公开(公告)号：CN106199003A

公开(公告)日：2016-12-07

申请号：CN201610577592.2

申请日：2016-07-21

Applicant: 郑州安图生物工程股份有限公司

Inventor： 温庆仕 ,  蔡克亚 ,  曹洁茹 ,  崔爽爽 ,  封松利 ,  刘美丽 ,  赵高岭 ,  王则宇 ,  付光宇 ,  吴学炜

IPC: G01N33/68

CPC classification number: G01N33/6851

Abstract: 本发明公开了一种基于飞行时间质谱原理的微生物肽质量指纹图谱库的构建方法：将获得的菌株依据其生理习性进行纯培养，依次获得对数期的菌株；并通过形态学、分类学、方法学对其进行鉴定；然后对确认的菌株进行预处理，干燥后采用乙醇/甲酸法和80%TFA提取法提取肽指纹图谱；并采用MALDI-TOF MS质谱平台进行图谱的采集、处理，然后对菌株图谱进行参数确定，并将确定的标准谱图与菌株名称进行统一，标注该菌株的建库方法，完成该菌株的建库；其他菌株建库方法依次类推，完成微生物肽质量指纹图谱库的构建。本发明提供了从菌株的调查到数据库构建的一套完整方法，该数据库微生物种类齐全，将满足于微生物相关行业的鉴定需求。

公开(公告)号：CN106226530A

公开(公告)日：2016-12-14

申请号：CN201610579369.1

申请日：2016-07-21

Applicant: 郑州安图生物工程股份有限公司

Inventor： 曹洁茹 ,  蔡克亚 ,  温庆仕 ,  崔爽爽 ,  封松利 ,  刘美丽 ,  赵高岭 ,  王则宇 ,  付光宇 ,  吴学炜

IPC: G01N33/68

CPC classification number: G01N33/6851

Abstract: 本发明公开了一种用于MALDI TOF细菌及酵母类真菌鉴定的菌体预处理方法：首先将样本分离纯化，微生物纯菌落用培养基培养；挑取菌体，用超纯水悬浮、混匀；加入无水乙醇混匀，使其体积分数为70~80%，静置、离心，去上清；将沉淀的菌体恒温温育，然后加入50%的甲酸溶液，充分混合后，加乙腈溶液，甲酸与乙腈的体积比为1:1~1:3,菌体质量与混合液总体积比为0.5~1mg:10ul；混匀后静置；将混合溶液离心，吸取上清液点于样品点上，风干后加入基质溶液覆盖，干燥后即可进行菌体鉴定。本发明有效的缩短了提取时间，实现对菌体进行快速高效的提取，大大增加了图谱特征峰数量及图谱峰质量，提高了鉴定准确率。