公开(公告)号：US20080124784A1

公开(公告)日：2008-05-29

申请号：US10594732

申请日：2005-03-30

申请人： Eita Ichige ,  Hisashi Semba ,  Toshiaki Shijuku ,  Shigeaki Harayama

发明人： Eita Ichige ,  Hisashi Semba ,  Toshiaki Shijuku ,  Shigeaki Harayama

IPC分类号： C12N9/88 ,  C07H21/04

CPC分类号： C12N9/88 ,  C12P13/004 ,  C12P41/001

摘要： This invention relates to S-hydroxynitrile lyase having excellent tolerance to heat, organic solvents, and the like, which is obtained by modifying at least one amino acid in the helix D3′, helix A, and β-sheet 2 domains in the amino acid sequence of wild-type S-hydroxynitrile lyase.

摘要翻译： 本发明涉及通过改变氨基酸中的螺旋D3'，螺旋A和β-片段2结构域中的至少一个氨基酸而获得的具有优异耐热性，有机溶剂等的S-羟基腈裂解酶。 野生型S-羟基腈裂解酶的序列。

公开(公告)号：US20050032159A1

公开(公告)日：2005-02-10

申请号：US10738922

申请日：2003-12-16

申请人： Eita Ichige ,  Hisashi Semba ,  Tadayuki Imanaka

发明人： Eita Ichige ,  Hisashi Semba ,  Tadayuki Imanaka

IPC分类号： C12N15/09 ,  C12N1/00 ,  C12N1/20 ,  C12N1/21 ,  C12N1/36 ,  C12R1/19 ,  C12P21/06 ,  C12P13/04

CPC分类号： C12N1/20 ,  C12N1/36

摘要： A method for high-density culture of a microorganism is proposed. This method is characterized by adjusting the cultivation temperature to a level lower than the optimum temperature for growth thereby causing the specific growth rate of the microorganism to reach a level of not more than 20% of the specific growth rate at the optimum temperature for growth. By this method of culture, it is made possible to culture the microorganism at a very high density. Further, this method of culture enables a useful substance, particularly an active type recombinant protein, to be produced in a large amount at a very low cost with high efficiency.

摘要翻译： 提出了一种微生物高密度培养的方法。 该方法的特征在于将培养温度调节至低于生长的最适温度的水平，从而使得微生物的比生长速率在生长的最适温度下达到不超过比生长速率的20％的水平。 通过这种培养方法，可以以非常高的密度培养微生物。 此外，这种培养方法能够以非常低的成本高效率地生产大量的有用物质，特别是活性型重组蛋白质。

公开(公告)号：US20090239273A1

公开(公告)日：2009-09-24

申请号：US12094330

申请日：2006-09-29

申请人： Hisashi Semba ,  Eita Ichige

发明人： Hisashi Semba ,  Eita Ichige

IPC分类号： C12P13/00 ,  C12N9/88 ,  C07H21/04

CPC分类号： C12N9/88 ,  C12P13/004

摘要： This invention relates to a novel high-activity modified S-hydroxynitrile lyase (SHNL). More particularly, this invention relates to novel high-activity modified SHNL that is obtained by substituting amino acids at given sites (14, 44, 66, 94, 103, 118, 122, 125, 127, 129, 147, 148, 152, 212, and 216) or inserting amino acid at a given site (between amino acids 128 and 129) of the amino acid sequence (SEQ ID NO: 2) of wild-type SHNL.

摘要翻译： 本发明涉及一种新的高活性修饰的S-羟基腈裂解酶（SHNL）。 更具体地说，本发明涉及通过在给定位点（14,44,66,94,103,118,122,125,127,129,147,148,152,154,144,144,134,144,134,144,134,132,134,144,134,144,134,132,144,134,132,134,134,144,134,144,134,132,144,134,142,144,144,13 212和216）或在野生型SHNL的氨基酸序列（SEQ ID NO：2）的给定位点（第128和129位氨基酸之间）插入氨基酸。

公开(公告)号：US20050032191A1

公开(公告)日：2005-02-10

申请号：US10738927

申请日：2003-12-16

申请人： Hisashi Semba ,  Eita Ichige ,  Masaharu Mukouyama

发明人： Hisashi Semba ,  Eita Ichige ,  Masaharu Mukouyama

IPC分类号： C12N15/09 ,  C12N1/21 ,  C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C07H21/04 ,  C12N15/74

CPC分类号： C12N9/88

摘要： A method for efficient production of an S-hydroxynitrile lyase by gene recombination using Escherichia coli is provided. A gene is formed by altering a codon in an S-hydroxyniitrylase gene originating in cassava (Manihot esculenta Crantz) without changing the amino acid sequence thereof till the frequency of codon usage wholly with an amino acid in Escherichia coli reaches a level of not less than 5%. According to the method for the production of an S-hydroxynitrile lyase by the use of the gene, the S-hydroxynitrile lyase can be produced in a large amount with an unusually high yield.

摘要翻译： 提供了使用大肠杆菌通过基因重组有效生产S-羟基腈裂解酶的方法。 通过改变源自木薯（Manihot esculenta Crantz）的S-羟基亚硝基酯基因中的密码子而不改变其氨基酸序列而形成基因，直到完全用大肠杆菌中的氨基酸进行密码子使用的频率达到不低于 5％。 根据通过使用该基因生产S-羟基腈裂解酶的方法，可以以异常高的产率大量生产S-羟基腈裂解酶。

公开(公告)号：US07531330B2

公开(公告)日：2009-05-12

申请号：US10594732

申请日：2005-03-30

申请人： Eita Ichige ,  Hisashi Semba ,  Toshiaki Shijuku ,  Shigeaki Harayama

发明人： Eita Ichige ,  Hisashi Semba ,  Toshiaki Shijuku ,  Shigeaki Harayama

IPC分类号： C12P13/00 ,  C12N9/88 ,  C12P21/06 ,  C12N15/74 ,  C07H21/04

CPC分类号： C12N9/88 ,  C12P13/004 ,  C12P41/001

摘要： This invention relates to S-hydroxynitrile lyase having excellent tolerance to heat, organic solvents, and the like, which is obtained by modifying at least one amino acid in the helix D3, helix A, and β-sheet 2 domains in the amino acid sequence of wild-type S-hydroxynitrile lyase.

摘要翻译： 本发明涉及通过改变氨基酸序列中的螺旋D3，螺旋A和β-片段2结构域中的至少一个氨基酸获得的对热，有机溶剂等具有优异耐受性的S-羟基腈裂解酶 的野生型S-羟基腈裂解酶。

公开(公告)号：US07214523B2

公开(公告)日：2007-05-08

申请号：US10738927

申请日：2003-12-16

申请人： Hisashi Semba ,  Eita Ichige ,  Masaharu Mukouyama

发明人： Hisashi Semba ,  Eita Ichige ,  Masaharu Mukouyama

IPC分类号： C12D21/06 ,  C12N9/88 ,  C12N1/20 ,  C07H21/02 ,  A61K35/78

CPC分类号： C12N9/88

摘要： A method for efficient production of an S-hydroxynitrile lyase by gene recombination using Escherichia coli is provided. A gene is formed by altering a codon in an S-hydroxyniitrylase gene originating in cassava (Manihot esculenta Crantz) without changing the amino acid sequence thereof till the frequency of codon usage wholly with an amino acid in Escherichia coli reaches a level of not less than 5%. According to the method for the production of an S-hydroxynitrile lyase by the use of the gene, the S-hydroxynitrile lyase can be produced in a large amount with an unusually high yield.

摘要翻译： 提供了使用大肠杆菌通过基因重组有效生产S-羟基腈裂解酶的方法。 通过改变源自木薯（Manihot esculenta Crantz）的S-羟基亚硝基酯基因中的密码子而不改变其氨基酸序列而形成基因，直到完全用大肠杆菌中的氨基酸进行密码子使用的频率达到不低于 5％。 根据通过使用该基因生产S-羟基腈裂解酶的方法，可以以异常高的产率大量生产S-羟基腈裂解酶。