一种硫酸基转移酶的编码基因及其蛋白质

    公开(公告)号:CN108949712A

    公开(公告)日:2018-12-07

    申请号:CN201810856684.3

    申请日:2018-07-31

    发明人: 刘涛

    IPC分类号: C12N9/10 C12N15/54

    CPC分类号: C12N9/13 C12Y208/02

    摘要: 本发明属于基因工程技术领域,具体是一种硫酸基转移酶的编码基因及其蛋白质。所述基因来源于角叉菜(Chondrus crispus),命名为GcrSULT基因,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示的序列,其编码蛋白质的氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示的序列,该蛋白质为硫酸基转移酶。本发明通过基因克隆技术克隆出该基因序列,构建原核表达载体,通过对重组蛋白进行酶活性检测,证实了其具有硫酸基转移酶的功能;且底物特异性与已知的其他硫酸基转移酶均不完全相同。本发明提供的硫酸基转移酶的基因及其编码的蛋白质为硫酸基转移酶家族的研究提供了优异的基因资源和酶资源。

    一种肝素前体硫酸化修饰酶的表达方法

    公开(公告)号:CN106754808A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201710033024.0

    申请日:2017-01-13

    IPC分类号: C12N9/10 C12N15/70

    摘要: 本发明涉及一种肝素前体硫酸化修饰酶的表达方法,该方法涉及生物技术领域,具体涉及新的核苷酸序列、原核表达系统的构建和制备方法。将人工合成的6‑ost‑3序列连接到pET‑28a表达载体上,并转化入大肠杆菌BL21感受态细胞中,经IPTG诱导表达胞内可溶性蛋白。溶菌酶破碎细胞,并收集上清,经镍柱纯化获得6‑OST‑3酶蛋白,其比酶活为1.53U/mg。本发明使用大肠杆菌表达制备6‑OST‑3酶蛋白,具有实验条件简单、成本低廉的优点,6‑OST‑3作为工具酶对于大分子肝素的修饰合成具有重要意义。