一种检测混合体系内目标分子浓度的方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN112986551A

    公开(公告)日:2021-06-18

    申请号:CN202011434928.2

    申请日:2020-12-10

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 一种检测混合体系内目标分子浓度的方法及试剂盒。本发明涉及一种定量检测目标分子X浓度的方法,其包括:向包括有所述目标分子X的反应系统中添加报告分子A并持续至少第一给定时间,其中所述报告分子A与目标分子X之间有特异结合活性;向所述反应系统中添加竞争分子B,所述竞争分子B与所述报告分子A之间具有特异结合活性而与所述目标分子X不具有任何结合活性,当不存在目标分子X时,所述竞争分子B与所述报告分子A结合时发出给定强度的荧光强度L0;将体系混匀并等待至少第二给定时间后检测所述系统的荧光强度L;在理想浓度范围内,目标分子X的浓度可以与L0‑L值建立线性关系;以上述建立的线性关系作为标准曲线,可以由实际测得的荧光强度变化值L0‑L推算出目标分子X的浓度。本发明还涉及与上述方法搭配的试剂盒。

    液滴进样器以及使用其的液滴进样方法

    公开(公告)号:CN108339578B

    公开(公告)日:2020-07-07

    申请号:CN201710060887.7

    申请日:2017-01-25

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明涉及一种液滴进样器以及使用其的液滴进样方法。该液滴进样器是用于微流控制领域的液滴进样器,其可以将微量液体样品从开放体系转移至封闭的微管道体系,尤其是以油包水的形式将微量液体样品包入介质油中并在微管道体系中运输。该液滴进样器包括样品通道,其用于吸入并输送液体样品,该样品通道与提供负压的模块连接;介质通道,其用于推送介质,该介质通道与提供正压的模块连接;样品通道以及介质通道流体连通。

    一种碱性黄嘌呤脱氢酶及其在检测试剂盒中的应用

    公开(公告)号:CN106318918B

    公开(公告)日:2020-02-21

    申请号:CN201510406718.5

    申请日:2015-07-10

    Abstract: 本发明公开了一种碱性黄嘌呤脱氢酶及其在检测试剂盒中的应用。本发明公开蛋白,包括黄嘌呤脱氢酶大亚基和黄嘌呤脱氢酶小亚基。本发明提供的碱性黄嘌呤脱氢酶,为首次报道的经过实验证实的鲍氏不动杆菌属黄嘌呤脱氢酶类。本发明提供的碱性黄嘌呤脱氢酶可以适应碱性测定条件的样品,比已有报道具有更高的底物亲和力和最高的催化效率,可以更加灵敏地降解和检测次黄嘌呤/黄嘌呤和PNP酶和5`‑核苷酸酶,与PNP酶联用检测无机磷酸和腺苷脱氨酶,有利于提高酶催化效率、降低成本,更加有利于工业应用过程。本发明还提供将黄嘌呤脱氢酶用于检测包括血清和尿液在内的样品中黄嘌呤/次黄嘌呤含量的方法。本发明进一步提供检测样品中黄嘌呤/次黄嘌呤含量的检测试剂盒。本发明所提供检测方法和检测试剂盒不受样品中溶解氧影响,比现有技术检测范围更宽、灵敏度更高,便于推广应用。

    去抗凝肝素衍生物及其用于炎症性肠病的治疗

    公开(公告)号:CN108424474A

    公开(公告)日:2018-08-21

    申请号:CN201710815567.8

    申请日:2017-09-12

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明涉及一种去抗凝肝素衍生物及其用于炎症性肠病的治疗,该去抗凝肝素衍生物的抗Xa因子小于等于70IU/mg,优选小于等于60IU/mg,优选抗小于等于50IU/mg,优选小于等于40IU/mg,优选小于等于30IU/mg,优选小于等于20IU/mg,优选小于等于10IU/mg,其抗IIa因子小于等于175IU/mg,优选小于等于170IU/mg,优选小于等于160IU/mg,优选小于等于150IU/mg,优选小于等于140IU/mg,优选小于等于130IU/mg,优选小于等于120IU/mg,优选小于等于110IU/mg,优选小于等于100IU/mg,优选小于等于90IU/mg,优选小于等于80IU/mg,优选小于等于70IU/mg,优选小于等于60IU/mg,优选小于等于50IU/mg,优选小于等于40IU/mg,优选小于等于30IU/mg,优选小于等于20IU/mg,优选小于等于10IU/mg。

    一种生产紫色杆菌素的工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN104694448B

    公开(公告)日:2018-08-03

    申请号:CN201310656314.2

    申请日:2013-12-06

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了种生产紫色杆菌素的工程菌及其应用。本发明提供的工程菌,是将大肠杆菌进行如下(a)和(b)和(c)的改造得到的重组菌:(a)沉默抑制色氨酸生成的蛋白的编码基因;(b)导入参与色氨酸生成的蛋白的编码基因;(c)导入参与紫色杆菌素途径的各个蛋白的编码基因,所述紫色杆菌素途径为以色氨酸为底物生成紫色杆菌素的途径。本发明解决了紫色杆菌素发酵过程需要添加色氨酸的问题,以葡萄糖作为主要碳源生产紫色杆菌素,大幅降低了发酵制备紫色杆菌素的成本。

    微流体测定装置及使用其的测定方法

    公开(公告)号:CN108344876A

    公开(公告)日:2018-07-31

    申请号:CN201710060888.1

    申请日:2017-01-25

    Applicant: 清华大学

    CPC classification number: G01N35/00 G01N35/10

    Abstract: 本发明涉及一种微流体测定装置及使用其的测定方法,该微流体测定装置包括:液滴进样器,流动通道,检测系统,其中,所述液滴进样器包括:样品通道,其用于吸入并输送液体样品,该样品通道与提供负压的模块连接;介质通道,其用于推送介质,该介质通道与提供正压的模块连接;样品通道以及介质通道流体连通,并且所述液滴进样器与微流体流动通道流体连通,从液滴进样器进入的液体样品进入流动通道并能够在流动通道中移动,检测系统对进入流动通道的液体样品进行检测。

    L-脯氨酸4-羟化酶
    148.
    发明公开

    公开(公告)号:CN108220259A

    公开(公告)日:2018-06-29

    申请号:CN201611198550.4

    申请日:2016-12-22

    Applicant: 清华大学

    Inventor: 张翀 李梅 邢新会

    Abstract: 本发明涉及一种L‑脯氨酸4‑羟化酶突变体,以及编码其的DNA、具有该DNA的重组载体,以及生产反式‑(2S,4R)‑4‑羟基‑L‑脯氨酸的方法。该L‑脯氨酸4‑羟化酶突变体的序列为在SEQ ID No.:3所示的序列中具有如下突变中的一种或多种:91位从组氨酸到谷氨酰胺的突变;228位从缬氨酸到苯丙氨酸的突变;89位从酪氨酸到苯丙氨酸的突变;228位从缬氨酸到丙氨酸的突变;54位从缬氨酸到丙氨酸的突变;53位从苏氨酸到丙氨酸的突变;152位从亮氨酸到谷氨酰胺的突变;165位从天冬氨酸到谷氨酸的突变,以及第266位从苯丙氨酸到亮氨酸的突变;53位从苏氨酸到丙氨酸的突变,以及第272位从缬氨酸到异亮氨酸的突变;5位从苏氨酸到丝氨酸的突变,以及第171位从亮氨酸到谷氨酰胺的突变。

    一种碱性黄嘌呤脱氢酶及其在检测试剂盒中的应用

    公开(公告)号:CN106318918A

    公开(公告)日:2017-01-11

    申请号:CN201510406718.5

    申请日:2015-07-10

    Abstract: 本发明公开了一种碱性黄嘌呤脱氢酶及其在检测试剂盒中的应用。本发明公开蛋白,包括黄嘌呤脱氢酶大亚基和黄嘌呤脱氢酶小亚基。本发明提供的碱性黄嘌呤脱氢酶,为首次报道的经过实验证实的鲍氏不动杆菌属黄嘌呤脱氢酶类。本发明提供的碱性黄嘌呤脱氢酶可以适应碱性测定条件的样品,比已有报道具有更高的底物亲和力和最高的催化效率,可以更加灵敏地降解和检测次黄嘌呤/黄嘌呤和PNP酶和5`-核苷酸酶,与PNP酶联用检测无机磷酸和腺苷脱氨酶,有利于提高酶催化效率、降低成本,更加有利于工业应用过程。本发明还提供将黄嘌呤脱氢酶用于检测包括血清和尿液在内的样品中黄嘌呤/次黄嘌呤含量的方法。本发明进一步提供检测样品中黄嘌呤/次黄嘌呤含量的检测试剂盒。本发明所提供检测方法和检测试剂盒不受样品中溶解氧影响,比现有技术检测范围更宽、灵敏度更高,便于推广应用。

    一种制备紫色杆菌素的方法及其专用菌

    公开(公告)号:CN102703367B

    公开(公告)日:2014-04-16

    申请号:CN201110075105.X

    申请日:2011-03-28

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种制备紫色杆菌素的方法及其专用菌。该重组甲基扭曲杆菌,是将紫色杆菌素生物合成相关基因簇导入宿主甲基扭曲杆菌中得到的。本发明的制备紫色杆菌素的方法成本低廉,一方面发酵使用的培养基成分简单、成本低廉,另一方面本发明方法只需以甲醇作为碳源,就可以发酵得到紫色杆菌素,甲醇是能够通过石油或者生物可再生资源合成的,价格低廉,本发明方法实现了用廉价可再生资源工业化生产紫色杆菌素;本发明方法操作简单,产率高,可达0.15g/l发酵液。本发明的重组菌产紫色杆菌素的效果好。因此,本发明重组菌及紫色杆菌素的制备方法具有广阔的应用前景。

Patent Agency Ranking