公开(公告)号：CN106755080A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201710034405.0

申请日：2017-01-18

Applicant: 青岛农业大学

Inventor： 刘新 ,  马倩 ,  侯丽霞 ,  郝杰

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/00

CPC classification number: C12N15/8205 ,  C12N15/8202 ,  C12N15/8207

Abstract: 本发明提供了一种快速高效地在葡萄中瞬时转化基因的转化方法。本发明将载有重组质粒的GV3101农杆菌菌株和p19菌株分别培养，等体积混合备用；选择5周龄的葡萄组培苗的植物组织，采用注射器法高压将菌液完全浸入植物组织；之后植物组织保持水分和透气；经黑暗培养和光照培养后，经检测即可用于后续实验。本发明将葡萄组培苗叶片直接置于注射器内，依靠注射器拉动带来的瞬时高压迅速的实现了农杆菌菌液的浸入，操作简单，同时减少了操作的时间，节省了人力物力和财力。另外这种方法还保证了叶片不会出现传统真空泵抽气制造高压时，由于抽气时间过长而造成的植物细胞膜破裂而引起细胞的死亡，极大地提高了转化的效率。