公开(公告)号：CN107304443B

公开(公告)日：2020-12-29

申请号：CN201610248095.8

申请日：2016-04-20

Applicant: 上海市内分泌代谢病研究所

Inventor： 宁光 ,  崔斌 ,  王卫庆 ,  苏颋为 ,  蒋怡然 ,  周薇薇 ,  齐研 ,  朱巍 ,  张翠

IPC: C12Q1/6886 ,  C12Q1/6869 ,  C40B50/06 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种嗜铬细胞致病基因二代测序建库用PCR引物及建库方法；引物选自SEQ ID NO:1～SEQ ID NO:70所示核苷酸；嗜铬细胞致病基因为SDHB、SDHC、SDHD、MAX、VHL、TMEM127、RET。利用提取的人基因组DNA为模板，采用前述引物作为引物的特异扩增部分进行第一轮PCR扩增；将第一轮PCR产物，稀释，作为第二轮PCR扩增的模板；第二轮PCR扩增利用第一轮PCR扩增的通用引物再进行一轮扩增，同时加上测序机器需要的index、特异引物识别区用于测序机器识别的碱基序列；第二轮测序产物经核酸纯化，即可上机检测。本发明的建库方法属于自行设计开发，对比购买国外试剂盒成本极低。

公开(公告)号：CN107304443A

公开(公告)日：2017-10-31

申请号：CN201610248095.8

申请日：2016-04-20

Applicant: 上海市内分泌代谢病研究所

Inventor： 宁光 ,  崔斌 ,  王卫庆 ,  苏颋为 ,  蒋怡然 ,  周薇薇 ,  齐研 ,  朱巍 ,  张翠

IPC: C12Q1/68 ,  C40B50/06 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种嗜铬细胞致病基因二代测序建库用PCR引物及建库方法；引物选自SEQ ID NO:1～SEQ ID NO:70所示核苷酸；嗜铬细胞致病基因为SDHB、SDHC、SDHD、MAX、VHL、TMEM127、RET。利用提取的人基因组DNA为模板，采用前述引物作为引物的特异扩增部分进行第一轮PCR扩增；将第一轮PCR产物，稀释，作为第二轮PCR扩增的模板；第二轮PCR扩增利用第一轮PCR扩增的通用引物再进行一轮扩增，同时加上测序机器需要的index、特异引物识别区用于测序机器识别的碱基序列；第二轮测序产物经核酸纯化，即可上机检测。本发明的建库方法属于自行设计开发，对比购买国外试剂盒成本极低。

公开(公告)号：CN103105326A

公开(公告)日：2013-05-15

申请号：CN201210587944.4

申请日：2012-12-30

Applicant: 上海市内分泌代谢病研究所

Inventor： 宁光 ,  谢晓雁 ,  杨颖 ,  崔斌 ,  郭婷 ,  朱巍

IPC: G01N1/30 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种Th细胞表面及胞内染色的方法及其应用，其步骤为：刺激细胞→阻断细胞膜表面Fc受体→细胞膜表面抗原染色→细胞固定→细胞透膜→胞内或核内抗原染色→流式细胞分析等步骤，可以对Th细胞表面及胞内染色，并获得较好的实验效果。可应用于测试Th1、Th2、Th17细胞占CD4+细胞的比例。