公开(公告)号：CN118185973B

公开(公告)日：2024-10-29

申请号：CN202410398537.1

申请日：2024-04-03

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陈世豪 ,  尹娜 ,  吴双 ,  王佳兴 ,  白皓 ,  常国斌 ,  陈国宏

IPC: C12N15/70 ,  C07K16/06 ,  C07K16/40 ,  C12N9/10 ,  G01N33/573 ,  G01N33/68 ,  A61K39/395 ,  A61P31/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，尤其涉一种鸡TRIM27.2截短体重组蛋白及制备方法及应用、多克隆抗体及制备方法及应用，包括以下步骤：以鸡巨噬细胞系HD11总RNA反转录后的cDNA为模版，进行PCR扩增获得编码鸡TRIM27.2截短体重组蛋白的基因，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；将扩增获得的编码鸡TRIM27.2截短体重组蛋白的基因插入到pColdI载体的酶切位点之间获得重组载体；将所述原核表达载体转入到感受态细胞中，得到重组菌；将所述重组菌进行培养，当培养液的OD_600值为0.6～0.8时，加入IPTG进行诱导表达，经分离、纯化、复性，得到鸡TRIM27.2截短体重组蛋白。本发明构建的鸡TRIM27.2截短体重组蛋白，避免全长表达不稳定的缺点，同时免疫效果更加稳定且产生的抗体水平较高，制备的鸡TRIM27.2的多克隆抗体能用于验证TRIM27.2对IBDV等病毒复制调控的机制。

公开(公告)号：CN118531019A

公开(公告)日：2024-08-23

申请号：CN202410602068.0

申请日：2024-05-15

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陈世豪 ,  吴双 ,  尹娜 ,  黄烜 ,  王强州 ,  常国斌 ,  陈国宏

IPC: C12N15/52 ,  C12N9/00 ,  C12N15/70 ,  C07K16/40 ,  A61K39/395 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及一种鸡TRIM39.2基因、重组载体、截短体重组蛋白或其多克隆抗体在制备与鸡TRIM39.2相关疾病中的应用，编码鸡TRIM39.2截短体重组蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明构建的鸡TRIM39.2截短体重组蛋白，避免了全长表达稳定性的缺点，同时免疫效果更加稳定且抗体水平较高。同时本发明制备的多克隆抗体可应用于鸡TRIM39.2对IBDV和ALV‑J等禽类RNA病毒复制调控的机制研究，具有深远意义，弥补了鸡TRIM39.2抗体制备及研究的空白；为鸡抗IBDV和ALV‑J等禽类RNA病毒感染和免疫调节的机制研究提供新思路。

公开(公告)号：CN118185973A

公开(公告)日：2024-06-14

申请号：CN202410398537.1

申请日：2024-04-03

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陈世豪 ,  尹娜 ,  吴双 ,  王佳兴 ,  白皓 ,  常国斌 ,  陈国宏

IPC: C12N15/70 ,  C07K16/06 ,  C07K16/40 ,  C12N9/10 ,  G01N33/573 ,  G01N33/68 ,  A61K39/395 ,  A61P31/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，尤其涉一种鸡TRIM27.2截短体重组蛋白及制备方法及应用、多克隆抗体及制备方法及应用，包括以下步骤：以鸡巨噬细胞系HD11总RNA反转录后的cDNA为模版，进行PCR扩增获得编码鸡TRIM27.2截短体重组蛋白的基因，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；将扩增获得的编码鸡TRIM27.2截短体重组蛋白的基因插入到pColdI载体的酶切位点之间获得重组载体；将所述原核表达载体转入到感受态细胞中，得到重组菌；将所述重组菌进行培养，当培养液的OD_600值为0.6～0.8时，加入IPTG进行诱导表达，经分离、纯化、复性，得到鸡TRIM27.2截短体重组蛋白。本发明构建的鸡TRIM27.2截短体重组蛋白，避免全长表达不稳定的缺点，同时免疫效果更加稳定且产生的抗体水平较高，制备的鸡TRIM27.2的多克隆抗体能用于验证TRIM27.2对IBDV等病毒复制调控的机制。