公开(公告)号：CN112941153B

公开(公告)日：2022-09-09

申请号：CN202011434917.4

申请日：2020-12-10

Applicant: 清华大学

Inventor： 张翀 ,  牛晨启 ,  邢新会 ,  刘厚方

IPC: C12Q1/6816

Abstract: 本发明涉及一种DNA检测方法，包括：利用含有Cas12a/crRNA复合物的反应体系与含有待测dsDNA的样品进行反应，所述dsDNA含有PAM序列；将与所述样品反应后的反应体系添加至经非目标ssDNA连接的磁颗粒体系；检测磁颗粒体系磁信号的变化，其中，待测dsDNA特异性识别Cas12a/crRNA复合物从而激活Cas12a/crRNA复合物的切割非目标ssDNA的活性。本发明所涉及的方法将CRISPR‑Cas12a的精准靶向能力和TMR生物传感器的超高灵敏度的优点相结合，克服了传统方法中光学信号抗干扰能力差的缺点，且获得了更高的灵敏度。此外，由于crRNA的设计中与靶序列互补的20个碱基是可编程的，TMR传感器的样品需求量小，成本低。因此，具有很高的应用和商业价值。

公开(公告)号：CN112941153A

公开(公告)日：2021-06-11

申请号：CN202011434917.4

申请日：2020-12-10

Applicant: 清华大学

Inventor： 张翀 ,  牛晨启 ,  邢新会 ,  刘厚方

IPC: C12Q1/6816

Abstract: 本发明涉及一种DNA检测方法，包括：利用含有Cas12a/crRNA复合物的反应体系与含有待测dsDNA的样品进行反应，所述dsDNA含有PAM序列；将与所述样品反应后的反应体系添加至经非目标ssDNA连接的磁颗粒体系；检测磁颗粒体系磁信号的变化，其中，待测dsDNA特异性识别Cas12a/crRNA复合物从而激活Cas12a/crRNA复合物的切割非目标ssDNA的活性。本发明所涉及的方法将CRISPR‑Cas12a的精准靶向能力和TMR生物传感器的超高灵敏度的优点相结合，克服了传统方法中光学信号抗干扰能力差的缺点，且获得了更高的灵敏度。此外，由于crRNA的设计中与靶序列互补的20个碱基是可编程的，TMR传感器的样品需求量小，成本低。因此，具有很高的应用和商业价值。

公开(公告)号：CN112986551A

公开(公告)日：2021-06-18

申请号：CN202011434928.2

申请日：2020-12-10

Applicant: 清华大学

Inventor： 张翀 ,  牛晨启 ,  邢新会

IPC: G01N33/53

Abstract: 一种检测混合体系内目标分子浓度的方法及试剂盒。本发明涉及一种定量检测目标分子X浓度的方法，其包括：向包括有所述目标分子X的反应系统中添加报告分子A并持续至少第一给定时间，其中所述报告分子A与目标分子X之间有特异结合活性；向所述反应系统中添加竞争分子B，所述竞争分子B与所述报告分子A之间具有特异结合活性而与所述目标分子X不具有任何结合活性，当不存在目标分子X时，所述竞争分子B与所述报告分子A结合时发出给定强度的荧光强度L0；将体系混匀并等待至少第二给定时间后检测所述系统的荧光强度L；在理想浓度范围内，目标分子X的浓度可以与L0‑L值建立线性关系；以上述建立的线性关系作为标准曲线，可以由实际测得的荧光强度变化值L0‑L推算出目标分子X的浓度。本发明还涉及与上述方法搭配的试剂盒。