本发明公开一种基于外源重组质粒pCDH-puro-EGFR(I645L)构建的稳定高表达突变型EGFR的重组MHCC97-L肝癌细胞。具体经过EGFR-I645L基因全长的获得，pCDH-puro-EGFR(I645L)质粒构建、包装病毒，然后对病毒感染后的细胞进行嘌呤霉素筛选，传代，建立稳定表达MHCC97-L细胞。此细胞的建立可以为以肝癌肿瘤的EGFR通路相关药物筛选及耐药研究提供细胞模型，提高筛选的特异性及灵敏性；也可应用于EGFR影响的相关通路蛋白的差异性比较研究。