:2013-01-22

    Abstract: 本发明公开了一种脂肪细胞中自噬的监测方法,成熟脂肪细胞由于其特殊的结构,胞内充满大量脂滴,使细胞器和核向周边移位,电镜下难以看到典型的自噬体。但本发明经过多次实验,不断改进实验条件,终于成功的在成熟的3T3-L1脂肪细胞内观察到处于各个自噬阶段的自噬结构。此外,由于成熟脂肪具有不易转染的特点,普通的质粒转染很难达到预期的效果。因此,本发明利用GFP-LC3慢病毒方法感染3T3-L1脂肪细胞,荧光显微镜下观察感染效率达到80%以上。在营养饥饿情况下,本发明成功观察到GFP-LC3点状聚集现象。成熟脂肪细胞内自噬监测方法的建立为以后研究自噬与脂代谢的关系奠定了基础。

Patent Agency Ranking