公开(公告)号：CN105647854A

公开(公告)日：2016-06-08

申请号：CN201610137613.9

申请日：2016-03-05

Applicant: 青岛农业大学

Inventor： 董焕声 ,  王明明 ,  潘庆杰

IPC: C12N5/073 ,  C12N5/075 ,  C12N5/076

CPC classification number: C12N5/0603 ,  C12N5/0609 ,  C12N5/061

Abstract: 本发明涉及一种以睾丸支持细胞为滋养层进行体外授精的方法，包括以下步骤：(1)将睾丸支持细胞的分离培养，制备支持细胞滋养层；(2)将精子导入盛有已平衡好的HTF获能液中孵育1h；(3)卵子的收集；(4)将洗涤过的卵子转入已平衡的有睾丸支持细胞单层的培养基；(5)将20ul孵育好的精子悬浮液加到含有卵子的培养液中；(6)将培养皿放回37℃、5％CO2培养箱孵育，保持5-6h；(7)将有第二极体和原核的卵从培养基中捡选出来，转入培养基中进行培养。本发明的优点是授精率和发育率高。

公开(公告)号：CN106701664A

公开(公告)日：2017-05-24

申请号：CN201611048874.X

申请日：2016-11-25

Applicant: 青岛农业大学

Inventor： 董焕声 ,  杜淼 ,  王明明 ,  李桢 ,  潘庆杰

IPC: C12N5/076

CPC classification number: C12N5/061 ,  C12N2502/04

Abstract: 本发明涉及一种以睾丸支持细胞为滋养层提高精子活力的方法，其主要包括以下步骤：（1）睾丸支持细胞的分离培养；（2）支持细胞滋养层的制备：支持细胞分离培养2天后，细胞单层形成，加入丝裂霉素C处理2小时，制备成睾丸支持细胞滋养层；（3）从成熟雄性动物的附睾中获取精子，加入以睾丸支持细胞为滋养层的培养体系中，将精子与支持细胞共培养。本发明的优点是以睾丸支持细胞为滋养层体外培养睾丸、附睾内的精子，解决了现有技术中体外精子活力低的问题，提高了体外精子的活力和活率，增加了精子的受精能力。