公开(公告)号：CN115074260B

公开(公告)日：2024-12-17

申请号：CN202210542548.3

申请日：2022-05-18

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  饶振辉 ,  王德林 ,  吕育财 ,  杨潇 ,  任立伟 ,  涂璇 ,  郭金玲

IPC: C12N1/16 ,  C12P17/12 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供一种耐热克鲁维酵母突变株及制备(S)‑(4‑氯苯基)‑(吡啶‑2‑基)‑甲醇的方法，利用Kluyveromyces thermotolerans ST耐热克鲁维酵母ST，保藏号CCTCC NO：M 2022498，整细胞催化制备手性药物贝托司汀药物中间体(S)‑(4‑氯苯基)‑(吡啶‑2‑基)‑甲醇的方法，属于生物催化技术领域。本发明采用常温常压等离子体诱变和适应性进化技术，筛选得到具有耐毒耐高温优势菌株耐热克鲁维酵母突变株，在反应温度40℃、底物4‑氯苯基‑(吡啶‑2‑基)‑甲酮浓度50g/L、菌体浓度50g/L、pH为8的PEG和磷酸二氢钠组成的双水相体系中，进行不对称还原反应36h，产物(S)‑(4‑氯苯基)‑(吡啶‑2‑基)‑甲醇的光学纯度和产率分别可以达到99.2%e.e.和92.9%。该方法具有温度低、操作简便、产品光学纯度和收率高等优点，具有产业化应用前景。

公开(公告)号：CN117487830A

公开(公告)日：2024-02-02

申请号：CN202311202918.X

申请日：2023-09-18

Applicant: 三峡大学

Inventor： 杨潇 ,  崇金阳 ,  贺诚 ,  饶欣悦 ,  涂璇 ,  龚大春 ,  徐晨阳 ,  刘克宁

IPC: C12N15/66 ,  C12N15/10 ,  C12N15/53

Abstract: 本发明公开了一种用于多片段快速高效组装构建质粒的方法，首先通过引物设计在待组装片段中引入TypeIIS限制性内切酶的酶切位点，并利用设计的引物进行扩增和纯化，然后将得到的待组装片段任意比混合后再TypeIIS限制性内切酶和T4 DNA连接酶的作用下进行自组装，得到目的片段；然后通过PCR技术扩增目的片段，最后将目的片段连接至线性化载体上，获得重组质粒，并利用菌落PCR技术和测序进行验证，从而获得正确组装的重组质粒。本发明在组装过程中不依赖于片段摩尔比，同时也不需要将目的片段转入专用载体后再与目标载体进行连接，显著简化了实验方法，提高了重组效率。

公开(公告)号：CN113265431B

公开(公告)日：2022-05-20

申请号：CN202110496791.1

申请日：2021-05-07

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  张书银 ,  肖开兴 ,  万里 ,  宋婷 ,  杨潇 ,  任立伟 ,  郭金玲

IPC: C12P7/42

Abstract: 本发明提供了一种多酶级联催化合成对香豆酸的方法。以对羟基苯丙酮酸为原料，经过羰基还原酶还原为对羟基苯基乳酸，然后通过脱水酶制备对香豆酸。本方法可以在管式反应器‑膜分离耦合装置中进行连续化生产，也可以在间歇反应釜法，羰基还原酶所需要的辅酶NAD(P)H通过葡萄糖脱氢酶和葡萄糖反应再生。每批羰基还原酶、葡萄糖脱氢酶、脱水酶均可回收利用5次以上，生产效率最高可达到50 g/L.h。本发明生产成本低、效率高、产品纯度好。

公开(公告)号：CN113801817A

公开(公告)日：2021-12-17

申请号：CN202111123705.9

申请日：2021-09-24

Applicant: 三峡大学

Inventor： 郭金玲 ,  孙语健 ,  方成 ,  龚大春 ,  吕育财 ,  任立伟 ,  杨潇

IPC: C12N1/20 ,  C05F11/08 ,  C05G3/00 ,  C05G3/80 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明涉及农业和微生物技术领域，公开了一株高耐盐耐重金属镉的解磷菌3‑1及其应用。所述菌株为路氏肠杆菌（Enterobacterludw igiistrain 3‑1）3‑1于2021年6月18日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC M 2021734。本发明的解磷菌（Enterobacterludwigiistrain 3‑1）3‑1具有溶磷、固氮、产植物生长激素、促进植株生长的作用，可应用于高盐度和高重金属浓度的土壤。将其应用于土壤和植物幼苗，可显著提高土壤有效磷的含量，大幅度增加植株的株高、湿重、干重和根茎长度，对农业生产及可持续发展具有重要的意义。

公开(公告)号：CN113652378B

公开(公告)日：2023-03-10

申请号：CN202111123664.3

申请日：2021-09-24

Applicant: 三峡大学

Inventor： 郭金玲 ,  孙语健 ,  方成 ,  龚大春 ,  吕育财 ,  任立伟 ,  杨潇

IPC: C12N1/20 ,  A01N63/20 ,  A01P21/00 ,  C09K17/14 ,  C12P17/10 ,  C12P27/00 ,  C09K101/00 ,  C09K109/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明涉及农业和微生物技术领域，公开了一株高耐盐耐重金属镉的解磷菌3‑1及其应用。所述菌株为路氏肠杆菌（Enterobacter ludwigii strain 3‑1）于2021年6月18日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏编号：CCTCC M 2021734。本发明的解磷菌3‑1（Enterobacter ludwigii strain 3‑1）具有溶磷、固氮、产植物生长激素、促进植株生长的作用，可应用于高盐度和高重金属浓度的土壤。将其应用于土壤和植物幼苗，可显著提高土壤有效磷的含量，大幅度增加植株的株高、湿重、干重和根茎长度，对农业生产及可持续发展具有重要的意义。

公开(公告)号：CN115477670A

公开(公告)日：2022-12-16

申请号：CN202211202401.6

申请日：2022-09-29

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  杨潇 ,  涂璇 ,  吕育财 ,  任立伟 ,  郭金玲 ,  万里 ,  胡慧琴

IPC: C07F9/30

Abstract: 本发明涉及采用L‑乙烯甘氨酸合成精草铵膦的方法，在氮气或氦气保护下，在L‑乙烯基甘氨酸的冰醋酸溶液中滴加甲基亚磷酸二乙酯，进行反应，反应完成后再在盐酸溶液中回流反应，最后在氨水溶液回流2‑8h，得到的产物经减压蒸馏，甲醇重结晶，得到精草铵膦晶体。将L‑乙烯基甘氨酸在冰醋酸条件下，与甲基亚磷酸乙酯加成反应后，经过酸解、氨中和、甲醇重结晶，可以得到光学纯度大于99%，收率大于95%的精草铵膦，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN115449488A

公开(公告)日：2022-12-09

申请号：CN202211066879.0

申请日：2022-09-01

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  叶顺 ,  何世霞 ,  任立伟 ,  杨潇 ,  张文 ,  吕育财

IPC: C12N1/18 ,  C12N13/00 ,  C12N15/01 ,  C12C12/00 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明提供一种选育低嘌呤啤酒酵母菌株的方法，属于菌种选育技术领域，筛选的菌株可以用于酿造高品质低嘌呤啤酒。本发明利用常温常压等离子体诱变仪对拉格啤酒酵母菌株进行诱变处理，TTC筛选以及结合高效液相色谱定量测定，经过诱变和筛选，在没有更改糖化工艺以及发酵工艺的前提下，选育出一株能够有效降低啤酒嘌呤含量的目标菌株C4，较原始菌株发酵液的嘌呤含量显著性降低17%左右。本发明将ARTP等离子体诱变仪与多孔板相结合，实现低嘌呤啤酒酵母的筛选，成功选育出一株低嘌呤啤酒酵母菌株。

公开(公告)号：CN115725668A

公开(公告)日：2023-03-03

申请号：CN202211202374.2

申请日：2022-09-29

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  杨潇 ,  涂璇 ,  吕育财 ,  任立伟 ,  郭金玲 ,  万里 ,  胡慧琴

IPC: C12P13/04 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N9/06 ,  C12N9/88 ,  C12N15/53 ,  C12N15/60 ,  C07K1/22 ,  C07K1/18 ,  C07K1/34 ,  C07K1/36 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种多酶级联制备L‑乙烯基甘氨酸的方法，以苏氨酸为原料，添加L‑氨基酸氧化酶和/或D‑氨基酸氧化酶进行生物催化反应得到β‑羟基丁酮酸；β‑羟基丁酮酸在乳酸脱水酶或苯基乳酸脱水酶的作用下，反应得到3‑烯‑丁酮酸；将制备得到的3‑烯‑丁酮酸中加入L‑谷氨酸脱氢酶和葡萄糖脱氢酶，反应得到L‑乙烯基甘氨酸。制得精细化工中间体L‑乙烯基甘氨酸，总收率75%‑90%，光学纯度为99%以上。该中间体的合成，不用各氨基和羧基的各种保护，不用高温和强酸。将L‑乙烯基甘氨酸在冰醋酸条件下，与甲基亚磷酸乙酯加成反应后，经过酸解、氨中和、甲醇重结晶，可以得到光学纯度大于99%，收率大于95%的精草铵膦。

公开(公告)号：CN113652378A

公开(公告)日：2021-11-16

申请号：CN202111123664.3

申请日：2021-09-24

Applicant: 三峡大学

Inventor： 郭金玲 ,  孙语健 ,  方成 ,  龚大春 ,  吕育财 ,  任立伟 ,  杨潇

IPC: C12N1/20 ,  A01N63/20 ,  A01P21/00 ,  C09K17/14 ,  C12P17/10 ,  C12P27/00 ,  C09K101/00 ,  C09K109/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明涉及农业和微生物技术领域，公开了一株高耐盐耐重金属镉的解磷菌3‑1及其应用。所述菌株为路氏肠杆菌（Enterobacter ludwigii strain 3‑1）于2021年6月18日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏编号：CCTCC M 2021734。本发明的解磷菌3‑1（Enterobacter ludwigii strain 3‑1）具有溶磷、固氮、产植物生长激素、促进植株生长的作用，可应用于高盐度和高重金属浓度的土壤。将其应用于土壤和植物幼苗，可显著提高土壤有效磷的含量，大幅度增加植株的株高、湿重、干重和根茎长度，对农业生产及可持续发展具有重要的意义。

公开(公告)号：CN117741163A

公开(公告)日：2024-03-22

申请号：CN202311755144.3

申请日：2023-12-18

Applicant: 三峡大学

Inventor： 李楚凤 ,  杨潇 ,  凃璇 ,  饶欣悦 ,  刘兴态 ,  杨怡 ,  张艳

IPC: G01N33/74 ,  G01N33/543 ,  C07K19/00 ,  C12N15/81

Abstract: 本发明涉及一种检测HSA‑GLP‑1‑His融合蛋白的双抗体夹心酶联免疫试剂盒及其应用，涉及生物检测技术领域，所述双抗体夹心酶联免疫试剂盒包括：特异性结合HSA‑GLP‑1‑His融合蛋白的包被酶标板抗体和特异性结合HSA‑GLP‑1‑His融合蛋白的检测抗体。本发明提供的试剂盒中分别将人白蛋白和His标签作为免疫原，特异性结合HSA‑GLP‑1‑His融合蛋白，可对发酵液中表达的HSA‑GLP‑1‑His融合蛋白进行定量检测，其具有操作简单，重复性好，灵敏度高，准确性好等特点，试剂盒批内变异系数为4.01％‑6.35％，批间变异系数为6.30‑9.57％，最低检测浓度为6.25ng/μl。