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公开(公告)号：CN108130339A
公开(公告)日：2018-06-08
申请号：CN201810026881.2
申请日：2018-01-11
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种适用于吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007的高效转化方法，包括：1)取感受态细胞，冰浴融化；2)取pHKT2质粒加入含感受态细胞混匀，冰浴15～75min；3)液氮冷冻30～150sec，32～42℃水浴1～5min；4)冰浴5min；5)加LB无抗生素液体培养基，200rpm，30℃震荡培养3h；6)离心浓缩菌液，弃上清液，重悬菌液后涂布于含有TMP的平板，28℃恒温培养，36h后获得转化细胞。本发明的方法，操作简单，转化率高，最高达到6363.64cfu/μg。本申请成功建立生防菌B.pyrrocinia JK-SH007的最优转化体系，为后续的实验提供技术支持。
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公开(公告)号：CN107873512A
公开(公告)日：2018-04-06
申请号：CN201710997200.2
申请日：2017-10-24
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种抗松材线虫病黑松体胚再生植株高效繁殖技术，以抗病黑松未成熟合子胚为外植体，利用诱导培养基、固体增殖培养基、液体增殖培养基、成熟培养基、萌发培养基、体胚苗生长培养基成功建立了一种高效繁殖黑松体胚再生植株的方法且移栽成活，获得再生植株的萌发率77％-84％，植株转化率82％-91％，半年的移栽成活率达到85％以上，本发明针对当前珍贵抗松材线虫病黑松种质资源有限，繁殖相对困难的现状，为快速生产大批高质量苗木，满足林业生产对抗病黑松种苗造林的需求提供一种有效途径。
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公开(公告)号：CN107616096A
公开(公告)日：2018-01-23
申请号：CN201711088697.2
申请日：2017-11-08
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种无菌松苗培养方法，包括：1）制备水琼脂培养基；2）取松树成熟种子，用洗洁精将其表面洗净，流水冲洗1 h，将水滤干，将种子倒入150 mL无菌三角瓶或50 mL无菌离心管中，加入30%H2O2，将种子浸没，浸泡10-25min，期间轻轻振荡，将30%H2O2消毒后的种子倒入置于无菌烧杯上的灭菌筛子中，用无菌水冲洗4-5次。3）无菌条件下，将种子接种到水琼脂平板中放置时使种子与种子之间留有间隙，培养皿用Parafilm封口膜封口；4）将培养皿置于25℃条件下，暗培养，直至种子无菌萌发。本发明的无菌松苗培养方法，多个松种、多次重复结果表明，采用该培养方法对松树种子进行消毒灭菌，污染率低、萌发率高，既提高了培养效率，又省却了废液处理成本，保护了环境，是一种简便且无污染的无菌松苗的制备方法。
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公开(公告)号：CN107586756A
公开(公告)日：2018-01-16
申请号：CN201710994142.8
申请日：2017-10-23
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明公开了一种高效诱导抗松材线虫病黑松体胚发生的培养基，配方为：DCR，麦芽糖30~45g/L，ABA 5-10 mg/L，PEG8000 100~125 g/L，AC 2 g/L，植物凝胶3 g/L。本发明的高效诱导抗松材线虫病黑松体胚发生的培养基，通过试验证实，在抗性黑松体胚发育成熟过程中，麦芽糖45 g/L、ABA 5-10 mg/L、PEG8000 125 g/L、AC 2 g/L和植物凝胶3 g/L对体细胞胚成熟都具有促进作用。麦芽糖浓度为30-45 g/L、ABA 10mg/L、PEG 100g/L组合时，产生子叶胚结构完整，数量最多，对提高抗性黑松体细胞胚的数量和质量具有重要意义，为抗性黑松抗松材线虫病的育种，选择优良家系的快速繁殖技术提供理论依据，为实现抗松材线虫病苗木的大量繁殖、生产提供可能。
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公开(公告)号：CN107118989A
公开(公告)日：2017-09-01
申请号：CN201710359598.7
申请日：2017-05-19
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12R1/085
Abstract: 本发明公开了一株有效防治樱花根癌病的细菌菌株，分类命名为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)S‑B‑7，已保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号CCTCC NO：M 2017213，保藏日2017年4月27日，保藏地址：中国武汉武汉大学。本发明提供的蜡样芽孢杆菌菌株S‑B‑7，为植物根际生防促生细菌，对樱花根癌病有较好的防治效果，同时对樱花的生长具有促生作用。该蜡样芽孢杆菌菌株S‑B‑7培养条件简单、容易保存，易于工业化生产，具有良好的开发应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105543140A
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201610022448.2
申请日：2016-01-13
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一株大叶黄杨内生菌甲基营养型芽孢杆菌HYEB5-6，已保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号是CCTCC No：M2015728，保藏日期：2015年12月8日。本发明的甲基营养型芽孢杆菌HYEB5-6，为大叶黄杨内生菌，能够延迟大叶黄杨炭疽菌分生孢子的萌发，抑制芽管的伸长，抑制分生孢子的萌发，诱导菌丝产生膨大体，致菌丝畸形；接种试验结果表明，喷洒HYEB5-6菌体后显著抑制了大叶黄杨炭疽病的感病指数和缩小大叶黄杨炭疽病的病斑；HYEB5-6菌株在平板上对大叶黄杨炭疽菌、交链孢菌、金黄壳囊孢菌、希金斯刺盘孢菌、稻瘟病菌、丝核菌、七叶树壳梭孢菌和腐皮镰刀菌均具有一定的拮抗效果。
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公开(公告)号：CN103789214B
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201410004110.5
申请日：2014-01-03
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种马尾松根际解磷真菌瓜纳卡斯特青霉JP-NJ2及其应用，该马尾松根际解磷真菌的分类命名为瓜纳卡斯特青霉（Penicillium guanacastense）JP-NJ2，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO：M 2013476，保藏日期为：2013年10月17日，保藏地址为：中国武汉武汉大学。本发明的瓜纳卡斯特青霉JP-NJ2具有的优势包括：对难溶性无机磷酸盐磷酸三钙、磷酸铝和磷酸铁具有较好的溶解能力；对难溶性有机磷卵磷脂具有较好的溶解能力；对有机磷农药草甘膦具有良好的生物降解功能；通过盆栽试验证实菌剂接种马尾松苗可以明显促进马尾松的生长。因此，本发明的瓜纳卡斯特青霉JP-NJ2能为开发微生物菌肥提供优良的菌株资源，并具有良好的应用开发前景。
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公开(公告)号：CN104630371A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201510078255.4
申请日：2015-02-13
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2565/125
Abstract: 本发明公开了一种榆树枯萎病菌的分子检测方法，以待测样品DNA为模板，以通用引物ITS1-F/ITS4-B进行巢式PCR的第一轮反应，以第一轮反应产物为模板，以引物OpF和引物OpR为特异性引物，进行巢式PCR的第二轮反应，反应产物进行电泳检测，电泳图中出现304bp条带即为检测出榆树枯萎病菌，否则未检出；其中，引物OpF序列为：5'-GCCCGCCACTGGTTTTGA-3'；引物OpR序列为：5'-CCGCCCGAACCTTTTCCA-3'。该方法为榆树枯萎病菌的检测和评估提供一种准确、快速的途径，引物OpF和引物OpR具有很强的特异性，本方法的检测灵敏度能够达到常规PCR的10倍。
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公开(公告)号：CN104372104A
公开(公告)日：2015-02-25
申请号：CN201410742299.8
申请日：2014-12-08
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12Q1/6844 , C12Q1/6895 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明公开了一种樟疫霉菌的LAMP检测引物组合物及其LAMP检测试剂盒和LAMP检测方法。该LAMP检测引物组合物由正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3、正向环引物LF和反向环引物LB组成。本发明的检测方法准确性高、特异性强、操作方便、实用性好、实现了恒温扩增，同时还为樟疫霉菌的检测提供了新的技术平台，可用于樟疫霉菌的高灵敏度快速检测，同时在病害侵染初期鉴定出病原物，能够对田间土壤中的樟疫霉菌进行检测。本发明对樟疫霉菌引起的疫病防治和对减少农药盲目使用，降低生产成本，减少农药的环境污染也具有重要意义。
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公开(公告)号：CN103122329A
公开(公告)日：2013-05-29
申请号：CN201210549945.X
申请日：2012-12-18
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效植酸盐降解细菌水拉恩氏菌及其在促进植物生长中的应用，该高效植酸盐降解细菌的分类命名为水拉恩氏菌（Rahnellaaquatilis）JZ-GX1，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号是CCTCCNO：M2012439，保藏日期：2012年11月6日，保藏地址：中国武汉。本发明的水拉恩氏菌株JZ-GX1，具有较高的植酸酶活性，能够有效降解植酸钙等难溶性植酸盐，并且该菌株还能够产生植物生长素IAA。通过一系列的促生试验表明，与对照相比，该菌株对玉米的发芽和生长，以及对杨树和松树的生长都具有显著的促进作用。本发明为开发玉米、杨树和松树等植物的生物菌肥提供了优良的菌种资源。
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