非洲猪瘟病毒DP238L蛋白亚单位疫苗及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118878646A

    公开(公告)日:2024-11-01

    申请号:CN202410809814.3

    申请日:2024-06-21

    申请人: 吉林大学

    摘要: 本发明涉及一种非洲猪瘟病毒DP238L蛋白亚单位疫苗及其制备方法和应用,将密码子优化后的所述重组的非洲猪瘟病毒DP238L蛋白的编码基因序列克隆到原核表达载体中,得到含有非洲猪瘟病毒DP238L亚单位蛋白编码基因的重组质粒;再将所述含有非洲猪瘟病毒DP238L亚单位蛋白编码基因的重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞Rosetta中,得到重组工程菌;通过条件优化重组工程菌的菌株,得到高度表达该蛋白的条件;发酵培养高度表达的菌株,纯化后得到重组的非洲猪瘟病毒DP238L亚单位可溶性融合蛋白,制备方法简单、成本低能够达到国家现有标准,并且相关方法可以结合应用于疫苗的开发,具有重要的社会效益。

    一种优化后的非洲猪瘟病毒蛋白p30的核苷酸序列及其应用

    公开(公告)号:CN118459556A

    公开(公告)日:2024-08-09

    申请号:CN202410548334.6

    申请日:2024-05-06

    摘要: 本发明提供一种优化后的非洲猪瘟病毒蛋白p30的核苷酸序列及其在制备预防非洲猪瘟病毒的mRNA疫苗上的应用。编码非洲猪瘟病毒蛋白p30的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码非洲猪瘟病毒蛋白p30的mRNA的核苷酸序列为依次连接的SEQ ID NO.2所示5’UTR‑SEQ ID NO.1所示核苷酸序列‑SEQ ID NO.3所示3’UTR‑3’端聚腺苷酸序列,所述3’端聚腺苷酸序列中A的个数为50‑200。所述mRNA疫苗包括前述非洲猪瘟病毒蛋白p30的mRNA。经过本发明序列优化后的p30‑mRNA序列可以在真核细胞293T中成功表达出p30蛋白,经p30‑mRNA疫苗免疫的小鼠能产生与p30蛋白特异性结合的抗体。为预防非洲猪瘟病毒提供有效手段。

    非洲猪瘟病毒p22蛋白ELISA抗体检测试剂盒

    公开(公告)号:CN118440160A

    公开(公告)日:2024-08-06

    申请号:CN202410547552.8

    申请日:2024-05-06

    摘要: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒p22蛋白ELISA抗体检测试剂盒及其应用。该试剂盒包括酶标板、阳性对照血清、阴性对照血清、酶标二抗、样品稀释液、20倍浓缩洗涤液、底物液A、底物液B、终止液,其中所述酶标板包被有非洲猪瘟病毒p22蛋白抗原表位多肽组合物。该抗原表位多肽组合物为序列表中序列1所示的多肽、序列表中序列2、序列表中序列3所示的多肽中的两种或两种以上的任意组合。本试剂盒使用化学合成抗原肽包被酶标板,抗原用量少、灵敏性和特异性高,可以高效地检测是否有非洲猪瘟病毒抗体。本发明试剂盒敏感性高、特异性好、且操作便捷,具有良好的市场前景。

    一种改变糖基化修饰并用于非洲猪瘟病毒疫苗的重组蛋白及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118147170A

    公开(公告)日:2024-06-07

    申请号:CN202311675903.5

    申请日:2023-12-07

    发明人: 邹永龙 曲峰

    摘要: 本发明涉及一种改变糖基化修饰并用于非洲猪瘟病毒疫苗的重组蛋白及制备方法和应用。具体地说,本发明涉及一种CD2v重组蛋白,该重组蛋白的至少一个糖基化位点的氨基酸发生了替换,并且该替换导致所述重组蛋白的糖基化受到抑制。本发明还涉及所述重组蛋白的编码序列、表达载体、宿主细胞、制备方法及其在制备用于预防或治疗肥猪猪瘟病毒感染中的药物中的应用,以及包含CD2v重组蛋白的药物组合物、用于制备非洲猪瘟疫苗的方法和由此制得的非洲猪瘟疫苗。利用本发明的所述重组蛋白制得的疫苗具有良好的免疫原性,免疫猪后能诱导较高水平的特异性IgG。

    非洲猪瘟多表位重组蛋白ASFVMEA及应用

    公开(公告)号:CN117886896B

    公开(公告)日:2024-06-07

    申请号:CN202410024166.0

    申请日:2024-01-08

    摘要: 本发明属于非洲猪瘟检测领域,公开了非洲猪瘟多表位重组蛋白ASFVMEA及应用。选择p30、p54、p72、pA104R蛋白的抗原优势表位,对重组抗原构建策略进行了优化与筛选。将表达的非洲猪瘟病毒多表位重组蛋白进行表达纯化并作为包被抗原,建立并优化了间接ELISA检测方法,能够实现对于非洲猪瘟病毒抗体的检测。本发明建立间接ELISA方法,用以检测非洲猪瘟病毒的抗体水平,具有重复性好、特异性强、灵敏度高的特点,操作步骤简单,结果可靠。因此,本发明提供的基于非洲猪瘟病毒多表位蛋白的非洲猪瘟病毒间接ELISA检测试剂盒适合临床大样本的检测,适合大规模推广。