一种生产脱氧紫色杆菌素的方法及其专用重组菌

    公开(公告)号:CN101319219B

    公开(公告)日:2010-12-01

    申请号:CN200810116601.3

    申请日:2008-07-11

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种生产脱氧紫色杆菌素的方法及其专用重组菌。该方法是将脱氧紫色杆菌素合成相关基因簇导入大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RIL中获得的重组菌,该重组菌以色氨酸为底物发酵生产脱氧紫色杆菌素。其中,脱氧紫色杆菌素合成相关基因簇,是将由VioA、VioB、VioC、VioD和VioE组成的紫色杆菌素合成基因簇中的VioD基因敲除,获得重组基因簇。所述重组菌是将所述的基因簇导入大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RIL中获得的产脱氧紫色杆菌素的重组菌。本发明生产脱氧紫色杆菌素的方法产率较高,可以达到0.17g/L发酵液,且提取方便,分离纯化简单。

    一种去除环境中甲烷的方法

    公开(公告)号:CN101670238A

    公开(公告)日:2010-03-17

    申请号:CN200910092346.8

    申请日:2009-09-07

    Applicant: 清华大学

    CPC classification number: Y02A50/2358 Y02P20/59

    Abstract: 本发明公开了一种去除环境中甲烷的方法。本发明提供的方法包括如下步骤:1)采集煤矿或垃圾填埋场的土样;2)将步骤1)的土样加入NMS培养基中,于密封瓶中培养;初始时,所述密封瓶中,NMS培养基、甲烷和空气的体积比为(5-30)∶(5-40)∶(30-80);每24-72小时向密封瓶中置换入甲烷,使所述密封瓶中,NMS培养基、甲烷和空气的体积比为(5-30)∶(5-40)∶(30-80);3)每8-12天接种步骤2)的培养液至新的NMS培养基,进行传代;步骤2)的培养液与NMS培养基的体积比为(5-15)∶(95-85);传至10代以上,得到甲烷氧化混合菌;4)培养步骤3)得到的甲烷氧化混合菌,从而去除环境中的甲烷。本发明中所提供的去除甲烷的方法操作简单,去除甲烷的能力强,应用范围广。本发明对于煤矿瓦斯气体去除和垃圾填埋场填埋气减排等有广阔的应用前景。

    一种甲烷氧化混合菌的保存方法

    公开(公告)号:CN101638632A

    公开(公告)日:2010-02-03

    申请号:CN200910092358.0

    申请日:2009-09-07

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种甲烷氧化混合菌的保存方法。本发明提供的甲烷氧化混合菌的保存方法,包括如下步骤:将甲烷氧化混合菌加入NMS培养基中,于密封瓶中2-6℃保存;初始时,所述密封瓶中,NMS培养基、甲烷和空气的体积比为(5-30)∶(5-40)∶(30-80)。本发明提供的方法没有引入其他碳源,可以稳定地保持混合菌群的结构和功能,并且操作方便,可以快速启动。将在甲烷氧化混合菌的保存及其工业化应用中发挥巨大作用,应用前景广阔。

    融合肝素酶及其编码基因
    95.
    发明公开

    公开(公告)号:CN101608179A

    公开(公告)日:2009-12-23

    申请号:CN200910090167.0

    申请日:2009-07-29

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种融合肝素酶。该融合肝素酶是如下a)或b)的蛋白:a)序列表中序列1的第8-1016所示的氨基酸序列组成的蛋白质;b)在序列表中序列1的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有肝素酶活性的由a)衍生的蛋白质。上述蛋白的编码基因也属于本发明的保护范围之内。本发明产生的三重融合蛋白的酶活通过摇瓶培养可达723.1IU/L培养基,比酶活可达1.548IU/mg蛋白。本发明可以利用GFP蛋白实现菌体浓度和酶活的快速在线检测。

    融合肝素酶及其编码基因与制备方法

    公开(公告)号:CN101608178A

    公开(公告)日:2009-12-23

    申请号:CN200910090166.6

    申请日:2009-07-29

    Applicant: 清华大学

    CPC classification number: C12N9/88 C08B37/0075

    Abstract: 本发明公开了一种融合肝素酶。该融合肝素酶是如下a)或b)的蛋白:a)序列表中序列1的第8-1015所示的氨基酸序列组成的蛋白质;b)在序列表中序列1的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有肝素酶活性的由a)衍生的蛋白质。上述蛋白的编码基因也属于本发明的保护范围之内。本发明产生的三重融合蛋白的酶活通过摇瓶培养可达1214.4IU/L培养基,比酶活可达2.839IU/mg蛋白。本发明可以利用GFP蛋白实现菌体浓度和酶活的快速在线检测。

    一种生物制氢方法及其专用菌

    公开(公告)号:CN101597587A

    公开(公告)日:2009-12-09

    申请号:CN200910088408.8

    申请日:2009-06-29

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种生物制氢方法及其专用菌。该专用菌是向产氢的宿主菌中导入激发所述宿主菌厌氧发酵且与所述宿主菌厌氧代谢正相关的基因,得到的含有所述基因的重组菌。实验证明,本发明重组菌的产氢能力与对照菌比有了显著的提高。因此,本发明重组菌与生物制氢方法在生物制氢领域中有广阔的应用前景,对节约能源具有重要的意义。

    生产紫色杆菌素的方法及重组菌

    公开(公告)号:CN101386834A

    公开(公告)日:2009-03-18

    申请号:CN200810225223.2

    申请日:2008-10-28

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了生产紫色杆菌素的方法及重组菌。本发明的重组菌,是将紫色杆菌素合成相关基因簇导入大肠杆菌或恶臭假单孢菌中获得的重组菌;所述紫色杆菌素合成相关基因簇编码其氨基酸序列为序列表中序列2、序列3、序列4、序列5和序列6的五种蛋白。本发明生产紫色杆菌素的方法,是以L-色氨酸为底物利用所述的重组菌发酵生产紫色杆菌素。本发明方法生产紫色杆菌素的产率高,可用于工业化生产。

    一种重组产气肠杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN1587388A

    公开(公告)日:2005-03-02

    申请号:CN200410074437.6

    申请日:2004-09-15

    Applicant: 清华大学

    Inventor: 张翀 邢新会

    Abstract: 本发明公开了一种重组产气肠杆菌及其应用,其目的是提供一种可发荧光的重组产气肠杆菌及其应用。本发明所提供的重组产气肠杆菌,是将含有绿色荧光蛋白基因的表达载体导入产气肠杆菌中得到的。本发明的重组产气肠杆菌可用于大规模发酵制备氢气,技术可行性强,此外还可对该菌进行荧光定量追踪,便于进行生产的工业化控制,因而本发明具有较高的实际应用价值和广阔的工业应用前景。

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