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公开(公告)号：CN117947012A
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN202410207807.6
申请日：2024-02-26
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于酶基因工程技术领域，公开了高活力高热稳定性褐藻胶裂解酶突变体及应用。本发明针对野生型褐藻胶裂解酶，将第76、120、155、263位氨基酸分别替换为S、T、L、E，所得的褐藻胶裂解酶突变体酶活提高了87.41%，在60°C下热处理30 min，相对剩余酶活还有75.54%，显著优于野生型褐藻胶裂解酶，为褐藻胶裂解酶的大规模生产及应用提供理论基础。
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公开(公告)号：CN113957072B
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202111174896.1
申请日：2021-10-09
申请人： 湖北大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75 , C12N15/67 , C12N9/26 , C12R1/10
摘要： 本发明属于基因工程和微生物代谢工程领域，公开了适用于地衣芽孢杆菌的简短终止子及其在高效表达目的产物中的应用。本发明提供了3个适用于地衣芽孢杆菌的简短终止子（T1、T2、T3）。接着，以绿色荧光蛋白GFP、红色荧光蛋白RFP和α‑淀粉酶为目的蛋白为例，进行蛋白表达，与终止子TamyL相比，发现终止子T1均可有效提高蛋白产量，其分别使GFP、RFP和α‑淀粉酶产量提高43.6%、48.0%和34.5%。最后，将终止子T1应用于代谢工程中，与对照菌株相比，通过将其应用于代谢途径强化使聚γ‑谷氨酸产量提高了33.8%。
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公开(公告)号：CN111926013B
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202010829306.3
申请日：2020-08-18
申请人： 湖北大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N9/50 , C12P21/00 , C12P13/02 , C12R1/10
摘要： 本发明涉及基因工程和微生物代谢工程领域，公开了适用于地衣芽胞杆菌的启动子及其在高效表达目的产物中的应用，本发明人工设计了四种适用于地衣芽胞杆菌的启动子（R1‑R4）。接着，以绿色荧光蛋白GFP、角蛋白酶KER为目的蛋白，与启动子P43相比，研究发现启动子R2效果最佳，显著提高了GFP、KER的表达水平，其中GFP产量提高63.5倍，KER酶活提高7.8倍。最后，将启动子R2应用于代谢工程中，与对照菌株相比，通过将其应用于代谢途径强化使聚γ‑谷氨酸、杆菌肽的产量分别提高了52.09％和20.39％。
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公开(公告)号：CN111387209B
公开(公告)日：2021-06-25
申请号：CN202010433191.6
申请日：2020-05-21
申请人： 湖北大学 , 湖北省烟草科学研究院
摘要： 本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种防控烟草病害的复合拮抗菌剂及其应用。本发明基于前期发现的抗病物质和筛选的拮抗菌，通过开发“增效拮抗菌剂”充分发挥抗病增殖作用并实现防控技术简化，为烟叶生产发展提供技术支撑。研究发现所开发的增效拮抗菌剂对烟草种子萌发和生长具有促进作用；在盆栽条件下，增效拮抗菌剂能显著性增强土传病害烟草青枯病防治效果，施用增效拮抗菌剂组对青枯病的相对防治效果为60.87％；对黑胫病相对防效为60.32％。从最大叶长、最大叶宽、株高、茎直径等数据分析，增效拮抗菌剂能显著促进烟株生长。
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公开(公告)号：CN108587996B
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN201810426631.8
申请日：2018-05-07
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明提供了一种高产聚γ‑谷氨酸的工程菌及其构建方法与应用。本发明公开的高产聚γ‑谷氨酸的工程菌为强化表达dltB基因的重组微生物，所述强化表达为引入一个或多个拷贝的dltB基因和/或将dltB基因的表达元件替换为具有较高活性的表达元件。本发明通过提高dltB基因的表达获得的工程菌发酵生产聚γ‑谷氨酸产量提高20％以上。本发明获得的工程菌能够提高发酵生产聚γ‑谷氨酸的产量、降低生产成本，具有良好的市场应用价值。
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公开(公告)号：CN111850063A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010803222.2
申请日：2020-08-11
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明涉及生物技术和发酵领域，公开了去饱和酶Des在提高芽胞杆菌聚γ-谷氨酸产量中的应用。本发明以质粒pHY300PLK为基础，通过构建去饱和酶过表达载体pHY-des，成功在芽胞杆菌中（地衣芽胞杆菌WX-02，解淀粉芽胞杆菌HZ-12，枯草芽胞杆菌Bs168等）过表达基因des，得到了芽胞杆菌工程菌WX-02/pHY-des，HZ-12/pHY-des，Bs168/pHY-des。与对照菌相比，工程菌株WX-02/pHY-des的γ-PGA产量至少提高了103%以上，HZ-12/pHY-des的γ-PGA产量至少提高了92%以上，Bs168/pHY-des的γ-PGA产量至少提高了82%以上，为γ-PGA高产提供一种新的策略。
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公开(公告)号：CN111387209A
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN202010433191.6
申请日：2020-05-21
申请人： 湖北大学 , 湖北省烟草科学研究院
摘要： 本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种防控烟草病害的复合拮抗菌剂及其应用。本发明基于前期发现的抗病物质和筛选的拮抗菌，通过开发“增效拮抗菌剂”充分发挥抗病增殖作用并实现防控技术简化，为烟叶生产发展提供技术支撑。研究发现所开发的增效拮抗菌剂对烟草种子萌发和生长具有促进作用；在盆栽条件下，增效拮抗菌剂能显著性增强土传病害烟草青枯病防治效果，施用增效拮抗菌剂组对青枯病的相对防治效果为60.87％；对黑胫病相对防效为60.32％。从最大叶长、最大叶宽、株高、茎直径等数据分析，增效拮抗菌剂能显著促进烟株生长。
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公开(公告)号：CN110846290A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201911236056.6
申请日：2019-12-05
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于基因工程和酶工程技术领域，公开了二氢硫辛酸脱氢酶突变体P213R在地衣芽胞杆菌聚γ-谷氨酸合成中的应用。本发明通过基因组上定点突变的方式，将来源于地衣芽胞杆菌WX-02（Baclicus lincheniformis WX-02）二氢硫辛酸脱氢酶PdhD的第213位脯氨酸编码的碱基CCA改为CGG，即213位由脯氨酸改成精氨酸，显著提高了聚γ-谷氨酸合成水平，突变菌株聚γ-谷氨酸产量相较于对照菌株至少提高了21%以上。本发明为聚γ-谷氨酸的高效生产提供了一种新策略。
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公开(公告)号：CN114891820B
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202210595170.3
申请日：2022-05-28
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于微生物基因工程技术领域，具体涉及一种高效合成羟基酪醇的地衣芽胞杆菌、构建方法及其应用。本发明首先在地衣芽胞杆菌DW2基础上进一步进行多种改造，获得重组地衣芽胞杆菌DH7；选择来源于大肠杆菌中的4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶和乳酸乳球菌的酮酸脱羧酶，将其转入到地衣芽胞杆菌DH7底盘细胞中，实现了羟基酪醇产量的从头合成；通过组合表达4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶HpaBC和酮酸脱羧酶KivD突变体，使得所述重组地衣芽胞杆菌利用葡萄糖等廉价碳源可以高效合成羟基酪醇，产量高达5.55±0.37。本发明公开的重组地衣芽胞杆菌可以解决羟基酪醇产量低，价格昂贵的问题，具有广阔的工业前景。
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公开(公告)号：CN115786382A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211412825.5
申请日：2022-11-11
申请人： 湖北大学
摘要： 本发明属于基因工程和酶工程领域，公开了一种提高了谷氨酸脱羧酶酶活的地衣芽胞杆菌工程菌的构建方法及应用。申请人强化了地衣芽胞杆菌DW2内源二硫键氧化还原酶，并在地衣芽胞杆菌基因组上整合了二硫键氧化还原酶。将GAD的编码基因与二硫键异构酶进行共表达，成功构建了能够高表达谷氨酸脱羧酶的重组质粒。将其转入上述构建好的地衣芽胞杆菌DW2底盘细胞中进行高效表达，得到了能够提高谷氨酸脱羧酶酶活的重组工程菌，GAD酶活达到57.6 U·mL‑1，本发明所构建的工程菌对提升GAD酶活方面效果显著，为高效生产GABA提供了新思路，为实现生产食品级GABA奠定了基础。
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