本发明公开了一种间日疟原虫PvMSP1重组抗原蛋白，是具有糖基化磷脂酰肌醇（glycophosphatidylinositol，GPI）锚定及表皮生长因子样（epidermal growth factor-like，EGF-like）结构域的蛋白（其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示）。此外，本发明还公开了上述重组抗原蛋白的制备方法，包括间日疟原虫PvMSP1基因序列的扩增、重组质粒的构建和鉴定、重组蛋白的诱导表达和纯化等步骤。实验证明，本发明的PvMSP1重组抗原蛋白对间日疟原虫感染病人血清抗体的检测具有敏感性高和特异性强等优点，在间日疟血清流行病学调查方面具有广泛的应用前景。