可鉴别非洲猪瘟病毒基因I型、II型以及自然重组毒株的引物探针组合及其应用

    公开(公告)号:CN118421835A

    公开(公告)日:2024-08-02

    申请号:CN202410643898.8

    申请日:2024-05-23

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种可鉴别非洲猪瘟病毒基因I型毒株、基因II型毒株以及自然重组毒株的引物探针组合及其应用,所述引物探针组合包括针对非洲猪瘟病毒自然重组毒株B602L基因设计的第一特异性引物对和探针、针对非洲猪瘟病毒基因I型毒株CD2v基因设计的第二特异性引物对和探针、针对非洲猪瘟病毒基因II型毒株MGF360‑9L基因设计的第三特异性引物对和探针。所述引物和探针核苷酸序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.9所示。本发明仅需一次qPCR扩增即可鉴别出待测样品是否为非洲猪瘟病毒基因I型或者基因II型毒株以及是否为非洲猪瘟病毒自然重组毒株。本发明具备检测效率高、时间短、成本低等优势,对于重大动物疫病的防控以及临床样品的快速、精准检测具有较大的意义。

    一种用于奶牛生产寿命辅助选择的分子标记检测方法

    公开(公告)号:CN105368941B

    公开(公告)日:2018-10-09

    申请号:CN201510770238.7

    申请日:2015-11-12

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供一种对奶牛生产寿命进行辅助选择的检测方法,包括以下步骤:1)从样品中提取DNA;2)以提取的DNA为样本,使用用于奶牛生产寿命辅助选择的分子标记引物进行PCR扩增;3)检测步骤2)中的PCR产物的序列,根据CXCR1基因第816位点的SNP突变,判定其样品的基因型为AA,AC或者CC型。本发明首次披露了CXCR1‑816的SNP突变位点的基因型在对奶牛生产寿命进行辅助选择方面的应用。相比于现有技术,本发明设计分子标记引物时使用的CXCR1基因与奶牛生产性能、免疫和疾病等性状密切相关,其SNP突变标记点与奶牛生产寿命显著相关,具有更高的准确性和可信度,因而可以有效地针对奶牛生产寿命对种牛进行辅助选择,以提高后代奶牛的生产寿命,并间接地提高产值。

    一种鉴别非洲猪瘟病毒自然重组毒株的引物探针组合及其检测试剂盒

    公开(公告)号:CN118406804A

    公开(公告)日:2024-07-30

    申请号:CN202410643899.2

    申请日:2024-05-23

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种鉴别非洲猪瘟病毒自然重组毒株的引物探针组合及其检测试剂盒。所述引物探针组合包括第一引物探针组合及第二引物探针组合,第一引物探针组合的核苷酸序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.3所示,第二引物探针组合的核苷酸序列如SEQ ID NO.4~SEQ ID NO.6所示。本发明的引物探针组合,针对非洲猪瘟病毒自然重组毒株的B602L基因和非洲猪瘟病毒B646L基因设计,同时实现对非洲猪瘟病毒的定性和非洲猪瘟病毒自然重组毒株的鉴别,特异性强,灵敏度高。用于iiPCR检测,可实现现场鉴别非洲猪瘟病毒自然重组毒株,检测时间短,实用价值高,特别适用于养殖场、基层兽医部门等非实验室环境下的现场检测。

    一种用于降低牛白血病易感性辅助选择的分子标记及应用

    公开(公告)号:CN107083439B

    公开(公告)日:2020-03-31

    申请号:CN201710441975.1

    申请日:2017-06-13

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于分子生物学领域,涉及一种用于降低牛白血病易感性辅助选择的分子标记及应用。所述分子标记,是CXCR1基因980位点。该位点作为降低牛白血病易感性辅助选择分子标记用于选育牛白血病低易感性的奶牛品系。具体是在奶牛育种中利用CXCR1基因G980A检测,筛选其中AA型个体公牛,并与其它母牛进行配种,增加其后代母牛CXCR1基因G980AAA和GA型个体比例。利用本发明可以达到降低牛场牛白血病的发病率目的,同时可减少因淘汰奶牛而购买其他奶牛所产生的费用。

    一种用于降低奶牛泰勒虫病辅助选择的分子标记及其检测方法

    公开(公告)号:CN106148527B

    公开(公告)日:2019-09-20

    申请号:CN201610543110.1

    申请日:2016-07-11

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供用于降低奶牛泰勒虫病辅助选择的分子标记为,硬脂酰辅酶A去饱和酶SCD1基因(NC_007327)在8586bp的一个碱基C→T的SNP突变,导致蛋白质肽链中878位氨基酸‑丙氨酸(alanine)突变为缬氨酸(valine)。其用于降低奶牛泰勒虫病辅助选择的分子标记的检测方法包括:1)以从样品提取DNA为样本,使用用于降低奶牛泰勒虫病辅助选择的分子标记引物进行PCR扩增;2)检测步骤1)中所获得的PCR产物的序列,根据分子标记,即:SCD1基因(NC_007327)在8586bp的SNP突变,判定其样品的基因型为CC,CT或者TT型,对降低奶牛泰勒虫病进行辅助选择,其中CC型感染率最高,TT型感染率最低。该分子标记及其检测方法具有更高的准确性和可信度,可以有效地针对奶牛泰勒虫病的易感性对种牛进行辅助选择。

    一种用于降低牛白血病易感性辅助选择的分子标记及应用

    公开(公告)号:CN107083439A

    公开(公告)日:2017-08-22

    申请号:CN201710441975.1

    申请日:2017-06-13

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于分子生物学领域,涉及一种用于降低牛白血病易感性辅助选择的分子标记及应用。所述分子标记,是CXCR1基因980位点。该位点作为降低牛白血病易感性辅助选择分子标记用于选育牛白血病低易感性的奶牛品系。具体是在奶牛育种中利用CXCR1基因G980A检测,筛选其中AA型个体公牛,并与其它母牛进行配种,增加其后代母牛CXCR1基因G980AAA和GA型个体比例。利用本发明可以达到降低牛场牛白血病的发病率目的,同时可减少因淘汰奶牛而购买其他奶牛所产生的费用。

    一种用于奶牛生产寿命辅助选择的分子标记检测方法

    公开(公告)号:CN105368941A

    公开(公告)日:2016-03-02

    申请号:CN201510770238.7

    申请日:2015-11-12

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C12Q1/6888 C12Q1/6872 C12Q2600/124 C12Q2600/156

    Abstract: 本发明提供一种对奶牛生产寿命进行辅助选择的检测方法,包括以下步骤:1)从样品中提取DNA;2)以提取的DNA为样本,使用用于奶牛生产寿命辅助选择的分子标记引物进行PCR扩增;3)检测步骤2)中的PCR产物的序列,根据CXCR1基因第816位点的SNP突变,判定其样品的基因型为AA,AC或者CC型。本发明首次披露了CXCR1-816的SNP突变位点的基因型在对奶牛生产寿命进行辅助选择方面的应用。相比于现有技术,本发明设计分子标记引物时使用的CXCR1基因与奶牛生产性能、免疫和疾病等性状密切相关,其SNP突变标记点与奶牛生产寿命显著相关,具有更高的准确性和可信度,因而可以有效地针对奶牛生产寿命对种牛进行辅助选择,以提高后代奶牛的生产寿命,并间接地提高产值。

    一种猪繁殖与呼吸综合征病毒生产用细胞系

    公开(公告)号:CN118547009A

    公开(公告)日:2024-08-27

    申请号:CN202410695195.X

    申请日:2024-05-31

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒生产用细胞系。所述重组载体包括重组基因片段,重组基因片段具体包括PRRSV JS2021NADC34毒株的Nsp4基因、Nsp6基因、Nsp12基因,以及IRES基因和P2A基因;分别包括Nsp4、IRES‑Nsp6和P2A‑Nsp123段基因片段,所述的Nsp4基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示,IRES‑Nsp6基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示,P2A‑Nsp12基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。本发明公开的细胞株解决了PRRSV在Marc145细胞上增殖滴度低的问题,并通过慢病毒感染的的方式获得了稳定表达Nsp4基因、Nsp6基因和Nsp12基因的细胞株,该细胞株具有与亲本一致的增殖特性。本发明公开的重组细胞株作为疫苗生产用细胞株使用时,表现出较好的安全性,对与毒株的传代表现出较高的遗传稳定性,可以有效避免毒力返强的潜在风险。

    一种用于降低奶牛泰勒虫病辅助选择的分子标记及其检测方法

    公开(公告)号:CN106148527A

    公开(公告)日:2016-11-23

    申请号:CN201610543110.1

    申请日:2016-07-11

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供用于降低奶牛泰勒虫病辅助选择的分子标记为,硬脂酰辅酶A去饱和酶SCD1基因(NC_007327)在8586bp的一个碱基C→T的SNP突变,导致蛋白质肽链中878位氨基酸‑丙氨酸(alanine)突变为缬氨酸(valine)。其用于降低奶牛泰勒虫病辅助选择的分子标记的检测方法包括:1)以从样品提取DNA为样本,使用用于降低奶牛泰勒虫病辅助选择的分子标记引物进行PCR扩增;2)检测步骤1)中所获得的PCR产物的序列,根据分子标记,即:SCD1基因(NC_007327)在8586bp的SNP突变,判定其样品的基因型为CC,CT或者TT型,对降低奶牛泰勒虫病进行辅助选择,其中CC型感染率最高,TT型感染率最低。该分子标记及其检测方法具有更高的准确性和可信度,可以有效地针对奶牛泰勒虫病的易感性对种牛进行辅助选择。

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