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公开(公告)号:CN108178777A
公开(公告)日:2018-06-19
申请号:CN201711464700.6
申请日:2017-12-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07H17/08 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/795 , C07K16/44 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种泰乐菌素半抗原、人工抗原与抗体及其制备方法和应用。具体是将泰勒菌素大环侧链的乙醛基官能团作为衍生偶联位点,通过一步氧化法将醛基转化为羧基,即得到羧甲基化偶联手臂的泰勒菌素半抗原。所得半抗原与骨架结构重叠度高,为泰乐菌素特征结构的暴露和高特异性抗体的产生做好了基础。进一步将半抗原与载体蛋白偶联得到人工抗原,并免疫动物获得泰勒菌素高特异性抗体,所建立的酶联免疫方法准确度高,灵敏度好,检测限达到0.051 ng/mL,半抑制浓度为1.39 ng/mL,且操作简单,成本低,非常适合于现场检测,可用于环境和食品样品中泰乐菌素的快速有效检测,具有广阔的应用前景和经济价值。
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公开(公告)号:CN104897897B
公开(公告)日:2017-03-08
申请号:CN201510287378.9
申请日:2015-05-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明属于生物传感器技术领域,具体公开了一种利用免疫生物传感器检测组胺的方法。所述方法包括如下步骤:S1. 免疫生物传感器的制备,检测该传感器的工作曲线,待用;S2. 组胺单克隆抗体的制备;S3. 酶标抗体的制备;S4. 传感器检测组胺:将等体积的待测样液和S3制得的酶标抗体混匀后,滴涂在电极工作区域,将所述电极浸在测试液中,并添加过氧化氢,通过前后峰电流值的变化大小定量测定组胺浓度。该方法具有检测限低、灵敏度高、线性范围广、适用于现场检测等优点,可用于样品中组胺检测,适用于在非实验室设置中测定海产食品和鱼组织中的组胺值,实现监管部门的现场快速监测,为海产品安全生产与消费提供残留检测的技术支撑。
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公开(公告)号:CN106317009A
公开(公告)日:2017-01-11
申请号:CN201610675358.3
申请日:2016-08-16
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D311/86 , C07D311/88 , C07K14/765 , C07K16/44 , C07K16/06 , G01N33/52
CPC classification number: C07D311/86 , C07D311/88 , C07K14/765 , C07K16/065 , C07K16/44 , C07K19/00 , G01N33/52
Abstract: 本发明属于免疫检测技术领域,具体公开了一种呫吨聚氨基甲酸乙酯半抗原、人工抗原及其应用。所述呫吨聚氨基甲酸乙酯半抗原具有式I)所示结构,将呫吨聚氨基甲酸乙酯半抗原与载体蛋白偶联即可得到呫吨聚氨基甲酸乙酯人工抗原,用上述人工抗原免疫实验动物,使其机体产生特异地针对呫吨聚氨基甲酸乙酯的抗体;所述抗体可以特异性识别氨基甲酸乙酯占吨醇衍生物—呫吨聚氨基甲酸乙酯,用于间接检测食品中氨基甲酸乙酯的含量。
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公开(公告)号:CN105353095A
公开(公告)日:2016-02-24
申请号:CN201510782599.3
申请日:2015-11-16
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于免疫检测技术领域,公开了一种西地那非及其结构类似物的免疫检测方法,即以巯基西地那非半抗原制备人工抗原,再制备得到抗体,并用于检测西地那非及其结构类似物,该方法克服了现有检测西地那非技术的缺陷和步骤,对西地那非的最大检测范围为0.024~1.21ng/mL,灵敏度为0.17ng/mL,检出限为0.008ng/mL,回收率为86.0~90.8%,该方法检测快速、大大缩短了检测时间,不考虑检测人员操作熟练程度的影响,整个检测过程仅仅需要80min左右即可完成,且检出限更低、灵敏度更高。
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公开(公告)号:CN104897897A
公开(公告)日:2015-09-09
申请号:CN201510287378.9
申请日:2015-05-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/577
CPC classification number: G01N33/577
Abstract: 本发明属于生物传感器技术领域,具体公开了一种利用免疫生物传感器检测组胺的方法。所述方法包括如下步骤:S1.免疫生物传感器的制备,检测该传感器的工作曲线,待用;S2.组胺单克隆抗体的制备;S3.酶标抗体的制备;S4.传感器检测组胺:将等体积的待测样液和S3制得的酶标抗体混匀后,滴涂在电极工作区域,将所述电极浸在测试液中,并添加过氧化氢,通过前后峰电流值的变化大小定量测定组胺浓度。该方法具有检测限低、灵敏度高、线性范围广、适用于现场检测等优点,可用于样品中组胺检测,适用于在非实验室设置中测定海产食品和鱼组织中的组胺值,实现监管部门的现场快速监测,为海产品安全生产与消费提供残留检测的技术支撑。
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公开(公告)号:CN104865248A
公开(公告)日:2015-08-26
申请号:CN201510280178.0
申请日:2015-05-27
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N21/78
Abstract: 本发明公开了一种用于检测农药残留的重组家蚕乙酰胆碱酯酶的制备方法。本发明将家蚕乙酰胆碱酯酶基因与锚定蛋白基因AGα1相连插入到酵母表达载体pPIC9K中构建成表面展示载体并转化毕赤酵母GS115,筛选阳性重组子,并利用甲醇对阳性重组子进行诱导表达,表达结束后离心去除上清液,将菌体冷冻干燥即得重组家蚕乙酰胆碱酯酶。制备得到的重组酶稳定性好、操作简单、检出限低、灵敏度高、尤其成本低廉,可在家庭、市场、蔬菜生产基地等进行现场检测,非常适合大量样品的筛查,具有重要的实际应用推广意义。
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公开(公告)号:CN103290124B
公开(公告)日:2014-12-17
申请号:CN201310206129.3
申请日:2013-05-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及食品安全检测领域,具体地,公开了一种卡那霉素A酶联适配体检测方法及其应用。本发明通过链霉亲和素-生物素-适配体模式实现对卡那霉素A的测定,同时优化了检测条件,最终得到检测限最低的条件,该条件具有高灵敏、高特异性。该方法能够特异性检测牛奶、猪肉、鸡肉、猪肝、蜂蜜中的卡那霉素A,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN103290124A
公开(公告)日:2013-09-11
申请号:CN201310206129.3
申请日:2013-05-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及食品安全检测领域,具体地,公开了一种卡那霉素A酶联适配体检测方法及其应用。本发明通过链霉亲和素-生物素-适配体模式实现对卡那霉素A的测定,同时优化了检测条件,最终得到检测限最低的条件,该条件具有高灵敏、高特异性。该方法能够特异性检测牛奶、猪肉、鸡肉、猪肝、蜂蜜中的卡那霉素A,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN103160515A
公开(公告)日:2013-06-19
申请号:CN201110420334.0
申请日:2011-12-15
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于杂交瘤细胞的单链抗体的制备方法。本发明的制备方法,步骤为:以杂交瘤细胞总mRNA为模板反转录得cDNA,选用简并性低的通用引物扩增全套抗体重链可变区和轻链可变区基因;将扩增出的重、轻链可变区基因序列输入IMGT数据库进行分析,排除来源瘤细胞的抗体基因和无义基因,得到候选重链和轻链可变区基因;将该基因翻译成氨基酸序列后进行三维结构同源模建,获得单链抗体的三维模拟结构,与相应抗原靶标分子进行分子对接分析;分析结果正确的候选重链和轻链通过重叠延伸PCR法拼接成单链抗体基因,进行表达及抗体活性鉴定。本发明的制备方法适合所有源于单克隆杂交瘤细胞的单链抗体制备,过程简易、快速,产品质量高。
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公开(公告)号:CN103091494A
公开(公告)日:2013-05-08
申请号:CN201310013604.5
申请日:2013-01-14
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/543 , G01N21/76
Abstract: 本发明公开了一种黄曲霉毒素M1的化学发光酶联免疫检测试剂盒及使用方法,属于化学发光酶联免疫检测技术领域。该检测试剂盒包括包被有黄曲霉毒素M1抗原的化学发光酶标板,黄曲霉毒素M1标准品,黄曲霉毒素M1抗体,酶标抗抗体,化学发光液A液和B液。该试剂盒的使用方法包括如下步骤:(1)待测样品的前处理;(2)依次加入黄曲霉毒素M1标准品溶液或样品、黄曲霉毒素M1抗体,竞争反应后加入酶标抗抗体,最后加入化学发光液通过化学发光免疫分析仪进行黄曲霉毒素M1的定量检测;(3)结果处理与分析。本发明提供的检测试剂盒灵敏度高、稳定性好,适合大量样品的筛查,具有重要的实际应用推广意义。
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