公开(公告)号：CN118421835A

公开(公告)日：2024-08-02

申请号：CN202410643898.8

申请日：2024-05-23

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李向东 ,  余良政 ,  王文强 ,  朱振邦 ,  文威

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种可鉴别非洲猪瘟病毒基因I型毒株、基因II型毒株以及自然重组毒株的引物探针组合及其应用，所述引物探针组合包括针对非洲猪瘟病毒自然重组毒株B602L基因设计的第一特异性引物对和探针、针对非洲猪瘟病毒基因I型毒株CD2v基因设计的第二特异性引物对和探针、针对非洲猪瘟病毒基因II型毒株MGF360‑9L基因设计的第三特异性引物对和探针。所述引物和探针核苷酸序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.9所示。本发明仅需一次qPCR扩增即可鉴别出待测样品是否为非洲猪瘟病毒基因I型或者基因II型毒株以及是否为非洲猪瘟病毒自然重组毒株。本发明具备检测效率高、时间短、成本低等优势，对于重大动物疫病的防控以及临床样品的快速、精准检测具有较大的意义。

公开(公告)号：CN118547009A

公开(公告)日：2024-08-27

申请号：CN202410695195.X

申请日：2024-05-31

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李向东 ,  叶正琴 ,  朱振邦 ,  王文强 ,  文威

IPC: C12N15/867 ,  C12N7/01 ,  C12N15/40 ,  C12N5/10 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒生产用细胞系。所述重组载体包括重组基因片段，重组基因片段具体包括PRRSV JS2021NADC34毒株的Nsp4基因、Nsp6基因、Nsp12基因，以及IRES基因和P2A基因；分别包括Nsp4、IRES‑Nsp6和P2A‑Nsp123段基因片段，所述的Nsp4基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，IRES‑Nsp6基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，P2A‑Nsp12基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。本发明公开的细胞株解决了PRRSV在Marc145细胞上增殖滴度低的问题，并通过慢病毒感染的的方式获得了稳定表达Nsp4基因、Nsp6基因和Nsp12基因的细胞株，该细胞株具有与亲本一致的增殖特性。本发明公开的重组细胞株作为疫苗生产用细胞株使用时，表现出较好的安全性，对与毒株的传代表现出较高的遗传稳定性，可以有效避免毒力返强的潜在风险。

公开(公告)号：CN118406804A

公开(公告)日：2024-07-30

申请号：CN202410643899.2

申请日：2024-05-23

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李向东 ,  余良政 ,  王文强 ,  朱振邦 ,  文威

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种鉴别非洲猪瘟病毒自然重组毒株的引物探针组合及其检测试剂盒。所述引物探针组合包括第一引物探针组合及第二引物探针组合，第一引物探针组合的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.3所示，第二引物探针组合的核苷酸序列如SEQ ID NO.4～SEQ ID NO.6所示。本发明的引物探针组合，针对非洲猪瘟病毒自然重组毒株的B602L基因和非洲猪瘟病毒B646L基因设计，同时实现对非洲猪瘟病毒的定性和非洲猪瘟病毒自然重组毒株的鉴别，特异性强，灵敏度高。用于iiPCR检测，可实现现场鉴别非洲猪瘟病毒自然重组毒株，检测时间短，实用价值高，特别适用于养殖场、基层兽医部门等非实验室环境下的现场检测。