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公开(公告)号:CN112920174B
公开(公告)日:2022-11-04
申请号:CN202110143602.2
申请日:2021-02-02
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07D405/04 , G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种光敏感型化合物及其制备方法和应用,涉及蛋白质核酸共固定技术领域,光敏感型化合物是一种聚丙烯酰胺化合物,包括四唑基团和呋喃基团;由N‑(3‑氨基丙基)氨基甲酸叔丁酯、甲基丙烯酰氯呋喃‑2‑基硼酸和[羟基(苯基)‑λ3‑碘基]4‑甲基苯磺酸盐等原料制备而成;可制成蛋白质核酸共固定电泳凝胶,定量或半定量检测单细胞或多细胞中蛋白质与核酸;还可以用于微芯片电泳迁移率分析、蛋白免疫印迹、核酸印迹杂交、单细胞蛋白免疫印迹、单细胞northern/southern印迹杂交或毛细管电泳蛋白免疫印迹。本发明的蛋白质核酸共固定凝胶可同时原位固定蛋白质与核酸来研究蛋白质与DNA相互作用。
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公开(公告)号:CN111733056A
公开(公告)日:2020-10-02
申请号:CN202010558730.9
申请日:2020-06-18
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种集成循环肿瘤细胞分离及单细胞免疫印迹的微流控芯片,其特征在于,包括循环肿瘤细胞分选单元、单细胞捕获单元、光活性凝胶电泳分离单元和免疫印迹分析单元,循环肿瘤细胞分选单元将循环肿瘤细胞分离分选出来,单细胞捕获单元将分选富集后的细胞实现单细胞的捕获并对细胞进行封闭裂解,光活性凝胶电泳分离单元将细胞裂解后的蛋白推进到芯片上的凝胶涂层区域,免疫印迹分析单元通过特异性的抗体孵育和洗脱,对靶蛋白分子进行荧光或发光基团标记并检测其信号。在微流控芯片上集成循环肿瘤细胞的细胞分选、纯化、单细胞捕获、凝胶电泳与免疫印迹分析等多种功能单元,极大提高对循环肿瘤细胞的分离速度、分析速度和自动化程度。
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公开(公告)号:CN113358875B
公开(公告)日:2024-06-18
申请号:CN202110441094.6
申请日:2021-04-23
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/531 , G01N21/33 , G01N21/35
Abstract: 本发明提供了一种孔径可控的复合型聚丙烯酰胺凝胶及其制备方法。本发明第一方面提供了一种孔径可控的复合型聚丙烯酰胺凝胶的制备方法,包括如下步骤:将氧化石墨烯、丙烯酸、二氯亚砜、对苯二酚和三乙胺混合,并在保护气体氛围下合成丙烯酸功能化石墨烯;将丙烯酸功能化石墨烯溶于二甲基甲酰胺中,得到功能化石墨烯的二甲基甲酰胺溶液;将功能化石墨烯的二甲基甲酰胺溶液、丙烯酰胺、N‑异丙基丙烯酰胺水溶液、Tris‑HCl、SDS、TritonX‑100、光敏化合物MAP‑mPyTC以及APS和TEMED混合得到复合型聚丙烯酰胺凝胶。根据本发明提供的制备方法制备得到的复合型聚丙烯酰胺凝胶,可根据温度调控其尺寸,并且凝胶尺寸调控可逆,所需变化时间短。
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公开(公告)号:CN113866425A
公开(公告)日:2021-12-31
申请号:CN202111120430.3
申请日:2021-09-24
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/532 , G01N27/447 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开了单细胞蛋白数字化成像检测方法,涉及蛋白质检测领域,本发明通过使用设计好的菲林掩膜版制备芯片模板,合成蛋白质固定凝胶光敏剂,配合芯片模板制备具有光敏感型蛋白质固定凝胶的蛋白质印迹芯片,加入样品后,根据单细胞免疫印迹(scWB)程序进行电泳,并通过UV交联固定蛋白质,使用标记抗体进行目标蛋白免疫印迹检测,观察分析结果。本发明是一种能够高通量、时间短、能够稳定保存数据和数字化处理检测结果、便携小巧、功能稳定且成本低的单细胞蛋白质检测手段。
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公开(公告)号:CN112964881A
公开(公告)日:2021-06-15
申请号:CN202110244958.5
申请日:2021-03-05
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/543 , G01N21/31 , G01N21/64 , G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种高通量高灵敏度的单细胞转染蛋白质分析芯片,涉及微芯片分析平台领域,所述芯片由载体与光敏感型蛋白质固定凝胶涂层组成,其中所述涂层由疏水隔带分隔为一个以上的检测区域,所述检测区域中设置细胞阱。本发明选用四氮唑为光敏基团的聚丙烯酰胺凝胶作为光敏感型蛋白质固定凝胶,易通过紫外光照与蛋白质交联,对低丰度蛋白质具有灵敏、精准的检测效果,可以真正实现对转染单细胞及稀有细胞的基因表达检测;且区域化的微芯片设计,可以实现多靶点、多目标的同时检测,对外源基因表达的分析及转染条件的评估研究具有重要意义。
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公开(公告)号:CN112390763A
公开(公告)日:2021-02-23
申请号:CN201910754602.9
申请日:2019-08-15
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07D257/04 , C07D403/04 , C07D405/04 , C07D409/04 , C07K17/02 , G01N21/64 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种光敏性化合物及其制备方法和应用及含有其的光敏性蛋白质固定凝胶。光敏性化合物的结构式如式(I)所示,其中,R为吸电子基团。该光敏性化合物的制备方法,包括以下步骤:将N‑(3‑氨基丙基)甲基丙烯酸盐盐酸盐溶解于有机溶剂中,向其中加入含吸电子基团的四氮唑类化合物和三乙胺,搅拌回流反应10~20h后进行纯化处理得到所述光敏性化合物。光敏性化合物是以四氮唑环为光敏基团,光敏性蛋白质固定凝胶包括作为光敏成分的此化合物;将蛋白质分离功能和蛋白质固定功能集合于一体,可实现在凝胶内部原位固定蛋白质,稳定固定蛋白质,更加强力高效,不易被洗脱造成蛋白质损失。
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