公开(公告)号：CN118360334B

公开(公告)日：2024-09-24

申请号：CN202410774807.4

申请日：2024-06-17

Applicant: 暨南大学

Inventor： 殷鹏 ,  李晓江 ,  贾青青 ,  李世华 ,  侯珺淇 ,  朱高路 ,  欧凯丽 ,  何大健 ,  赵月

IPC: C12N15/85 ,  A01K67/0278 ,  A61K49/00 ,  C12N15/57

Abstract: 本发明公开了一种基于CASP4构建的模拟ALS疾病的模型及方法，属于生物技术领域。其构建过程如下：（1）构建CASP4基因敲入的打靶片段；（2）将gRNA、Cas9 mRNA和打靶片段注射至小鼠受精卵中，培育受精卵并进行传代，获得CASP4基因稳定遗传的hCASP4flox小鼠；（3）然后再与Cre工具鼠交配，获得双阳性杂合小鼠，即为CASP4基因特异表达在神经系统的小鼠模型。本发明基于人源化CASP4基因构建了模拟ALS疾病的动物模型，能够有效避免该凋亡因子所引起的小鼠死亡，并获得TDP‑43小片段产物累积在细胞浆中，且同时呈现出核内TDP‑43缺失病症的ALS小鼠模型。

公开(公告)号：CN116284416A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310026939.4

申请日：2023-01-09

Applicant: 暨南大学

Inventor： 杨伟莉 ,  李晓江 ,  陈秀生 ,  李世华 ,  殷鹏 ,  何大健 ,  熊鑫 ,  王琦 ,  韩瑞 ,  王志富

IPC: C07K16/40 ,  C12N15/13 ,  C12N5/20 ,  G01N33/577 ,  G01N33/573 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种抗内源性PINK1蛋白的单克隆抗体及其应用，所述的单克隆抗体，其重链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1～3所示；其轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.4～5和LVS所示。所述的单克隆抗体可用于对PINK1蛋白的识别和检测，用于非临床诊断目的；也可用于制备识别和检测PINK1蛋白的试剂和试剂盒。本发明通过人工构建PINK1基因序列片段，将其导入大肠杆菌中进行原核表达，收取、纯化PINK1多肽片段，并用其免疫小鼠，制备单克隆抗体，最终筛选得到能与PINK1蛋白特异性结合的杂交瘤细胞株2E7B6。所述抗体能与人和食蟹猴的PINK1蛋白特异性结合，表现出较好的实验性能。

公开(公告)号：CN117777297B

公开(公告)日：2024-08-09

申请号：CN202311700819.4

申请日：2023-12-11

Applicant: 暨南大学

Inventor： 杨伟莉 ,  李晓江 ,  陈秀生 ,  李世华 ,  殷鹏 ,  何大健 ,  熊鑫 ,  王琦 ,  韩瑞 ,  王志富

IPC: C07K16/40 ,  G01N33/577 ,  G01N33/573 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种抗内源性PINK1蛋白的单克隆抗体及其应用，所述的单克隆抗体，其重链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1～3所示；其轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.4～5和LVS所示。所述的单克隆抗体可用于对PINK1蛋白的识别和检测，用于非临床诊断目的；也可用于制备识别和检测PINK1蛋白的试剂和试剂盒。本发明通过人工构建PINK1基因序列片段，将其导入大肠杆菌中进行原核表达，收取、纯化PINK1多肽片段，并用其免疫小鼠，制备单克隆抗体，最终筛选得到能与PINK1蛋白特异性结合的杂交瘤细胞株2E7B6。所述抗体能与人和食蟹猴的PINK1蛋白特异性结合，表现出较好的实验性能。

公开(公告)号：CN115927186A

公开(公告)日：2023-04-07

申请号：CN202310040346.3

申请日：2023-01-11

Applicant: 暨南大学

Inventor： 何大健 ,  郭祥玉 ,  李晓江 ,  李世华 ,  杨伟莉 ,  殷鹏 ,  潘明天

IPC: C12N5/0797

Abstract: 本发明公开了一种培养基及其在胎猴神经干细胞分离培养中的应用，所述培养基的基底培养基是DMEM/F12，此外还含有1％L‑谷氨酰胺、2％B27无血清添加剂、5‑20ng/mL bFGF、5‑20ng/ml EGF、5‑10μg/mL肝素、0.2mM NEAA、1.5μg/mL CHIR99021、10ng/mL hLIF、0.1mM维C、抗生素适量。本发明培养基中，hLIF可抑制胚胎干细胞分化，促进细胞自我更新，可用于培养胎猴神经干细胞；同时CHIR99021是GSK3抑制剂，起到WNT激活剂的作用。与hLIF结合使用可从人类ES细胞中生成原始神经干细胞并维持神经干细胞自我更新能力和神经原性。

公开(公告)号：CN118360334A

公开(公告)日：2024-07-19

申请号：CN202410774807.4

申请日：2024-06-17

Applicant: 暨南大学

Inventor： 殷鹏 ,  李晓江 ,  贾青青 ,  李世华 ,  侯珺淇 ,  朱高路 ,  欧凯丽 ,  何大健 ,  赵月

IPC: C12N15/85 ,  A01K67/0278 ,  A61K49/00 ,  C12N15/57

Abstract: 本发明公开了一种基于CASP4构建的模拟ALS疾病的模型及方法，属于生物技术领域。其构建过程如下：（1）构建CASP4基因敲入的打靶片段；（2）将gRNA、Cas9 mRNA和打靶片段注射至小鼠受精卵中，培育受精卵并进行传代，获得CASP4基因稳定遗传的hCASP4flox小鼠；（3）然后再与Cre工具鼠交配，获得双阳性杂合小鼠，即为CASP4基因特异表达在神经系统的小鼠模型。本发明基于人源化CASP4基因构建了模拟ALS疾病的动物模型，能够有效避免该凋亡因子所引起的小鼠死亡，并获得TDP‑43小片段产物累积在细胞浆中，且同时呈现出核内TDP‑43缺失病症的ALS小鼠模型。

公开(公告)号：CN117777297A

公开(公告)日：2024-03-29

申请号：CN202311700819.4

申请日：2023-12-11

Applicant: 暨南大学

Inventor： 杨伟莉 ,  李晓江 ,  陈秀生 ,  李世华 ,  殷鹏 ,  何大健 ,  熊鑫 ,  王琦 ,  韩瑞 ,  王志富

IPC: C07K16/40 ,  G01N33/577 ,  G01N33/573 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种抗内源性PINK1蛋白的单克隆抗体及其应用，所述的单克隆抗体，其重链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1～3所示；其轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.4～5和LVS所示。所述的单克隆抗体可用于对PINK1蛋白的识别和检测，用于非临床诊断目的；也可用于制备识别和检测PINK1蛋白的试剂和试剂盒。本发明通过人工构建PINK1基因序列片段，将其导入大肠杆菌中进行原核表达，收取、纯化PINK1多肽片段，并用其免疫小鼠，制备单克隆抗体，最终筛选得到能与PINK1蛋白特异性结合的杂交瘤细胞株2E7B6。所述抗体能与人和食蟹猴的PINK1蛋白特异性结合，表现出较好的实验性能。

公开(公告)号：CN115927186B

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202310040346.3

申请日：2023-01-11

Applicant: 暨南大学

Inventor： 何大健 ,  郭祥玉 ,  李晓江 ,  李世华 ,  杨伟莉 ,  殷鹏 ,  潘明天

IPC: C12N5/0797

Abstract: 本发明公开了一种培养基及其在胎猴神经干细胞分离培养中的应用，所述培养基的基底培养基是DMEM/F12，此外还含有1％L‑谷氨酰胺、2％B27无血清添加剂、5‑20ng/mL bFGF、5‑20ng/ml EGF、5‑10μg/mL肝素、0.2mM NEAA、1.5μg/mL CHIR99021、10ng/mL hLIF、0.1mM维C、抗生素适量。本发明培养基中，hLIF可抑制胚胎干细胞分化，促进细胞自我更新，可用于培养胎猴神经干细胞；同时CHIR99021是GSK3抑制剂，起到WNT激活剂的作用。与hLIF结合使用可从人类ES细胞中生成原始神经干细胞并维持神经干细胞自我更新能力和神经原性。