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公开(公告)号：CN116482360A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310619455.0
申请日：2023-05-30
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543 , G01N21/64
Abstract: 本发明适用于生物检测技术领域，提供了一种基于生物传感器的快速检测沙门氏菌的方法，包括以下步骤：将待检测牛奶高速离心后，去除上层脂肪和下层沉淀，并调节牛奶的pH值，将处理后的牛奶作为待检测样品；将生物传感器与待检测样品进行混合，捕获待检测样品中可能存在的沙门氏菌；将生物传感器与液体培养基混合，并将得到的混合物置于能使沙门氏菌增殖的条件下进行培养；将培养物吸入无菌注射器中，利用超滤膜过滤后，利用PBS进行洗涤，洗涤后的剩余物在紫外灯照射下观察是否有荧光，有荧光则说明有沙门氏菌，没有荧光则没有沙门氏菌。本发明检测方式简单、快速、便捷，只需根据紫外线照射后是否有荧光现象即可判断是否存在沙门氏菌。
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公开(公告)号：CN115417926A
公开(公告)日：2022-12-02
申请号：CN202210350779.4
申请日：2022-04-02
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 广东益朗生物科技有限公司 , 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种大规模提取筋腱中胶原的方法及应用，首先将动物筋腱绞碎，先将动物筋腱置于碱液中浸泡，过滤，收集筋腱，重复浸泡和过滤若干次后，过滤得到含有胶原的溶液，再进行过滤，得到胶原浓缩液；在胶原浓缩液中加入缓冲液进行稀释，重复过滤稀释和浓缩步骤若干次，过滤浓缩后得到胶原溶液，再调节pH，然后进行酶解，酶解后进行过滤；再进行稀释，继续重复过滤浓缩和稀释步骤若干次，过滤后得到胶原蛋白溶液。该提取方法将碱法提取、酸法提取和酶法提取结合，能有效提取动物筋腱中的胶原蛋白且不损害有效成分，适合产业化大规模提取。利用上述提取方法得到胶原蛋白生物活性高，能够很好地促进细胞贴壁和延伸，适用于细胞培养。
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公开(公告)号：CN114703207A
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202210359526.3
申请日：2022-04-07
Applicant: 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于生物领域，公开了一种重组质粒的制备方法，将F1片段、F2片段、HA片段或HA‑2P片段、F4片段同源重组得到重组质粒。通过将H9N2亚型禽流感的血凝素蛋白HA茎端C环上第403位异亮氨酸、第411位缬氨酸均突变为脯氨酸，并分别将突变前后的HA基因插在rDHN3‑mF病毒基因组的P基因和M基因之间的非编码区，获得了两株能稳定表达H9N2AIV的HA蛋白的新城疫基因VII型减毒株重组病毒rDHN3mF‑HA‑2P，经WB验证表明双脯氨酸突变后的HA基因与原HA基因相比，其表达效率更高。该重组病毒有望进一步开发成抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗。
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公开(公告)号：CN114703122A
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202210350780.7
申请日：2022-04-02
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 广东益朗生物科技有限公司 , 华南农业大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种使PK‑15细胞形成团块和传代培养的方法，具体步骤为：先对PK‑15细胞进行复苏，再进行细胞传代，然后配制特定的悬浮培养基，将PK‑15细胞与悬浮培养基混合倒入摇瓶中，再将摇瓶置于摇床进行悬浮培养，悬浮培养一段时间后再取样观察细胞生长状况，进行细胞计数，再进行细胞传代，得到团块状细胞，继续对团块状细胞进行细胞传代；连续传代并观察PK‑15细胞状态，得到成球形团块状的PK‑15细胞。本发明的培养方法在在不进行细胞驯化和基因改造的情况下，能直接悬浮PK‑15细胞，使得PK‑15细胞形成球形团生长，球形团块直径为20～80μm，还能够连续传15代以上。
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公开(公告)号：CN109517809B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN201811449640.5
申请日：2018-11-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明将野生型传染性支气管炎病毒的E蛋白的第26位氨基酸由丙氨酸突变为苯丙氨酸，得到的缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒。本发明通过构建缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒，以及获得了回复突变体，对突变后的病毒进行分离纯化方法及其特性分析，有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗，对冠状病毒的研究具有重大的公共卫生和经济意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113088539A
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN202110217088.2
申请日：2021-02-26
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/861 , C12N15/40 , A61K39/12 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种表达IBDV VP2蛋白的重组腺病毒及制备与应用。通过PCR扩增IBDV的VP2基因片段与穿梭质粒pAdtrack‑GOI的双酶切产物进行同源重组得到穿梭质粒pAdTrack‑GOI‑VP2，将穿梭质粒线性化后与携带了腺病毒骨架质粒pAdEasy‑1的BJ5183感受态细胞进行菌内同源重组得到重组腺病毒载体pAd‑VP2；最后将pAd‑VP2线性化后转染HEK293A细胞得到重组腺病毒rAd‑VP2。本发明重组腺病毒rAd‑VP2纯化后滴度可达6.72×109GFU/mL，接种动物后能够有效刺激特异性抗体的产生，为IBDV亚单位疫苗的研发奠定一定的基础。
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公开(公告)号：CN111926025A
公开(公告)日：2020-11-13
申请号：CN202010346610.2
申请日：2020-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及反向遗传操作技术领域，公开了一株经过密码子替换的基因Ⅶ型新城疫病毒的拯救方法。分别将新城疫病毒的NP、P和L基因以及表达T7 RNA聚合酶的DE3基因克隆进pXJ40载体，获得质粒pXJ40-NP、pXJ40-P、pXJ40-L和pXJ40-DE3；将新城疫病毒的全基因组cDNA克隆进pBR322质粒中得到pBR322-DHN3；将NP基因编码区部分密码子统一替换成使用频率最高的密码子，替换到pBR322-DHN3质粒上，形成新质粒pBR322-mNPDHN3；采用上述5种质粒共转染BHK-21细胞，得到拯救病毒rDHN3-mNP。本发明方法更利于病毒的拯救和病毒致病机制的研究。
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公开(公告)号：CN107475245B
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN201710786499.7
申请日：2017-09-04
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华南农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明提供了一种简易的质粒粗提的方法，具体为：在含有质粒的基因工程菌体中加入PBS溶液重悬；加入20～100ug/ml的RNA酶和1～10mg/ml的溶菌酶；搅拌混匀，搅拌速度为100～5000rpm/min，搅拌的时间为10～50min；反复冻融3～6次，每次冻融后，进行搅拌，搅拌速度和时间同上；3000～10000rpm/min离心20～60min，取上清液；向上清中加入乙醇，乙醇最终浓度为60～80％；混匀后在2～8℃放置10～60min；8000～12000rpm/min离心15～90min，收集沉淀；加入TE溶液，电泳检测。相对于传统方法，本发明提取质粒的方法能够规模化，提取量不受限制，适合产业化；提取仅仅需要反复冻融菌体、乙醇沉淀两个主要步骤，避免了有毒有害试剂的使用；能够提取菌体中80％以上的质粒。
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公开(公告)号：CN106238371B
公开(公告)日：2019-01-08
申请号：CN201610919944.8
申请日：2016-10-21
Applicant: 华南农业大学 , 广东大麟洋海洋生物有限公司
Abstract: 一种深海域养殖网箱自动清洗装置，包括底座、导轮、钢缆和清洗盘；底座放置在网箱基体的上方，底座的下部安装有驱动轮，驱动轮由驱动电机驱动；底座的内侧固定有倒U形导轮支撑架，导轮支撑架的内部安装有一个滑轮，滑轮压在扶手上；两对导轮固定在导轮支撑架的上方拐角处，钢缆通过导轮悬挂连接有清洗盘。本发明装置自动化程度高，成本低，可以在养殖过程中对网箱进行清洗，无需将网箱取出水面后处理，减少作业环节，降低劳动强度。
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公开(公告)号：CN108635574A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810461794.X
申请日：2018-05-15
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC: A61K39/145 , A61P31/16 , A61K39/12 , A61P31/14 , C12N7/00
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/5252 , A61K2039/552 , A61K2039/70 , A61P31/14 , A61P31/16 , C12N7/00 , C12N2760/16134 , C12N2760/16151 , C12N2770/24034 , C12N2770/24051 , A61K2300/00
Abstract: 本发明公开一种生产鸭坦布苏、禽流感二联灭活疫苗的方法及其产品，该方法包括以下步骤：用EB66传代细胞分别接种鸭坦布苏、禽流感病毒株；在病毒ELD50或EID50效价达到最高时分别收获鸭坦布苏、禽流感病毒并保存；分别灭活鸭坦布苏、禽流感病毒；将灭活后的鸭坦布苏和禽流感病毒在吐温-80中完全混合，得到病毒混合液，在病毒混合液中加入已灭菌的油相佐剂，混合乳化，配制成鸭坦布苏、禽流感二联灭活疫苗。本发明通过采用EB66传代细胞系分别进行鸭坦布苏和禽流感病毒的培养，然后制备成的鸭坦布苏、禽流感二联疫苗具有生产工艺稳定、批间差异小、质量可控、产量和质量显著提高等优点。
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