一种水稻温敏不育基因tms5的功能标记及其应用

    公开(公告)号:CN105002176B

    公开(公告)日:2017-12-01

    申请号:CN201510547897.4

    申请日:2015-08-28

    Abstract: 本发明提供了一种用于水稻温敏不育基因tms5的功能标记、利用该功能标记检验样品是否为含有tms5基因的方法、利用该功能标记基因判断两系温敏水稻的种子纯度的方法以及其在培育不育系中的应用。本发明根据水稻tms5基因突变位点序列,在PCR引物中引入错配碱基,使含有tms5基因(突变型)的水稻PCR扩增产物出现一个限制性内切酶Rsa I的酶切位点,而不含有tms5基因(野生型)的水稻PCR产物则没有这一酶切位点。通过Rsa I酶切PCR产物,可将含有tms5基因的水稻PCR扩增产物酶切成两个片段,而不含的却无法被切开,从而进行区分。本发明采用直接酶切tms5扩增产物的设计,与前人相比,一方面简化了检测流程,另一方面也避免了假阳性结果的出现。

    水稻低温强诱导启动子POscold6的克隆及应用

    公开(公告)号:CN104845973B

    公开(公告)日:2017-10-13

    申请号:CN201510325012.6

    申请日:2015-06-11

    Abstract: 本发明公开一种水稻低温强诱导启动子POscold6的克隆及应用。本发明还提供了含有该启动子的表达盒、植物表达载体、宿主菌和转化子并将其应用于植物基因工程中。本申请的发明人通过对水稻品种日本晴的特定基因组进行扩增、分离、分析、利用以及实验验证,从而获得并验证了具有特殊功能的一段DNA序列——水稻低温强诱导启动子POscold6。本发明提供的启动子能够特异地驱动外源基因在低温/冷胁迫条件下在植物中表达,因此在基因工程中用该启动子替代组成型启动子驱动抗寒基因,既可以有效的提高低温下转基因植物的耐寒性,又将避免常温下抗寒基因的无效表达,从而达到对抗寒基因的最佳利用。

    一种启动子批量捕获方法
    153.
    发明公开

    公开(公告)号:CN107091929A

    公开(公告)日:2017-08-25

    申请号:CN201610103879.1

    申请日:2016-02-25

    CPC classification number: G01N33/68 C12Q1/6851 C12Q1/6897 C12Q2531/113

    Abstract: 本发明提供一种启动子批量捕获方法,所述方法利用植物基因转录时在启动子区域所形成的“DNA‑蛋白因子”的复合体,应用改进的染色体免疫共沉淀技术,把包含有未知植物基因启动子片段的DNA分拣出来。本发明利用蛋白因子OsTBP2和OsTFIIB紧密结合启动子上的TATA盒短链保守序列启动转录这一特性,通过生成这两种因子的特异性抗体,结合染色质免疫共沉淀技术(ChIP),专向捕捉未知植物基因启动子片段的技术。本技术利用大多数启动子都含有的一段TATA盒短链保守序列这一特点,结合近年来新开发的染色质免疫共沉淀技术(ChIP)来分离未知的植物基因启动子片段的技术,比较容易实现植物启动子的大规模捕获,具有较高的商业价值。

    水稻雄蕊和浆片表达启动子STA4及其应用

    公开(公告)号:CN104293792B

    公开(公告)日:2017-06-16

    申请号:CN201410614239.8

    申请日:2014-11-04

    Abstract: 本发明提供了一种水稻雄蕊和浆片表达启动子,本发明的水稻雄蕊和浆片表达启动子包含:如序列表SEQ ID No 1或2中所述的核苷酸序列或其衍生物。本发明还提供了利用该启动子而构建的重组表达载体、表达盒以及宿主菌。通过将本发明的启动子连接到待表达的基因并利用载体转入到水稻植株中,能够驱动外源基因在水稻的雄蕊和浆片中表达。在雄蕊和浆片细胞中特异表达的启动子,在研究水稻受精作用将会是一个有用的工具。随着分子生物学和发育生物学的发展,人们对这种特异表达启动子的需求日益强烈,本发明提供的启动子刚好满足了这样的需求。其尤其是对如雄性不育植株培养、育种等方面具有非常巨大的潜在商业价值。

    一种获取植物雄蕊表达启动子STA3的方法及相应启动子

    公开(公告)号:CN104357449B

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201410614236.4

    申请日:2014-11-04

    Abstract: 本发明提供了一种获取植物雄蕊表达启动子STA3的方法,所述方法包括如下步骤:制备正、反向引物;以水稻品种日本晴的DNA序列为模板,利用所述正向引物和所述反向引物,对日本晴的DNA序列中的一目的片段进行PCR扩增;对所述目的片段进行加A并连接PGEM-T-Easy载体;将目的片段转入到激活的感受态细胞中;挑取单克隆摇菌液提质粒;回收所述目的片段。本发明的分离方法能够从日本晴水稻中有效地分离出能够驱动雄蕊中的外源基因表达的启动子。本发明的方法简单易行,能够为人们提供现有技术中尚未发现的STA3启动子。该启动子STA3能够调控外源基因在植株的雄蕊中集中表达,具有显著的研究和商业价值。

    一种分离出的胚乳不表达启动子SAFES6及其应用

    公开(公告)号:CN106148346A

    公开(公告)日:2016-11-23

    申请号:CN201610560043.4

    申请日:2016-07-15

    Abstract: 本发明涉及一种分离出的胚乳不表达启动子SAFES6及其应用。具体地,本发明提供了能够在植物组织中而不在胚乳中转录异源核酸序列的启动子SAFES6及制备和使用该启动子的方法。本发明还涉及含有该启动子的表达盒、重组表达载体和获得相应转基因植物的方法。本发明所提供的水稻启动子SAFES6能够调控基因在植株中非胚乳部位集中表达,而在胚乳中不表达,本发明利用该启动子在不改变植物胚乳性状情况下改良植物生长特性,改善水稻的生长性能,同时降低了水稻的食用安全风险,进而可以获得理想的转基因植株,有助转基因水稻的商业推广。

    一种水稻耐镉基因OsGSTU37及其应用

    公开(公告)号:CN105755021A

    公开(公告)日:2016-07-13

    申请号:CN201610249072.9

    申请日:2016-04-19

    CPC classification number: C12N9/1088 C12N15/8205 C12N15/8271 C12Y205/01018

    Abstract: 本发明公开了一种水稻耐镉基因OsGSTU37及其应用。该水稻耐镉基因OsGSTU37序列如序列表中SEQ ID NO:1中所示,其编码的蛋白质谷胱甘肽S?转移酶(glutathione S?transferase,GSTs)氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示。本发明通过酵母异位表达证明OsGSTU37基因具有对镉毒害耐受的特性。本发明通过构建水稻耐镉基因OsGSTU37的敲除系和过表达系,与野生型水稻做种子萌发对比实验,发现在镉胁迫下OsGSTU37的敲除系发芽较差,而OsGSTU37的过表达系和野生型均能发芽,且OsGSTU37的过表达系发芽生长优于野生型。同样说明OsGSTU37在耐镉机制中具有重要作用。本发明构建耐镉基因OsGSTU37过表达载体,并将其转化植物,获得耐镉的植物品种,提高植物对镉胁迫的抗性,为耐镉的作物新品种的培育提供了理论基础。

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