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公开(公告)号:CN112695110A
公开(公告)日:2021-04-23
申请号:CN202011604528.1
申请日:2020-12-29
Applicant: 复旦大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6848 , C12Q1/14 , C12N15/11 , C12R1/46
Abstract: 本发明涉及聚合酶螺旋反应快速检测肺炎链球菌核酸的引物组、试剂盒及其应用。引物组或试剂盒至少包括一对检测引物Ft和Bt,推荐加入加速引物IF,检测引物Ft选择Ft‑spn时,检测引物Bt选择Bt‑spn,加速引物IF为IF‑spn,检测引物Ft选择Ft‑cps时,检测引物Bt选择Bt‑cps,加速引物IF为IF‑cps。引物Ft‑spn、Bt‑spn、IF‑spn的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1,SEQ ID NO.2,SEQ ID NO.3所示,引物Ft‑cps、Bt‑cps、IF‑cps的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.4,SEQ ID NO.5,SEQ ID NO.6所示。扩增反应结束后通过SYBR Green I染料染色,根据颜色是否产生变化就可裸眼观察和判断出目的基因是否存在,从而对样本进行定性检测分析。本发明系首次采用聚合酶螺旋反应检测肺炎链球菌核酸,具有特异性强、灵敏度高、操作简单快速、不依赖大型实验设备等优势。
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公开(公告)号:CN115261509A
公开(公告)日:2022-11-01
申请号:CN202210179475.6
申请日:2022-02-25
Applicant: 复旦大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及基于微孔恒温扩增反应检测呼吸道RNA病毒核酸的引物组、试剂盒及其应用,其中包括包埋在不同微孔里的特异性引物组、包含Bst酶和逆转录酶的反应混合液。可以同时检测SARS‑CoV‑1、SARS‑CoV‑2(包括SARS‑CoV‑2‑N和SARS‑CoV‑2‑E)、甲型流感病毒(Inf A)、乙型流感病毒(Influenza B virus,IBV)、呼吸道合胞病毒A(Respiratory syncytial virus A,RSV A)和呼吸道合胞病毒B(Respiratory syncytial virus B,RSV B)这6种呼吸道RNA病毒核酸。与现有技术相比,本发明使用改进的一种每种靶标仅需要4条引物进行恒温扩增的技术,与微孔反应技术相结合,对6种呼吸道RNA病毒核酸进行高通量检测,每组引物靶标单独为一孔,引物之间没有交叉反应,本发明在微孔中进行反应,对样品量和试剂量要求低,经济成本也降低,并且能一次进行多靶标的高通量样本筛查。
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公开(公告)号:CN114807433A
公开(公告)日:2022-07-29
申请号:CN202210179487.9
申请日:2022-02-25
Applicant: 复旦大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及基于微孔恒温反应检测肠道RNA病毒核酸的引物组、试剂盒及其应用,其中包括包埋在不同微孔里的特异性引物组、包含Bst酶和逆转录酶的反应混合液。可以同时检测诺如病毒GⅠ/GⅡ、甲型肝炎病毒、CA16、EV71这4种肠道RNA病毒核酸。本发明使用改进的每种靶标仅需要2‑4条引物进行的恒温扩增技术,与微孔反应技术相结合,对4种肠道RNA病毒核酸进行高通量检测,每组引物靶标单独为一孔,引物之间没有交叉反应,使用离心的方式使试剂和模板混合物进入包埋有引物组靶标的微孔中。在工艺要求上,相比微流控来说较为简单,通用性很高,检测灵敏度可以达到10个拷贝,降低了加样的复杂性,在临床检测中具有优势。
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