一种突变型EGFR高表达的重组MHCC97-L肝癌细胞及构建

    公开(公告)号:CN111254117A

    公开(公告)日:2020-06-09

    申请号:CN201811450894.9

    申请日:2018-11-30

    发明人: 刘扬 尹雅蕾

    摘要: 本发明公开一种基于外源重组质粒pCDH-puro-EGFR(I645L)构建的稳定高表达突变型EGFR的重组MHCC97-L肝癌细胞。具体经过EGFR-I645L基因全长的获得,pCDH-puro-EGFR(I645L)质粒构建、包装病毒,然后对病毒感染后的细胞进行嘌呤霉素筛选,传代,建立稳定表达MHCC97-L细胞。此细胞的建立可以为以肝癌肿瘤的EGFR通路相关药物筛选及耐药研究提供细胞模型,提高筛选的特异性及灵敏性;也可应用于EGFR影响的相关通路蛋白的差异性比较研究。

    一种逆转肝癌细胞sorafenib的耐药性的方法

    公开(公告)号:CN109897866A

    公开(公告)日:2019-06-18

    申请号:CN201711307093.2

    申请日:2017-12-11

    IPC分类号: C12N15/86

    摘要: 本发明公开一种新发现的可以对sorafenib耐药性产生影响的通路-脯氨酸合成通路。具体采用shRNA干扰技术在SMMC-7721细胞中干涉掉ALDH18A1,以达到抑制脯氨酸合成的目的,经过细胞活力检测和蛋白免疫印迹实验检测证实,脯氨酸合成的抑制能够逆转肝癌细胞对sorafenib的耐药性,从而达到有效治疗肝癌的目的。

    一种稳定低表达SMMC7721的细胞系及构建方法

    公开(公告)号:CN108611323A

    公开(公告)日:2018-10-02

    申请号:CN201611133379.9

    申请日:2016-12-10

    发明人: 刘扬 何牮 王洋

    IPC分类号: C12N5/10 C12N15/85

    摘要: 本发明公开一种ALDH18A1低表达的SMMC7721细胞系的构建方法。具体采用shRNA干扰技术构建ALDH18A1稳定低表达的SMMC7721细胞系。经过获得ALDH18A1shRNA重组质粒、包装病毒,然后对病毒感染后的细胞进行嘌呤霉素筛选,传代,建立稳定低表达的SMMC7721-ALDH18A1KD细胞系,最终获得阳性重组细胞系,能够低表达ALDH18A1。ALDH18A1稳定低表达的SMMC7721细胞系可作为理想的模型来进行ALDH18A1参与的肿瘤发生发展机制的研究。

    铁死亡诱导剂RSL3的应用及治疗肝癌药物

    公开(公告)号:CN113018297B

    公开(公告)日:2022-11-01

    申请号:CN201911250015.2

    申请日:2019-12-09

    IPC分类号: A61K31/437 A61P35/00 A61P1/16

    摘要: 本发明公开一种铁死亡诱导剂RSL3在治疗索拉非尼耐药肝癌中的应用,属于细胞生物学和医学技术领域。具体通过加入不同浓度的RSL3于HepG2和HepG2耐药细胞中,利用Cell Counting Kit‑8法检测细胞活力,我们发现与HepG2细胞相比,HepG2耐药细胞相对活力显著降低,RSL3可抑制肝癌耐药细胞的增殖。同时,对比HepG2与HepG2耐药细胞的脂质氧化物积累情况,加入RSL3后HepG2耐药细胞脂质氧化物显著增多,从而引发铁死亡。铁死亡诱导剂RSL3在治疗耐药肿瘤中具有良好的药用潜力。

    一种构建PRMT7高表达的细胞系的方法及细胞系

    公开(公告)号:CN111235182A

    公开(公告)日:2020-06-05

    申请号:CN201811442896.3

    申请日:2018-11-29

    发明人: 刘扬 耿鹏宇

    IPC分类号: C12N15/85 C12N5/10 C12R1/91

    摘要: 本发明公开一种外源重组质粒pCDH-puro-PRMT7稳定过表达的乳腺癌MCF7细胞系的构建方法。具体经过PRMT7基因全长的获得,pCDH-puro-PRMT7质粒构建、包装病毒,病毒侵染细胞,而后嘌呤霉素筛选,扩增后获得PRMT7稳定过表达的MCF7细胞系。此细胞系的构建有助于研究PRMT7的细胞生物学功能,如PRMT7对小鼠成瘤能力的影响;对小鼠肺转移能力的影响等等。

    一种构建荧光素酶高表达稳定细胞系的方法及细胞系

    公开(公告)号:CN111235120A

    公开(公告)日:2020-06-05

    申请号:CN201811442941.5

    申请日:2018-11-29

    发明人: 刘扬 耿鹏宇

    摘要: 本发明公开一种荧光素酶高表达的Huh7细胞系的构建方法。具体采用慢病毒载体获得荧光素酶高表达的Huh7细胞系。首先利用慢病毒侵染技术,将荧光素酶基因转入到Huh7细胞系中,使其在Huh7细胞里表达,其后采用挑取单克隆细胞的方法来筛选过表达荧光素酶的细胞,并进行大量扩增获得稳定过表达荧光素酶的Huh7细胞系。荧光素酶稳定高表达的Huh7细胞系能够作为一种特定的标记,检测细胞在动物体内的存在部位,用于肿瘤转移模型的研究。