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公开(公告)号：CN113265434A
公开(公告)日：2021-08-17
申请号：CN202110560931.7
申请日：2021-05-19
Applicant: 吉林大学
Abstract: 一种合成UDP‑半乳糖的方法及合成半乳糖基化合物的方法，属于生物工程技术领域。本发明所述的一种利用嗜热酶法两步反应催化UTP、ATP和D‑半乳糖生成UDP‑半乳糖的方法包括两个步骤：(ⅰ)以D‑半乳糖、ATP为底物，使用嗜热半乳糖激酶TTHA0595催化合成1‑P‑Gal(1‑磷酸‑半乳糖)；(ⅱ)以1‑P‑Gal和UTP为底物，使用嗜热UDP‑葡萄糖焦磷酸化酶TTE0732催化合成UDP‑半乳糖。将本发明合成的UDP‑半乳糖作为糖基供体，利用嗜热半乳糖转移酶TON_1857，可进一步催化底物化合物香子兰醇、对硝基苯酚或水飞蓟宾合成半乳糖基化合物，从而构建了嗜热酶法合成半乳糖基化合物的方法。
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公开(公告)号：CN116004591A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202210825777.6
申请日：2022-07-13
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N9/78 , C12N9/82 , C12N15/70 , A61K38/50 , A61K47/61 , A61K47/69 , A61P35/00 , B22F9/24 , B22F1/054 , B82Y5/00 , B82Y40/00
Abstract: 一种近红外驱动嗜热酶催化型抗肿瘤靶向纳米制剂，属于肿瘤治疗技术领域。本发明通过构建嗜热精氨酸酶和嗜热天冬酰胺酶(核苷酸序列分别如SEQ IDNo.1、SEQ ID No.2所示)与金纳米棒和透明质酸共价耦合的纳米复合物，利用纳米金的光热效应，实现近红外激光激发的局域能量传递而激活嗜热酶活性，催化肿瘤细胞内部精氨酸/天冬酰胺的水解，产生“氨基酸饥饿”状态，协同饥饿疗法与光热治疗，提升肿瘤杀伤能力。最终结果显示该纳米体系具备靶向CD44高表达的乳腺癌细胞系MCF‑7的优异的细胞摄取能力以及抑制肿瘤细胞增殖、迁移、浸润能力，在裸鼠皮下移植瘤模型中显示出显著的抑瘤能力。
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公开(公告)号：CN116004591B
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202210825777.6
申请日：2022-07-13
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N9/78 , C12N9/82 , C12N15/70 , A61K38/50 , A61K47/61 , A61K47/69 , A61P35/00 , B22F9/24 , B22F1/054 , B82Y5/00 , B82Y40/00
Abstract: 一种近红外驱动嗜热酶催化型抗肿瘤靶向纳米制剂，属于肿瘤治疗技术领域。本发明通过构建嗜热精氨酸酶和嗜热天冬酰胺酶(核苷酸序列分别如SEQ IDNo.1、SEQ ID No.2所示)与金纳米棒和透明质酸共价耦合的纳米复合物，利用纳米金的光热效应，实现近红外激光激发的局域能量传递而激活嗜热酶活性，催化肿瘤细胞内部精氨酸/天冬酰胺的水解，产生“氨基酸饥饿”状态，协同饥饿疗法与光热治疗，提升肿瘤杀伤能力。最终结果显示该纳米体系具备靶向CD44高表达的乳腺癌细胞系MCF‑7的优异的细胞摄取能力以及抑制肿瘤细胞增殖、迁移、浸润能力，在裸鼠皮下移植瘤模型中显示出显著的抑瘤能力。
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公开(公告)号：CN107164349A
公开(公告)日：2017-09-15
申请号：CN201710396332.X
申请日：2017-05-24
Applicant: 吉林大学
Abstract: 一种嗜热中性蛋白酶基因、生产该嗜热中性蛋白酶的工程菌JD‑TP(大肠埃希氏菌Escherichia coli)、利用该基因工程菌发酵生产的嗜热中性蛋白酶、自催化剪切后获得的成熟的嗜热中性蛋白酶、该嗜热中性蛋白酶及成熟的嗜热中性蛋白酶在降解蛋白质中的应用，属于生物工程技术领域。本发明通过PCR从嗜热细菌Thermus thermophilus HB8基因组中扩增得到嗜热中性蛋白酶基因，将其连入表达载体，在大肠杆菌中成功表达；嗜热中性蛋白酶的最适反应温度85℃，在85℃的半衰期为8d，成熟的嗜热中性蛋白酶的最适反应温度为75℃；嗜热中性蛋白酶的最适pH为7.5至10.0，成熟的嗜热中性蛋白酶最适反应pH为6.5；嗜热中性蛋白酶和成熟的嗜热中性蛋白酶有很高的最适反应温度、热稳定性和较宽的反应pH值，具有很好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN102321648A
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN201110303402.5
申请日：2011-10-10
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及一种融合酸性嗜热α-淀粉酶基因、生产融合酸性嗜热α-淀粉酶的工程菌(大肠埃希氏菌Escherichia coli)JDA001、利用该基因工程菌发酵生产的融合酸性嗜热α-淀粉酶及该酶在淀粉深加工中的应用。通过本发明上述方法分离纯化得到的最终蛋白产品，其纯度达98％以上，比活力为274.97U/mg。本发明通过重叠延伸PCR扩增得到融合酸性嗜热α-淀粉酶基因ST0926-27，将其连入表达载体，在大肠杆菌中成功表达；获得高的回收效率和较好的纯化效果；融合酸性嗜热α-淀粉酶ST0926-27具有较高的最适反应温度、热稳定性和较低的最适pH值，具有很好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN115260314B
公开(公告)日：2023-10-24
申请号：CN202210505122.0
申请日：2022-05-10
Applicant: 吉林大学
Abstract: 一种重组嗜热中性蛋白酶及其在降解蛋白质中的应用，属于生物工程技术领域。本发明提供了一种可在枯草芽孢杆菌宿主分泌表达的重组嗜热中性蛋白酶，其包括如SEQ ID No.1、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示的带有分泌信号肽序列的重组嗜热中性蛋白酶，及如SEQ ID No.2所示的不带有分泌信号肽序列的重组嗜热中性蛋白酶。本发明所述的嗜热中性蛋白酶以带有前肽序列形式在枯草芽孢杆菌中分泌表达，实验结果表明具有较高的酶活力，可降解豆粕得到高抗氧化活性的小分子多肽，且在多种洗涤剂中能够稳定发挥酶活力，能够很好地降解血红蛋白，去除血渍。
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公开(公告)号：CN113265434B
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202110560931.7
申请日：2021-05-19
Applicant: 吉林大学
Abstract: 一种合成UDP‑半乳糖的方法及合成半乳糖基化合物的方法，属于生物工程技术领域。本发明所述的一种利用嗜热酶法两步反应催化UTP、ATP和D‑半乳糖生成UDP‑半乳糖的方法包括两个步骤：(ⅰ)以D‑半乳糖、ATP为底物，使用嗜热半乳糖激酶TTHA0595催化合成1‑P‑Gal(1‑磷酸‑半乳糖)；(ⅱ)以1‑P‑Gal和UTP为底物，使用嗜热UDP‑葡萄糖焦磷酸化酶TTE0732催化合成UDP‑半乳糖。将本发明合成的UDP‑半乳糖作为糖基供体，利用嗜热半乳糖转移酶TON_1857，可进一步催化底物化合物香子兰醇、对硝基苯酚或水飞蓟宾合成半乳糖基化合物，从而构建了嗜热酶法合成半乳糖基化合物的方法。
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公开(公告)号：CN114507649A
公开(公告)日：2022-05-17
申请号：CN202210140823.9
申请日：2022-02-16
Applicant: 吉林大学
Abstract: 嗜热酶及一锅法高效合成UDP‑葡萄糖和UDP‑葡萄糖醛酸的方法，属于生物工程及生物合成技术领域。本发明使用热稳定性更好的嗜热酶(核苷酸序列分别如SEQ ID No.1～5所示)代替常温酶催化UDP‑Glc的合成反应，并将一锅法反应体系拆分为几个分步反应，对每步反应的条件进行系统优化，最终整合各步反应最适条件的基础上设计一锅法反应条件，以达到高效合成UDP‑Glc和UDP‑GlcUA的目的。与全细胞催化相比，UDP‑Glc终产量提高了约14倍(Leloir途径)和3.5倍(非Leloir途径)。反应合成的UDP‑Glc作为底物进一步合成了药用价值更高的UDP‑葡萄糖醛酸(UDP‑GlcUA)。
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公开(公告)号：CN115260314A
公开(公告)日：2022-11-01
申请号：CN202210505122.0
申请日：2022-05-10
Applicant: 吉林大学
Abstract: 一种重组嗜热中性蛋白酶及其在降解蛋白质中的应用，属于生物工程技术领域。本发明提供了一种可在枯草芽孢杆菌宿主分泌表达的重组嗜热中性蛋白酶，其包括如SEQ ID No.1、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示的带有分泌信号肽序列的重组嗜热中性蛋白酶，及如SEQ ID No.2所示的不带有分泌信号肽序列的重组嗜热中性蛋白酶。本发明所述的嗜热中性蛋白酶以带有前肽序列形式在枯草芽孢杆菌中分泌表达，实验结果表明具有较高的酶活力，可降解豆粕得到高抗氧化活性的小分子多肽，且在多种洗涤剂中能够稳定发挥酶活力，能够很好地降解血红蛋白，去除血渍。
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