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公开(公告)号：CN118667860A
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202410690071.2
申请日：2024-05-30
申请人： 淮阴工学院
摘要： 本发明公开了一种高稳定性枯草芽孢杆菌工程菌株及其构建方法和应用，所述高稳定性枯草芽孢杆菌工程菌株以枯草芽孢杆菌感受态细胞为出发菌株，导入所述的枯草芽孢杆菌自溶基因抗性敲除质粒载体获得。本发明通过构建抗性敲除载体，并转化进荧光标记的枯草芽孢杆菌获得突变菌株，由突变菌株所制备的孢子经过荧光显微镜观察其稳定性，并通过流式细胞仪检测其荧光强度，可发现本发明中构建的高稳定性枯草芽孢杆菌所制备的孢子稳定性得到显著提高，敲除自溶基因后荧光标记芽孢的发光率和存活时间都有显著提高，可应用为一种新型稳定纳米材料。
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公开(公告)号：CN117802024A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202311856029.5
申请日：2023-12-29
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/75 , C12N9/22 , C12N15/50 , C12N15/113 , A61K39/215 , A61K39/225 , A61P31/14 , A61P37/04 , C12R1/125
摘要： 本发明公开了三种孢子蛋白融合稳定展示猪腹泻病毒三种关键抗原重组枯草芽孢杆菌及其构建方法和应用，所述重组菌以枯草芽孢杆菌为出发菌株，将包含Cas9蛋白的表达载体PBE‑Cas9以及优化的PDCOV、TGEV和PEDV三种猪腹泻病毒的关键抗原部分S1蛋白片段合成基因PDCOV‑S1、TGEV‑S1和PEDV‑S1中的任意一种或者多种，所述PDCOV‑S1、TGEV‑S1和PEDV‑S1其序列分别如SEQ ID NO.1‑3所示。本发明将上述两种载体结合转入枯草芽孢杆菌中构建三种具有猪腹泻病毒抗原位点的重组枯草芽孢杆菌，并通过小鼠实验初步验证重组菌具有良好的免疫效力。本发明为猪腹泻病毒新型口服疫苗的研究提供了研究基础。
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公开(公告)号：CN118222470A
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202410299360.X
申请日：2024-03-15
申请人： 淮阴工学院
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/62 , C12N15/57 , C12N15/34 , C07K14/01 , A61K39/12 , A61P31/20 , C12R1/07
摘要： 本发明公开了两种信号肽高效引导分泌表达非洲猪瘟病毒抗原P54或P30的基因工程菌构建和应用，所述基因工程菌以解淀粉芽孢杆菌为出发菌株，将编码蛋白酶NPR和NprB的信号肽核苷酸序列分别与优化改造后编码抗原P54和P30的核苷酸序列进行融合构成新的融合基因sRP54和sBP30转化到解解淀粉芽孢杆菌得到基因工程菌株。本发明通过对发酵条件的优化，抗原P54、P30的浓度分别提高约1.8倍和6倍，表达的重组抗原P54和P30能有效刺激小鼠P54和P30抗体的产生，实现了非洲猪瘟病毒(ASFV)关键抗原P54和P30在芽孢杆菌中高效稳定分泌表达，为制备高效的ASFV芽孢杆菌口服疫苗奠定基础。
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公开(公告)号：CN117802023A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202311856017.2
申请日：2023-12-29
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/34 , C12N9/22 , C12N15/113 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61P31/20 , A61P37/04 , C12R1/125
摘要： 本发明公开了两种孢子蛋白稳定融合表达非洲猪瘟关键抗原的重组解淀粉芽孢杆菌及其构建方法和应用，本发明重组菌是通过基因编辑和化学转化的方法将非洲猪瘟p72、p30和p54蛋白整合到解淀粉芽孢杆菌CPLK1314孢子表面，然后将重组菌分别以及混和免疫小鼠，该重组菌不仅是生物安全的益生菌，还可以诱导小鼠的体液和细胞免疫，进而诱导针对非洲猪瘟抗原的特异性抗体的产生。本研究发明的重组解淀粉芽孢杆菌，不仅为非洲猪瘟口服疫苗的研究提供理论基础，还提供了研发新思路。
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