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公开(公告)号：CN108949815A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810729443.2
申请日：2018-07-04
Applicant: 青岛袁策集团有限公司
CPC classification number: C12N15/8289 , C12N15/65 , C12N15/66
Abstract: 本申请公开了一种基于PTC1基因的转基因水稻不育系的培育方法，包括以下步骤：A、MRFP1基因表达盒的获得；B、小麦花粉致死基因Ki的扩增；C、水稻PTC1盒的获得；D、小麦花粉特异性启动子Pg47的扩增；E、各基因表达元件的连接。所述步骤E、各基因表达元件的连接，进一步包括：第一步，将MRFP1基因表达元件连接到pCAMBIA1390载体上；第二步，将完整的水稻PTC1基因引入第一步中已经引入MRFP1基因表达元件的pCAMBIA1390载体上。本发明F1代杂合体在自交结实过程中遵循孟德尔分离定律，产生的后代既有能保持三连锁基因的杂合体，又有无育性的不育系。
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公开(公告)号：CN108949814A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810729442.8
申请日：2018-07-04
Applicant: 青岛袁策集团有限公司
CPC classification number: C12N15/8289 , C12N15/8231
Abstract: 本申请公开了一种基于TDR基因的转基因水稻不育系的培育方法，包括以下步骤：A、TagRFP基因表达盒的获得；B、小麦花粉致死基因Ki的扩增；C、水稻TDR盒的获得：D、花粉特异性启动子Pg47的扩增；E、各基因表达元件的连接。所述步骤E、各基因表达元件的连接，进一步包括：第一步，将TagRFP基因表达元件连接到pCAMBIA1390载体上；第二步，将完整的水稻TDR基因引入第一步中已经引入TagRFP基因表达元件的pCAMBIA1390载体上。本发明F1代杂合体在自交结实过程中遵循孟德尔分离定律，产生的后代既有能保持三连锁基因的杂合体，又有无育性的不育系。
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公开(公告)号：CN108949808A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810728402.1
申请日：2018-07-04
Applicant: 青岛袁策集团有限公司
CPC classification number: C12N15/8289 , C12N15/65 , C12N15/66
Abstract: 本申请公开了一种基于DPW基因的转基因水稻不育系的培育方法，包括以下步骤：A、mCherry基因表达盒的获得；B、玉米花粉致死基因ZMAA1的扩增；C、水稻基因表达盒DPW的获得；D、玉米花粉特异性启动子Pg47的扩增；E、各基因表达元件的连接。所述步骤E、各基因表达元件的连接，包括：将mCherry基因表达元件和玉米花粉致死基因ZMAA1连接到pCAMBIA1300载体上，再将完整的水稻DPW基因、玉米花粉特异性启动子Pg47引入到载体上。本发明F1代杂合体在自交结实过程中遵循孟德尔分离定律，产生的后代既有能保持三连锁基因的杂合体，又有无育性的不育系。
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公开(公告)号：CN108949816A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810729444.7
申请日：2018-07-04
Applicant: 青岛袁策集团有限公司
CPC classification number: C12N15/8289 , C12N15/8231
Abstract: 本申请公开了一种基于PAIR1基因的转基因水稻不育系的培育方法，包括以下步骤：A、水稻PAIR1基因表达盒的获得；B、tdTomato基因表达盒的获得；C、禾本科植物花粉特异性启动子Pg47的扩增；D、小麦花粉致死基因Ki的扩增；E、各基因表达元件的连接。所述步骤E、各基因表达元件的连接，进一步包括：第一步，将完整的水稻PAIR1基因连接到pCAMBIA3301载体上；第二步，将tdTomato基因表达元件引入第一步中已经引入PAIR1基因的pCAMBIA3301载体上。本发明F1代杂合体在自交结实过程中遵循孟德尔分离定律，产生的后代既有能保持三连锁基因的杂合体，又有无育性的不育系。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108949775A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810728701.5
申请日：2018-07-04
Applicant: 青岛袁策集团有限公司
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/8289
Abstract: 本申请公开了一种基于小麦花粉致死基因Ki的转基因水稻不育系的培育方法，包括以下步骤：小麦花粉致死基因Ki的扩增；B、mVenus基因表达盒的获得；C、水稻基因表达盒的获得；D、小麦花粉特异性启动子Pg47的扩增；E、各基因表达元件的连接。包括：第一步，将小麦致死基因Ki引入到pCAMBIA1300载体上，再连接mVenus基因表达元件、完整的水稻EAT1基因、小麦花粉特异性启动子Pg47到pCAMBIA1300载体上。本发明F1代杂合体在自交结实过程中遵循孟德尔分离定律，产生的后代既有能保持三连锁基因的杂合体，又有无育性的不育系。
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公开(公告)号：CN108949810A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810729313.9
申请日：2018-07-04
Applicant: 青岛袁策集团有限公司
CPC classification number: C12N15/8289 , C12N15/65 , C12N15/66
Abstract: 本申请公开了一种基于CYP704B2基因的转基因水稻不育系的培育方法，包括以下步骤A、EYFP基因表达盒的获得；B、小麦花粉致死基因Ki的扩增；C、小麦花粉特异性启动子Pg47的扩增；D、水稻基因表达盒CYP704B2的获得；E、各基因表达元件的连接。所述步骤E、各基因表达元件的连接，包括：首先将EYFP基因表达元件、小麦花粉致死基因Ki和小麦花粉特异性启动子Pg47连接到pCAMBIA1300载体上，再将完整的水稻CYP704B2基因引入到连接到复合载体上。本发明F1代杂合体在自交结实过程中遵循孟德尔分离定律，产生的后代既有能保持三连锁基因的杂合体，又有无育性的不育系。
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公开(公告)号：CN108977459A
公开(公告)日：2018-12-11
申请号：CN201810794442.6
申请日：2018-07-18
Applicant: 青岛袁策集团有限公司
Abstract: 本申请公开了一种植株突变体的制备方法，包括以下步骤：T1.构建CRISPR/cas9基因敲除载体，敲除CYP78A13基因；T2.农杆菌转化；T3.基因敲除检测；T4.转基因植株表型鉴定。本发明植株突变体的制备方法方法，以水稻细胞核育性基因作为目标基因，利用CRISPR/cas9基因沉默进行基因敲除，基因沉默后丧失功能，细胞发育长成完整植株，但不具备发育成正常功能的花粉，并能够以此为研究对象，用于创制不育系。
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公开(公告)号：CN108949812A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810729315.8
申请日：2018-07-04
Applicant: 青岛袁策集团有限公司
CPC classification number: C12N15/8289 , C12N15/8231
Abstract: 本申请公开了一种基于DTM1基因的转基因水稻不育系的培育方法，包括以下步骤：A、水稻基因表达盒DTM1的获得；B、tdTomato基因表达盒的获得；C、玉米特异性启动子Pg47的扩增；D、玉米花粉致死基因ZMAA1的扩增；E、各基因表达元件的连接。所述步骤E、各基因表达元件的连接，包括将完整的水稻DTM1基因引入到pCAMBIA1300载体上，再连接tdTomato基因表达元件、小麦花粉特异性启动子Pg47和玉米花粉致死基因ZMAA1到pCAMBIA1300载体上。本发明F1代杂合体在自交结实过程中遵循孟德尔分离定律，产生的后代既有能保持三连锁基因的杂合体，又有无育性的不育系。
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公开(公告)号：CN109652446A
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201811586556.8
申请日：2018-12-24
Applicant: 青岛袁策集团有限公司
Abstract: 本申请公开了一种先将片段进行融合然后转化构成载体的构建方法，包括以下步骤：A、提取待转化作物DNA；B、分别获得多种连锁基因表达盒；C、获取去除Hpt基因的pCAMBIA1300质粒的；D、各个表达盒的连接；E、融合片段与pCAMBIA1300-hpt-质粒的连接。进一步包括：构建双T-DNA载体，其中一个T-DNA区含有三连锁基因，另一个T-DNA区含有抗性基因，用于愈伤转化及植株再生阶段的筛选；所述三连锁基因分别为：DsRed基因、EAT1基因、ZmAA基因。本发明提供了一种基于DsRED荧光蛋白基因为报告基因的不含潮霉素抗性基因的工程菌株。本发明还提供了一种将片段进行融合，然后转化载体的一种实验新思路。
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