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公开(公告)号:CN105524932A
公开(公告)日:2016-04-27
申请号:CN201510859994.7
申请日:2015-11-30
Applicant: 上海海洋大学
Abstract: 中华绒螯蟹的delta6去饱和酶基因及其克隆方法,该方法包括步骤:(1)根据Genebank中华绒螯蟹和菁夜蛾的delta6去饱和酶基因进行对比,获得保守序列,设计保守区序列引物FAD6-F1(+)/FAD6-R1(-),以中华绒螯蟹肝胰腺总RNA反转录合成的cDNA第一链为模板,进行PCR反应,获得delta6去饱和酶基因片段核心片段,将核心片段克隆到载体上并测序;(2)根据获得的delta6去饱和酶基因核心片段设计5’-和3’-RACE引物,FAD6-5’(-)和FAD6-3’(+),以中华绒螯蟹肝胰腺总RNA反转录合成的5’-cDNA和3’-cDNA为模板,进行RACE反应,获得5’和3’末端片段,将得到的该片段分别连接至载体后克隆并测序;(3)将5’和3’末端片段分别与获得的delta6去饱和酶基因核心片段进行拼接得到delta6去饱和酶基因全长序列。
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公开(公告)号:CN113412804B
公开(公告)日:2022-10-25
申请号:CN202110834879.X
申请日:2021-07-23
Applicant: 上海海洋大学
IPC: C12Q1/42
Abstract: 本发明公开一种中华绒螯蟹幼蟹存活力的判断方法,涉及现代农业产业河蟹养殖领域;本发明公开的一种中华绒螯蟹幼蟹存活力的判断方法,通过分析中华绒螯蟹在盐度胁迫下的应激表现和渗透压调节情况,从而判断中华绒螯蟹幼蟹存活力。本发明建立的中华绒螯蟹幼蟹存活力的判断方法具有极好的可靠性,节约了幼蟹至成蟹阶段的养殖资源,同时根据存活力的判断结果进行优胜劣汰,可以有效提高中华绒螯蟹育肥后成蟹的产品品质。
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公开(公告)号:CN105331621B
公开(公告)日:2019-01-29
申请号:CN201510790826.7
申请日:2015-11-17
Applicant: 上海海洋大学
IPC: C12N15/52 , C12N9/00 , C12N15/63 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12R1/865 , C12R1/19 , C12R1/84 , C12R1/645
Abstract: 本发明涉及中华绒螯蟹Elovl6基因和其克隆方法,该方法包括:(1)对不同物种的Elovl6氨基酸序列进行比对,根据对应的保守区域设计引物Elovl6‑F1/Elovl6‑R1,将提取的中华绒螯蟹总RNA反转录成cDNA第一链,以此为模板,进行PCR反应,获得的核心片段克隆到载体上并测序;(2)根据上述核心片段,分别设计3’‑Elovl6 RACE上游引物和5’‑Elovl6 RACE下游引物,将提取的中华绒螯蟹总RNA反转录成3’‑cDNA和5’‑cDNA第一链,以此为模板,进行3’和5’末端侧翼片段RACE,将得到的3’和5’末端侧翼片段分别与载体连接,克隆并测序;(3)将得到的末端侧翼片段与核心片段进行拼接,获得中华绒螯蟹Elovl6基因的全长序列。
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公开(公告)号:CN105331621A
公开(公告)日:2016-02-17
申请号:CN201510790826.7
申请日:2015-11-17
Applicant: 上海海洋大学
IPC: C12N15/52 , C12N9/00 , C12N15/63 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12R1/865 , C12R1/19 , C12R1/84 , C12R1/645
Abstract: 本发明涉及中华绒螯蟹Elovl6基因和其克隆方法,该方法包括:(1)对不同物种的Elovl6氨基酸序列进行比对,根据对应的保守区域设计引物Elovl6-F1/Elovl6-R1,将提取的中华绒螯蟹总RNA反转录成cDNA第一链,以此为模板,进行PCR反应,获得的核心片段克隆到载体上并测序;(2)根据上述核心片段,分别设计3’-Elovl6 RACE上游引物和5’-Elovl6 RACE下游引物,将提取的中华绒螯蟹总RNA反转录成3’-cDNA和5’-cDNA第一链,以此为模板,进行3’和5’末端侧翼片段RACE,将得到的3’和5’末端侧翼片段分别与载体连接,克隆并测序;(3)将得到的末端侧翼片段与核心片段进行拼接,获得中华绒螯蟹Elovl6基因的全长序列。
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公开(公告)号:CN119685330A
公开(公告)日:2025-03-25
申请号:CN202411908576.8
申请日:2024-12-24
Applicant: 上海海洋大学
IPC: C12N15/12 , C07K14/435 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P7/6427 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了中华绒螯蟹HNF4基因及其克隆方法和应用,HNF4基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其编码的蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,首次从中华绒螯蟹中分离克隆HNF4基因获得全长完整序列。本发明通过提高HNF4基因的表达后,中华绒螯蟹肝胰腺中FAS、SCD、FAD6、FAD9、ELOVL4基因的表达量显著升高,HSL基因表达显著下调,而抑制HNF4基因的表达后结果相反,说明HNF4基因可促进脂肪酸合成相关基因的表达,作为转录因子在中华绒螯蟹脂肪酸合成过程中发挥作用,促进LC‑PUFA的合成,为甲壳动物HNF4基因功能研究提供参考。
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公开(公告)号:CN114231592A
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN202111594837.X
申请日:2021-12-24
Applicant: 上海海洋大学
Abstract: 本发明公开了一种在酸化水体中对中华绒螯蟹幼蟹存活力的判断方法,涉及现代农业产业河蟹养殖技术领域。本发明以幼蟹血清中功能反应的酶生物标记作为活力强度判断参数,在酸化水体中对中华绒螯蟹幼蟹存活力进行判断,从而筛选出存活力高的苗种、识别出存活力低的苗种,本发明的判定方法快速便捷,准确、可靠,克服了传统方法风险高、准确率差、不适合大规模水产养殖的缺陷。
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公开(公告)号:CN110684775A
公开(公告)日:2020-01-14
申请号:CN201910582773.8
申请日:2019-07-01
Applicant: 上海海洋大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/10 , C07K14/435 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明公开了一种中华绒螯蟹NKCC基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1。还公开了该基因的克隆方法,包括:对不同物种NKCC氨基酸序列比对后设计引物,中华绒螯蟹腮总RNA反转录成cDNA并经PCR扩增,获取NKCC基因核心片段;根据核心片段设计3’和5’端引物,将提取的总RNA反转录成3’和5’cDNA第一链,以此为模板RACE,获取3’和5末端RACE片段;将3’和5末端RACE片段分别与核心片段连接,得到NKCC全长序列。还公开了该基因的表达分析方法,显示在肠中表达量最高;通过盐胁迫实验推测该基因在渗透压调节中起重要作用。本发明为研究离子通道在中华绒螯蟹渗透调节中的作用机制提供了理论基础。
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公开(公告)号:CN101796930A
公开(公告)日:2010-08-11
申请号:CN201010103283.4
申请日:2010-01-29
Applicant: 上海海洋大学
CPC classification number: Y02A40/81
Abstract: 一种三疣梭子蟹雌体快速育膏方法,包括:育膏池准备、雌体选择和放养、养殖环境条件、饵料准备、日常管理和捕捞上市。根据三疣梭子蟹的卵巢发育规律,人工创造良好环境条件和投喂优质饵料,促进其卵巢快速发育,提高梭子蟹的营养价值和食用价值。本方法的关键为提供合适的温度:18-25℃、盐度:25-35ppt、底质:池底铺沙、底部充氧:微孔增氧管、饵料搭配:配合饲料和活饵料交替投喂。60天左右的快速育膏使梭子蟹的膏重指数由最初1%左右升高到7%以上,红膏率和成活率分别在70%和80%左右,提高雌体的营养、经济价值。本方法适合三疣梭子蟹养殖企业、捕捞单位和渔民使用,有利于三疣梭子蟹野生资源的保护和合理利用。
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公开(公告)号:CN114231592B
公开(公告)日:2023-11-24
申请号:CN202111594837.X
申请日:2021-12-24
Applicant: 上海海洋大学
Abstract: 本发明公开了一种在酸化水体中对中华绒螯蟹幼蟹存活力的判断方法,涉及现代农业产业河蟹养殖技术领域。本发明以幼蟹血清中功能反应的酶生物标记作为活力强度判断参数,在酸化水体中对中华绒螯蟹幼蟹存活力进行判断,从而筛选出存活力高的苗种、识别出存活力低的苗种,本发明的判定方法快速便捷,准确、可靠,克服了传统方法风险高、准确率差、不适合大规模水产养殖的缺陷。
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公开(公告)号:CN113412804A
公开(公告)日:2021-09-21
申请号:CN202110834879.X
申请日:2021-07-23
Applicant: 上海海洋大学
Abstract: 本发明公开一种中华绒螯蟹幼蟹存活力的判断方法,涉及现代农业产业河蟹养殖领域;本发明公开的一种中华绒螯蟹幼蟹存活力的判断方法,通过分析中华绒螯蟹在盐度胁迫下的应激表现和渗透压调节情况,从而判断中华绒螯蟹幼蟹存活力。本发明建立的中华绒螯蟹幼蟹存活力的判断方法具有极好的可靠性,节约了幼蟹至成蟹阶段的养殖资源,同时根据存活力的判断结果进行优胜劣汰,可以有效提高中华绒螯蟹育肥后成蟹的产品品质。
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