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公开(公告)号：CN106434724A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610893201.8
申请日：2016-10-13
Applicant: 郑州轻工业学院
CPC classification number: C12N15/70 , A24B3/14 , C07K14/195
Abstract: 本发明公开了一种耐热细胞溶解素及其在烟草薄片制备工艺中的应用。所述的细胞溶解素是将SEQ ID NO.1所示的耐热细胞溶解素基因克隆到大肠杆菌中，再通过蓝白斑筛选含有该耐热细胞溶解素基因的阳性克隆子，最后对阳性克隆子进行诱导表达，即得。本发明的细胞溶解素在高温条件下仍然具有极高的活性，其最适活性温度为50-85℃，适应于烟草原料浸提的高温工艺，能够用于协助制备烟草薄片，提高浸提效率。实验结果表明，本发明的细胞溶解素参与到烟草三次浸提和打浆过程中，能够使薄片制备过程中的浸提液中蛋白质含量降低、可溶性总糖增加；制备成型的薄片经过检测后木质素含量有所减少，通过评析后烟草香味物质增加，杂气减少。
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公开(公告)号：CN105294687B
公开(公告)日：2016-11-16
申请号：CN201510872229.9
申请日：2015-12-02
Applicant: 郑州轻工业学院
IPC: C07D471/04
Abstract: 本发明公开了一种离子对双水相萃取分离吡咯喹啉醌的方法，该方法包括：制备含有吡咯喹啉醌的混合液，采用离子对双水相萃取体系对含有吡咯喹啉醌的混合液进行萃取，分离上层，得到富含吡咯喹啉醌的有机层，将富含吡咯喹啉醌的有机层上阴离子交换树脂，依次用双蒸水、稀酸冲洗，收集稀酸部位，冷冻干燥，纯化，得到吡咯喹啉醌。本发明根据PQQ结构的特点，即PQQ的结构中包含3个羧基，显示酸性，利用离子对双水相体系对其进行分离纯化。本发明采用四丁基氢氧化铵作为离子对试剂，与PQQ结合在一起，使PQQ选择性的分配在有机相中，而其他水溶性杂质分配到水相中，从而达到高效性、高选择性地分离纯化PQQ。
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公开(公告)号：CN104892597B
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201510244788.5
申请日：2015-05-14
Applicant: 郑州轻工业学院
IPC: C07D471/04
Abstract: 本发明公开了一种络合萃取法分离纯化发酵液中的吡咯喹啉醌，它的步骤如下：（1）将菌种发酵，得到发酵液；（2）发酵液经高速离心，将上清液在双溶质萃取体系进行络合萃取，其中三辛胺为络合剂，正己烷为稀释剂，得到富含吡咯喹啉醌的上层液；（3）将富含吡咯喹啉醌的上层液用氨水反萃，氨水层减压浓缩后，冷冻干燥，得到吡咯喹啉醌粗品；（4）将吡咯喹啉醌粗品用超纯水溶解，用HCL将pH调至3~4后，加入乙醇，在20~25℃下搅拌5~6h，然后静置12-24h，得到吡咯喹啉醌。本发明利用上述生产制备方法，条件简单，过程快捷，便于大规模工业化生产，对促进PQQ的产业化有重要意义。
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公开(公告)号：CN105349478A
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201510974135.2
申请日：2015-12-23
Applicant: 郑州轻工业学院
Abstract: 本发明公开了一种生物法降解烟草浸出液中甾醇类化合物的方法：通过培养基从烟草表面分离甾醇降解菌，利用种子培养基扩大培养该微生物，搜集对数期细胞，接种于烟草浸提液，发酵。本发明从烟叶表面分离获得降解甾醇的微生物，利用种子培养基进行扩大后获得对数期细胞，添加到烟草浸提液中可以有效降解其中的甾醇含量，甾醇总降解率达到35.5%。甾醇为烟草有害物质苯并芘的前体化合物，该发明为烟草生物减害提供参考，具有很高的原创性，有望应用于降低苯并芘的再造烟叶生产过程。
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公开(公告)号：CN105154479A
公开(公告)日：2015-12-16
申请号：CN201510466265.5
申请日：2015-07-31
Applicant: 郑州轻工业学院
Abstract: 一种微生物转化合成3-羟基β-紫罗兰酮和β-紫罗兰酮方法，它的步骤如下：（1）分散泛菌培养，将分散泛菌菌株接种到装有种子培养基的三角瓶中，在pH=6.5，30-34℃的条件下，180-200r/min振荡培养10-18h，得到种子液；（2）种子罐发酵；（3）得到3-羟基β-紫罗兰酮和β-紫罗兰酮。本发明通过对其发酵培养基进行摸索，得到了能够高效降解叶黄素最优发酵培养基方案并能够生成具有香味物质的3-羟基β-紫罗兰酮和β-紫罗兰酮。3-羟基β-紫罗兰酮和β-紫罗兰酮是重要的香味物质，烟草中添加少量的此种香味物质可在很大程度上提升烟草品质。本发明在利用生物降解叶黄素，并产生天然香味物质方面呈现出巨大的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106399399B
公开(公告)日：2019-10-29
申请号：CN201610785315.0
申请日：2016-08-30
Applicant: 郑州轻工业学院
Abstract: 本发明公开了一种生物降解叶黄素生成8‑甲基‑α‑紫罗兰酮的方法，所述的方法是利用霍氏肠杆菌降解叶黄素生成8‑甲基‑α‑紫罗兰酮。本发明首次采用霍氏肠杆菌降解叶黄素，生成具有香味的物质8‑甲基‑α‑紫罗兰酮，开辟了微生物降解叶黄素生成香味物质的新途径，解决了传统使用物理化学方法降解叶黄素生成香味物质不易分离，试剂多，对环境造成负担的技术问题，具有反应条件温和、易分离、绿色环保等特点。本发明通过对比不同底物浓度的降解效果，发现叶黄素在发酵培养基中的浓度为400～700mg/L时，叶黄素降解最佳。
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公开(公告)号：CN106367444B
公开(公告)日：2017-12-05
申请号：CN201610763868.6
申请日：2016-08-30
Applicant: 郑州轻工业学院
Abstract: 本发明公开了一种生物降解番茄红素生成6‑甲基‑5‑庚烯‑2‑酮和异辛二烯酮的方法，所述的方法是利用蜡状芽孢杆菌降解番茄红素生成6‑甲基‑5‑庚烯‑2‑酮和异辛二烯酮。本发明首次采用蜡状芽孢杆菌降解番茄红素，生成香味物质6‑甲基‑5‑庚烯‑2‑酮和异辛二烯酮，开辟了微生物降解番茄红素生成香味物质的新途径，具有反应条件温和、易分离、绿色环保等特点。本发明通过对比不同底物浓度的降解效果，发现番茄红素在发酵培养基中的浓度为300～500mg/L时，番茄红素降解最佳。
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公开(公告)号：CN106399399A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201610785315.0
申请日：2016-08-30
Applicant: 郑州轻工业学院
Abstract: 本发明公开了一种生物降解叶黄素生成8-甲基-α-紫罗兰酮的方法，所述的方法是利用霍氏肠杆菌降解叶黄素生成8-甲基-α-紫罗兰酮。本发明首次采用霍氏肠杆菌降解叶黄素，生成具有香味的物质8-甲基-α-紫罗兰酮，开辟了微生物降解叶黄素生成香味物质的新途径，解决了传统使用物理化学方法降解叶黄素生成香味物质不易分离，试剂多，对环境造成负担的技术问题，具有反应条件温和、易分离、绿色环保等特点。本发明通过对比不同底物浓度的降解效果，发现叶黄素在发酵培养基中的浓度为400～700mg/L时，叶黄素降解最佳。
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公开(公告)号：CN106387982A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201611178971.0
申请日：2016-12-19
Applicant: 郑州轻工业学院
IPC: A24B3/14
CPC classification number: A24B3/14
Abstract: 本发明公开了一种利用微生物制备再造烟叶的方法，属于烟草技术领域。所述的方法是将蜡状芽孢杆菌加入至浸泡的烟草原料中，降解烟草原料中的蛋白质，参与美拉德反应，产生潜香物质。本发明在烟草原料浸提过程中加入蜡状芽胞杆菌，能够最大程度上降解烟草原料中的蛋白质，生成多肽或游离的氨基酸，同时，利用浸提过程中烟草原料中的可溶性还原糖溶解于浸提液，使蛋白质的降解产物与可溶性还原糖发生美拉德反应，从而产生具有杂环化合物的潜香物质。这些潜香物质在卷烟燃烧时通过热裂解，参与复杂的化学反应，产生香气，从而使再造烟叶和卷烟原料之间产生良好的协调性和配伍性，提高卷烟的吃味品质。
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公开(公告)号：CN105255960B
公开(公告)日：2016-09-21
申请号：CN201510749223.2
申请日：2015-11-06
Applicant: 郑州轻工业学院
Abstract: 本发明公开了一种利用菌体细胞破碎上清液并加入吡咯喹啉醌合成前体物——人工合成的多肽，从而在体外合成吡咯喹啉醌的方法，将吡咯喹啉醌产生菌按照5%的比例接入发酵培养基中，在28℃下震荡培养3d，获得菌悬液；菌悬液经高速离心，获得菌体，用缓冲液将菌体悬浮，然后用超声法破碎，经高速离心，取上清液；将人工合成的前体物加入到上清液中，在35‑50℃恒温条件下反应12‑26h。该方法条件简单，过程快捷，便于大规模工业化生产，对促进吡咯喹啉醌的产业化具有重要意义。
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